Name: Essais biologiques électroantennographique comme outil de dépistage pour les substances volatiles de la plante hôte (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-05-06T14:00:00.000+00:00
Duration: 12 min 43 s
Description: Découvrez l'analyse électroantennographique pour le dépistage rapide des volatiles de plantes hôtes chez Amyelois transitella. Cette méthode permet d'évaluer l'activité biologique des composés individuels et des mélanges.

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Cette recherche a été menée en vertu de l&#39;USDA-ARS CRIS projet 5325-42000-037-00D et avec des résultats de CRADA 58-3K95-7-1198 et TFCA 58-5325-8-419. Les auteurs tiennent à remercier Suterra pour le don de l&#39;(Z, Z) -11,13-hexadecadienal, B. Higbee des discussions productives, et J. Baker pour l&#39;assistance technique.

<ol><li>Bruce, T. J. A., Wadhams, L. J., Woodcock, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insect+host+location%3A+a+volatile+situation%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+in+Plant+Sci%22%5BJournal%5D)">Insect host location: a volatile situation.</a> Trends in Plant Sci. 10, 1360-1385 (2005).</li>
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<li>Molyneux, R. J., Schieberle, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Compound+identification%3A+a+Journal+of+Agricultural+and+Food+Chemistry+perspective%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Agric.+Food+Chem%22%5BJournal%5D)">Compound identification: a Journal of Agricultural and Food Chemistry perspective.</a> J. Agric. Food Chem. 55, 4625-4629 (2007).</li>
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<li>Lucas, P., Renou, M., Tellier, F., Hammoud, A., Audemard, H., Descoins, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electrophysiology+and+field+activity+of+halogenated+analogs+of+%28E%2CE%29-8-10-dodecadien-1-ol%2C+the+main+pheromone+component+in+codling+moth+%28Cydia+pomonella+L.%29%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Chem.+Ecol%22%5BJournal%5D)">Electrophysiology and field activity of halogenated analogs of (E,E)-8-10-dodecadien-1-ol, the main pheromone component in codling moth (Cydia pomonella L.).</a> J. Chem. Ecol. 20, 489-503 (1994).</li>
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<li>Burks, C. S., Brandl, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Seasonal+abundance+of+navel+orangeworm+%28Leipidoptera%3A+Pyralidae%29+in+figs+and+effect+of+peripheral+aerosol+dispensers+on+sexual+communication%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Insect+Sci%22%5BJournal%5D)">Seasonal abundance of navel orangeworm (Leipidoptera: Pyralidae) in figs and effect of peripheral aerosol dispensers on sexual communication.</a> J. Insect Sci. 4, 1-8 (2004).</li>
</ol>

L&#39;auteur a une recherche de coopération existantes et d&#39;un accord de développement avec la société Paramount agriculture, une société ayant des liens avec Suterra LLC.

Utilisation des enregistrements électroantennogramme comme un bio-essai pour déterminer les réponses chimioréception d&#39;un insecte cible est assez commun et de nombreuses études utilisant des EAG comme un détecteur pour les effluents d&#39;une chromatographie en phase gazeuse (GC-EAD) peut être trouvé dans la littérature. 9,10 La méthode illustrée fournira un dépistage rapide de quantités équivalentes de composants volatils avec des réplications d&#39;assignation d&#39;confiant de la réactivité relative. L...

<table border="1"><tbody><tr><td> Nom du réactif </td><td> Entreprise </td><td> Numéro de catalogue </td><td> Commentaires </td></tr><tr><td> Acétophénone </td><td> Alfa-Aesar </td><td> A12727 </td><td> Femme contrôle positif </td></tr><tr><td> (Z, Z) -11,13-Hexadecadienal </td><td> Suterra </td><td></td><td> Homme de contrôle positif </td></tr><tr><td> α-humulène </td><td> Aldrich </td><td> 53675 </td><td> Sesquiterpène </td></tr><tr><td> 2-undécanone </td><td> Aldrich </td><td> U1303 </td><td> Dérivé d&#39;acide gras </td></tr><tr><td> 2-phényl éthanol </td><td> Aldrich </td><td> 77861 </td><td> Benzénoïde </td></tr><tr><td> Pentane </td><td> EMD </td><td> PX0167-1 </td><td> Solvant </td></tr><tr><td> Contrôleur d&#39;acquisition 4-Channel </td><td> Syntech </td><td> JeCAD-4 </td><td></td></tr><tr><td> EAG sonde, pré-amplificateur </td><td> Syntech </td><td> Type de PRG-2 </td><td></td></tr><tr><td> Support d&#39;antenne pour </td><td> Syntech </td><td> Pour PRG-2 </td><td> Électrode fourche </td></tr><tr><td> Contrôleur de stimulation </td><td> Syntech </td><td> CS-55 </td><td> Le débit d&#39;air et de bouffées </td></tr><tr><td> Gel électrode Spectra </td><td> Parker </td><td> 12-02 </td><td></td></tr><tr><td> Disques biologiques sur </td><td> Whatman </td><td> 2017-006 </td><td> 6 mm </td></tr><tr><td> Pipettes Pasteur </td><td> VWR </td><td> 14673-010 </td><td> 5 ¾ &quot;(14,6 cm) </td></tr><tr><td> Parafilm M </td><td> Bemis </td><td> PM-992 </td><td></td></tr></tbody></table>

essais biologiques électroantennographique comme outil de dépistage pour les substances volatiles de la plante hôte

