Name: Lanalyse de la maturation des cellules dendritiques pulmonaire et de la migration au cours de linflammation allergique des voies respiratoires (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-07-23T12:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 52 s
Description: Découvrez l'analyse de la maturation et de la migration des cellules dendritiques pulmonaires lors de l'inflammation allergique des voies respiratoires chez la souris. Cette méthode par cytométrie en flux évalue les réponses immunitaires.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Ce travail a été financé par des subventions des IRSC et des FC au Canada au Dr Jim Hu et par une bourse de doctorat décerné à Rahul Kushwah par CF Canada.

1. Sensibilisation des souris avec de l&#39;ovalbumine <ol><li> Préparer une solution d&#39;OVA (grade V; Sigma, MO) dans du PBS stérile à une concentration de 1 mg / ml (solution peut être conservée à -80 ° C). </li><li> Afin de préparer OVA-Alum mélange, prendre alun dans un tube et ajouter la solution d&#39;OVA dans un goutte à goutte tout en vortex le tube à un ratio de 1:1. Remuer le mélange pendant 30 minutes et utiliser tout de suite après le mélange. </li><li> En utilisant une seringue de 1 ml, injecter 0,2 ml du mélange dans la cavité péritonéale de la souris et répétez l&#39;injection à nouveau au bout de 2 semaines. </li></ol> 2. Défi intranasale de souris avec de l&#39;ovalbumine étiqueté FITC <ol><li> 7 jours après la deuxième injection de OVA-Alum, les souris sont prêts à être contestée par voie intranasale avec OVA-FITC. </li><li> Préparer une solution d&#39;OVA-FITC (Sigma) à l&#39;aide du PBS stérile à une concentration de 1 mg / ml et conserver en aliquots à -80 ° C. </li><li> Placez une gaze stérile au fond d&#39;un tube Falcon de 50 ml et dans un h chimiqueood, ajoutez 5 ml de Aerrane sur la gaze. Afin d&#39;anesthésier les souris, diriger l&#39;animal dans le tube pendant quelques secondes environ 5-10. </li><li> Maintenez l&#39;animal anesthésié dans une position verticale et en utilisant des pointes de pipette stériles, pipette 100 ul de la solution d&#39;OVA-FITC sur les narines de souris dans un mode goutte à goutte. </li><li> Répétez défi intranasale avec de l&#39;OVA-FITC pour les deux prochains jours. </li></ol> 3. Préparation de la simple cellule de suspension à partir des poumons et les ganglions lymphatiques drainant <ol><li> Sacrifiez les souris en utilisant une injection intrapéritonéale de Euthanyl. </li><li> Afin de réduire la contamination des macrophages, ce qui peut compliquer l&#39;analyse DC, lavage du poumon est réalisée. Pour un lavage des poumons, trachées de souris sont brièvement exposés et une canule avec un cathéter et d&#39;une seringue; en utilisant PBS glacé avec 5 mM d&#39;EDTA, du tractus respiratoire inférieur est rincé 3 fois pour enlever les cellules à partir des espaces alvéolaires. </li><li> Perfuser les poumons avec 10 ml de PBS contenant 10 U / ml hepardans le ventricule droit par l&#39;intermédiaire du cœur, pour éliminer les cellules sanguines du système vasculaire des poumons. Effectuez les perfusions jusqu&#39;à ce que les poumons deviennent blancs, indicative de la suppression de la plupart des cellules sanguines. Ceci est particulièrement important pour éliminer les cellules contaminantes du sang périphérique. </li><li> Disséquer les poumons et enlever les ganglions lymphatiques médiastinaux (MLN) et placez les ganglions lymphatiques dans un plat à part. (Essayez de minimiser l&#39;exposition des tissus à la lumière pour éviter la trempe de FITC fluorescence.) </li><li> Placez les poumons sur une boîte de Pétri et émincer l&#39;aide de ciseaux. Suivant digérer les poumons pendant 25 minutes à 37 ° C en utilisant 250 U / ml de collagénase D (Roche) et ajouter de l&#39;EDTA (10 mM de concentration finale) pour les 5 prochaines minutes pour arrêter l&#39;activité de la collagénase. </li><li> Passez les fragments de poumons digérés à travers une passoire 100 um cellulaire et d&#39;effectuer une lyse hypotonique à éliminer les érythrocytes. La suspension cellulaire unique est prêt pour une analyse plus poussée des pays en développement. </li><li> Afin de préparer la suspension cellulaire unique à partir du MLN, tfaciliter la MLN l&#39;aide d&#39;aiguilles fines et digérer avec de la collagénase comme décrit ci-dessus suivie par la tension à travers un tamis cellulaire. </li></ol> 4. Coloration pour DC Marqueurs pour évaluer la maturation / migration <ol><li> Afin d&#39;identifier les pays en développement dans les poumons, la coloration est effectuée pour CD11c et CD11b. En outre d&#39;évaluer la maturation, la