Electroantennographic Bioassay as a Screening Tool for Host Plant Volatiles

Volatiles des plantes jouent un rôle important dans les interactions plantes-insectes. Les insectes herbivores utilisent volatiles végétales, connues sous le nom kairomones, afin de localiser leur plante hôte. 1,2 Quand une plante hôte est un élément important des dommages agronomiques alimentation des produits de base par des insectes ravageurs peuvent causer de graves pertes économiques aux producteurs. En conséquence, kairomones peut être utilisé comme appâts pour attirer ou confondre ces insectes et, par conséquent, offrent une alternative écologique aux pesticides pour lutter contre les insectes. 3 Malheureusement, les plantes peuvent émettre un grand nombre volatiles avec des compositions différentes et des ratios d&#39;émissions dépendent de la phénologie de la marchandise ou l&#39;heure de la journée. Cela rend l&#39;identification de composants biologiquement actifs ou des mélanges de composants volatils un processus ardu. Pour aider à identifier les composants bioactifs des émissions volatiles de la plante hôte, nous comptons les Electroantennographie en laboratoire de dépistage bioessai (EAG). EAG est un outil efficace pour évaluer et enred électrophysiologique des réponses olfactives d&#39;un insecte via leurs récepteurs antennaires. Le processus de sélection EAG peut aider à réduire le nombre de volatiles testés pour identifier les composants bioactifs prometteurs. Cependant, les essais biologiques EAG seulement fournir des informations sur l&#39;activation des récepteurs. Il ne fournit pas d&#39;informations sur le type de comportement de l&#39;insecte le composé provoque, ce qui pourrait être aussi un attractif, le type de répulsif ou l&#39;autre de la réponse comportementale. Volatiles obtenir une réponse significative par EAG, par rapport à un contrôle positif approprié, sont généralement prises à des essais complémentaires pour les réponses comportementales de l&#39;insecte ravageur. Le dispositif expérimental présenté détaille la méthodologie employée pour dépister à base d&#39;amandes volatiles de la plante hôte 4,5 par la mesure des réponses électrophysiologiques antennaires d&#39;un adulte orangeworm insecte ravageur du nombril (Amyelois transitella) à des composants individuels et des mélanges simples de composants via EAG biologique. La méthode utilise deux exantennes circoncis placé à travers un support &quot;fork&quot; de l&#39;électrode. Le protocole a démontré ici présente un rapide, à haut débit méthode standardisée pour volatiles de dépistage. Chaque volatile est à un ensemble, quantité constante d&#39;uniformiser le niveau du stimulus et donc de permettre des réponses antennaires à être représentatives de la chemoreceptivity relative. Le contrôle négatif permet d&#39;éliminer la réponse électrophysiologique à la fois la force du solvant résiduel et mécanique de la bouffée. Le contrôle positif (dans ce acétophénone par exemple) est un composé unique qui a suscité une réponse cohérente à partir du nombril orangeworm mâle et femelle (NOW) papillon. Une norme écomone supplémentaire qui fournit la réponse cohérente et est utilisé pour des études de dosage biologique avec le mâle MAINTENANT papillon est (Z, Z) -11,13-hexdecadienal, un composant aldéhyde de la phéromone sexuelle femelle produite en 6-8.

Une méthode pour rapidement volatiles écran d&#39;accueil de plantes par la mesure de la réponse électrophysiologique de orangeworm nombril adulte (<em&gt; Amyelois transitella</em&gt;) Antennes à des composants individuels et des mélanges par analyse électroantennographique est démontrée.

Essais biologiques électroantennographique comme outil de dépistage pour les substances volatiles de la plante hôte

Les composés volatils des plantes jouent un rôle important dans les interactions plante-insecte. Les insectes herbivores utilisent les volatils des plantes, appelés kairomones, pour localiser leur hôte...

L'objectif général de cette procédure est de cribler rapidement un grand nombre de composés volatils de plantes hôtes afin d'évaluer leur activité biologique potentielle. Cela est réalisé en premier lieu par la collecte et l'analyse par GCMS des composés volatils de la plante hôte d'intérêt. Ensuite, les composants chimiques sont identifiés et vérifiés.La troisième étape consiste à analyser individuellement les composants en répliques suffisantes pour leur bioactivité par analyse électrographique. L'étape finale consiste à formuler et évaluer des mélanges de composants actifs. En définitive, les résultats peuvent fournir une série tronquée de composants ou un mélange de composants prêts à être étudiés plus en détail dans des expériences comportementales avec l'insecte ciblé.Le principal avantage de cette technique par rapport aux méthodes existantes, telles que les études comportementales longues, est que le criblage rapide par analyse électrographique réduit considérablement le nombre de composés devant être sélectionnés pour d'autres études démontrant une procédure. M. Wage est-il technicien dans mon laboratoire ? Une fois les composés volatils pertinents identifiés par chromatog

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Insecte systèmes olfactifs offrent des occasions uniques pour l'enregistrement odorant réponses induites dans les formes de electroantennograms (EAG) et les enregistrements sensillum unique (SSR), qui sont résumées les réponses de tous les neurones récepteurs olfactifs (Orns) situé sur l'antenne et de ceux logés dans différents sensilles, respectivement.