coloration est effectuée pour CD86 et CD80, qui sont régulés à la hausse comme PED subissent une maturation. CD11c + CD11b cellules + + OVA-FITC dans le MLN sont identifiés comme les PED pulmonaires migrateurs à partir des poumons vers le MLN en réponse au défi des voies respiratoires OVA. </li><li> Suspendre les cellules à une concentration de 10 x 10 6 cellules / ml dans tampon FACS (PBS avec 1% de FBS et 1 mM EDTA) et aliquote 150 pi de suspension cellulaire / tube pour la coloration FACS. Pour l&#39;identification des pays en développement du poumon, taches suivantes sont nécessaires: le contrôle non marqué (cellules pulmonaires de souris ne sont pas exposés à l&#39;OVA-FITC), OVA-FITC de contrôle, CD11c de contrôle unique, CD11b de contrôle unique, CD11b+ CD11c + double contrôle, CD11b + OVA-FITC + double contrôle, CD11c + OVA-FITC + double contrôle, CMH II de contrôle unique, CD86 de contrôle unique, CD80 de contrôle unique et des échantillons colorés pour OVA-FITC + CD11c + CD11b + + MHCII , OVA-FITC + CD11c + CD86 + CD11b + et OVA-FITC + CD11c + CD80 + CD11b +. </li><li> À évaluer la migration DC, la numération des cellules absolues de la suspension cellulaire unique à partir MLN et ensuite préparer les tubes suivantes: le contrôle non marqué (MLN cellules de souris non exposées à l&#39;OVA-FITC), les OVA-FITC de commande, CD11c + de contrôle unique, CD11b + double contrôle, CD11b + OVA-FITC + double contrôle, CD11c + OVA-FITC + double contrôle et CD11c + CD11b échantillons + + OVA-FITC. </li></ol> 5. Les résultats représentatifs Les points dans le temps requis pour la sensibilisation par voie intrapéritonéale à induire une inflammation allergique des voies respiratoires est important et doit être réalisée comme le montre la figure 1. Après une sensibilisation par voie intrapéritonéale et le défi OVA voies respiratoires, afin de confirmer l&#39;induction de l&#39;inflammation des voies allergique, certaines souris peuvent être sacrifiés et les analyses histologiques peuvent être effectués sur les sections du poumon comme le montre la figure 2. Présence de cellules inflammatoires peuvent être confirmés par hématoxyline et éosine (Figure 2A) et la présence de la production de mucus peuvent être évaluées par périodique-acid-Schiff tache (figure 2B). Au total, ce sera de confirmer l&#39;induction de l&#39;inflammation des voies allergique suite à l&#39;OVA défi d&#39;OVA-souris sensibilisées 8. En revanche, les articles du poumon chez les souris traitées au sérum devraient être libres de toute inflammation ainsi que l&#39;absence de toute la production de mucus. En outre, suivant défi OVA, pulmonaire PED UEDN<html> la maturation et la migration RGO après les ganglions lymphatiques drainant. L&#39;analyse des cellules CD11c + dans les ganglions lymphatiques médiastinaux (MLN) à partir de souris sensibilisées et a contesté avec de l&#39;OVA est prévu pour afficher une plus grande proportion de cellules CD11c + par rapport à la solution saline souris traitées (figure 3A). En outre, l&#39;analyse de la numération absolue de CD11c + CD11b + OVA-FITC + cellules dans le MLN de souris OVA-sensibilisés et contestée, devrait montrer une significativement plus élevé (c.-à-plusieurs fois supérieures) compte que les homologues de salins les souris traitées ( La figure 3B). <img alt="Figure 1" src="/files/ftp_upload/4014/4014fig1.jpg" /> Figure 1. Le protocole expérimental pour l&#39;induction de l&#39;ovalbumine (OVA) induit l&#39;inflammation allergique des voies respiratoires chez la souris le long des voies aériennes avec le défi avec FITC étiqueté ovalbumine (OVA-FITC). fig2.jpg &quot;/&gt; Sensibilisation figure 2. OVA suivie par défi voies aériennes OVA conduit à l&#39;induction de voies aériennes inflammation allergique identifiée par coloration d&#39;hématoxyline et éosine de sections du poumon indiqués dans (A) et mène également à la production de mucus dans les voies respiratoires telles qu&#39;identifiées par coloration de Schiff acide périodique des poumons sections comme indiqué dans (B). <img alt="Figure 3" src="/files/ftp_upload/4014/4014fig3.jpg" /> Figure 3. OVA-FITC défi induit la migration DC à partir des poumons vers les ganglions lymphatiques médiastinaux (MLN). (A) des parcelles par cytométrie en flux représentant des proportions de cellules CD11c + dans le MLN de contrôle ou de l&#39;OVA souris sensibilisées. (B) des valeurs absolues de CD11c + + cellules CD11b + OVA-FITC dans le MLN de souris salines ou OVA-sensibilisés. * P &lt;0,05. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/4014/4014fig3large.jpg" target="_blank">Cliquez ici pour agrandir la figure</a> .

<ol><li>Kushwah, R., Hu, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+dendritic+cells+in+the+induction+of+regulatory+T+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Biosci%22%5BJournal%5D)">Role of dendritic cells in the induction of regulatory T cells.</a> Cell Biosci. 20, (2011).</li>
<li>Kushwah, R., Hu, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Complexity+of+dendritic+cell+subsets+and+their+function+in+the+host+immune+system%5BTitle%5D)+AND+%22Immunology%22%5BJournal%5D)">Complexity of dendritic cell subsets and their function in the host immune system.</a> Immunology. 133, 409-419 (2011).</li>
<li>Lambrecht, B. N., Hammad, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Taking+our+breath+away%3A+dendritic+cells+in+the+pathogenesis+of+asthma%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Immunol%22%5BJournal%5D)">Taking our breath away: dendritic cells in the pathogenesis of asthma.</a> Nat Rev Immunol. 3, 994-1003 (2003).</li>
<li>Hammad, H., Lambrecht, B. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dendritic+cells+and+epithelial+cells%3A+linking+innate+and+adaptive+immunity+in+asthma%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Rev.+Immunol%22%5BJournal%5D)">Dendritic cells and epithelial cells: linking innate and adaptive immunity in asthma.</a> Nat. Rev. Immunol. 8, 193-204 (2008).</li>
<li>Lloyd, C. M., Murdoch, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tolerizing+allergic+responses+in+the+lung%5BTitle%5D)+AND+%22Mucosal.+Immunol%22%5BJournal%5D)">Tolerizing allergic responses in the lung.</a> Mucosal. Immunol. 3, 334-344 (2010).</li>
<li>Herz, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+relevance+of+murine+animal+models+to+study+the+development+of+allergic+bronchial+asthma%5BTitle%5D)+AND+%22Immunol.+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">The relevance of murine animal models to study the development of allergic bronchial asthma.</a> Immunol. Cell Biol. 74, 209-217 (1038).</li>
<li>Herz, U., Lumpp, U., Daser, A., Gelfand, E. W., Renz, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Murine+animal+models+to+study+the+central+role+of+T+cells+in+immediate-type+hypersensitivity+responses%5BTitle%5D)+AND+%22Adv.+Exp.+Med.+Biol%22%5BJournal%5D)">Murine animal models to study the central role of T cells in immediate-type hypersensitivity responses.</a> Adv. Exp. Med. Biol. 409, 25-32 (1996).</li>
<li>Nakae, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((TNF+can+contribute+to+multiple+features+of+ovalbumin-induced+allergic+inflammation+of+the+airways+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Allergy+Clin.+Immunol%22%5BJournal%5D)">TNF can contribute to multiple features of ovalbumin-induced allergic inflammation of the airways in mice.</a> J. Allergy Clin. Immunol. 119, 680-686 (2007).</li>
<li>Guth, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lung+environment+determines+unique+phenotype+of+alveolar+macrophages%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Lung+Cell+Mol.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Lung environment determines unique phenotype of alveolar macrophages.</a> Am. J. Physiol. Lung Cell Mol. Physiol. 296, L936-L946 (2009).</li>
<li>Kushwah, R., Cao, H., Hu, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+pulmonary+T+cell+response+to+helper-dependent+adenoviral+vectors+following+intranasal+delivery%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Immunol%22%5BJournal%5D)">Characterization of pulmonary T cell response to helper-dependent adenoviral vectors following intranasal delivery.</a> J. Immunol. 180, 4098-4108 (2008).</li>
<li>Kushwah, R., Oliver, J. R., Zhang, J., Siminovitch, K. A., Hu, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Apoptotic+dendritic+cells+induce+tolerance+in+mice+through+suppression+of+dendritic+cell+maturation+and+induction+of+antigen-specific+regulatory+T+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Immunol%22%5BJournal%5D)">Apoptotic dendritic cells induce tolerance in mice through suppression of dendritic cell maturation and induction of antigen-specific regulatory T cells.</a> J. Immunol. 183, 7104-7118 (2009).</li>
</ol>

Pas de conflits d&#39;intérêt déclarés.

La méthode présentée ici propose une approche basée sur la cytométrie de flux pour analyser les PED pulmonaires, basées sur la livraison d&#39;OVA-FITC pour le défi des voies respiratoires. Ceci permet la surveillance sélective des PED pulmonaires, qui prennent OVA-FITC et par conséquent, les populations de DC, qui sont contrôlés sont effectivement ceux qui participent à la réponse immunitaire des voies respiratoires au cours de l&#39;inflammation induite par OVA allergique des voies respiratoires. Chez les souris de co...