Mesures électrophysiologiques à partir d&#39;un système de Moth olfactive

Signaux olfactifs médiation de nombreux comportements différents chez les insectes, et sont des mélanges souvent complexes composées de quelques dizaines à quelques centaines de composés volatils. Chromatographie en phase gazeuse avec multi-canal d'enregistrement dans le lobe antennaire des insectes, nous décrivons une méthode pour l'identification de composés bioactifs.

L&#39;identification des composés volatils olfactifs chromatographie en phase gazeuse-à logements multiples enregistrements (GCMR) dans le lobe antennaire des insectes

Dans cette vidéo, nous faisons la démonstration d’un test de dépistage pour identifier l’efficacité des nématicides à petites molécules contre les nématodes. Les nématicides sont considérés comme efficaces s’ils entraînent une diminution du nombre de nématodes mobiles dans l’échantillon après l’exposition.

Essai de criblage de nématicides à petites molécules : une méthode à débit moyen pour cribler des nématicides potentiels contre Ditylenchus dipsaci

Une verticale, labyrinthe en T olfactomètre est décrite pour le dosage de la réponse comportementale des arthropodes. L'olfactomètre permet à l'expérimentateur de mesurer les choix effectués par les sujets testés lorsqu'ils sont soumis à deux champs d'odeurs potentielles. Tant d'attraction et de répulsion à partir de substances odorantes peuvent être mesurés avec cet appareil.

Vertical Test Choix labyrinthe en T pour la réponse aux arthropodes odorants

Nous décrivons un protocole d’utilisation d’antennes d’insectes sous forme d’électroanténogrammes (EAG) sur des robots autonomes. Notre conception expérimentale permet des enregistrements stables en une journée et résout les taches d’odeurs individuelles jusqu’à 10 Hz. L’efficacité des capteurs EAG pour les recherches olfactives est démontrée en conduisant un robot vers une source d’odeurs.

Utilisation d&#39;insectes électroantennogramme capteurs sur autonome Robots Recherches olfactives

L'utilisation de deux méthodes pour estimer l'expression des gènes dans les grands appendices gustatives de Aedes aegypti, nous avons identifié l'ensemble des gènes sous-jacents supposément les réponses neuronales à des composés amers et de répulsion, comme déterminé par l'examen électrophysiologique.

Physiologiques Recordings et ARN séquençage des annexes gustatives du Mosquito fièvre jaune Aedes aegypti

Arènes de biodosage photo-attraction servent à déterminer l’ou des couleurs lumière optimales afin de maximiser l’attraction des insectes ; Cependant bioessais et méthodes sont spécifiques pour cibler les habitats et les comportements de l’insectes. Modifications et équipements personnalisables sont expliquées pour insectes nocturnes ou diurnes et terrestres ou aériennes.

Éléments clés de Photo Attraction Bioassay for Studies insectes ou les programmes de surveillance

Nous décrivons ici la construction et l’utilisation d’un tunnel de vent pour odeur véhiculée par des tests comportements avec des insectes. La conception du tunnel de vent facilite la libération des sources d’odeurs par plusieurs méthodes, avec ou sans stimuli visuels. Des expériences de soufflerie sont des moyens importants pour identifier les substances chimiques volatiles actives sur le plan comportemental.

Une soufflerie pour odeur véhiculée par des tests comportements insectes

Le présent article détaille un protocole étape par étape pour des électroantennogrammes réussis et à faible bruit dans plusieurs genres de moustiques, y compris les femelles et les mâles.

Un guide étape par étape de l’électroanténnographie des moustiques

Cette étude introduit des protocoles expérimentaux pour un drone bio-hybride de détection d’odeurs basé sur des antennes silkmoth. Le fonctionnement d’un dispositif expérimental d’électroanténogramme avec des antennes silkmoth est présenté, en plus de la structure d’un drone bio-hybride conçu pour la localisation des sources d’odeurs à l’aide de l’algorithme spiral-surge.

Drone bio-hybride de détection d’odeurs basé sur l’électroantennographie utilisant des antennes Silkmoth pour la localisation des sources d’odeurs

Ce protocole établit des méthodes pour extraire et quantifier les réponses à la phéromone sexuelle volatile chez C. elegans, fournissant des outils pour étudier la communication chimique et la trajectoire de navigation.

Extraction de phéromones sexuelles volatiles et test de chimioattraction chez Caenorhabditis elegans

Découvrez l'analyse électroantennographique pour le dépistage rapide des volatiles de plantes hôtes chez Amyelois transitella. Cette méthode permet d'évaluer l'activité biologique des composés individuels et des mélanges.

Essais biologiques électroantennographique comme outil de dépistage pour les substances volatiles de la plante hôte

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