<table border="1"><tbody><tr><td> Nom du réactif </td><td> Entreprise </td><td> Numéro de catalogue </td></tr><tr><td> Ovalbumin </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> A5503 </td></tr><tr><td> Alun </td><td> Thermo Scientific </td><td> 77161 </td></tr><tr><td> OVA-FITC </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> A9771 </td></tr><tr><td> Collagénase D </td><td> Roche </td><td> 11088858001 </td></tr><tr><td> Anticorps </td><td> e-Bioscience </td><td></td></tr></tbody></table>

l&#39;analyse de la maturation des cellules dendritiques pulmonaire et de la migration au cours de l&#39;inflammation allergique des voies respiratoires

Analysis of Pulmonary Dendritic Cell Maturation and Migration during Allergic Airway Inflammation

Les cellules dendritiques (CD) sont les principaux acteurs impliqués dans l&#39;initiation de la réponse immunitaire adaptative en activant les cellules T spécifiques de l&#39;antigène. PED sont présents dans les tissus périphériques à l&#39;état d&#39;équilibre, mais en réponse à une stimulation antigénique, les CD prennent de l&#39;antigène et rapidement migrer vers les ganglions lymphatiques drainant où ils initient la réponse des cellules T contre l&#39;antigène 1,2. En outre, les PED jouent également un rôle clé dans le déclenchement auto-immune ainsi que la réponse immunitaire allergique 3. PED jouer un rôle essentiel dans l&#39;initiation de la réponse immunitaire et l&#39;induction de la tolérance dans le cadre de 4 environnement du poumon. L&#39;environnement du poumon est largement tolérogène, en raison de l&#39;exposition à la vaste gamme d&#39;antigènes de l&#39;environnement 5. Toutefois, chez certaines personnes il ya une rupture de la tolérance, ce qui conduit à l&#39;induction de l&#39;allergie et l&#39;asthme. Dans cette étude, nous décrivons une stratégie, qui peut être utilisé pour surveiller des voies respiratoires DC maturation et migration en réponse à l&#39;antigène utilisé pour la sensibilisation. La mesure de la maturation des voies respiratoires DC et de la migration permet d&#39;évaluer la cinétique de la réponse immunitaire au cours de l&#39;inflammation allergique des voies respiratoires et aide aussi à comprendre l&#39;ampleur de la réponse immunitaire subséquente ainsi que les mécanismes sous-jacents. Notre stratégie est basée sur l&#39;utilisation de l&#39;ovalbumine comme un agent sensibilisant. Ovalbumin induite par l&#39;asthme allergique est un modèle largement utilisé pour reproduire l&#39;éosinophilie des voies aériennes, l&#39;inflammation pulmonaire et une élévation des taux d&#39;IgE trouvés lors de l&#39;asthme 6,7. Après la sensibilisation, les souris sont contestés par l&#39;administration intranasale d&#39;ovalbumine marquée FITC, ce qui permet d&#39;étiquetage spécifique des PED voies respiratoires ovalbumine absorption qui. Ensuite, en utilisant plusieurs marqueurs spécifiques DC, nous pouvons évaluer la maturation de ces pays en développement et peuvent également évaluer leur migration vers les ganglions lymphatiques drainant en employant la cytométrie en flux.

Nous décrivons une stratégie pour surveiller la maturation et la migration des cellules dendritiques pulmonaires en réponse à l&#39;ovalbumine dans le cadre de l&#39;inflammation induite par l&#39;ovalbumine allergique des voies respiratoires. Cette stratégie peut être modifié afin d&#39;évaluer la migration des cellules dendritiques pulmonaires dans les paramètres de l&#39;infection.

L&#39;analyse de la maturation des cellules dendritiques pulmonaire et de la migration au cours de l&#39;inflammation allergique des voies respiratoires

Les cellules dendritiques (CD) sont les acteurs clés impliqués dans l'initiation de la réponse immunitaire adaptative en activant les lymphocytes T antigène-spécifiques. Les CD sont présentes dans ...

L'objectif de cette procédure est d'évaluer la maturation et la migration des cellules dendritiques pulmonaires, ou DC, au cours d'une inflammation allergique des voies respiratoires induite par le Val Boomin chez la souris. Cela est réalisé en sensibilisant d'abord les souris au Val Boomin, puis en les exposant par voie respiratoire au Val Boomin marqué avec fitsy. Ensuite, les poumons et les ganglions lymphatiques médiastinaux sont prélevés.Enfin, une suspension de cellules uniques est préparée à partir des tissus pulmonaires et ganglionnaires. En définitive, le statut de maturation et le nombre absolu de cellules dendritiques Pullman détectées dans le ganglion lymphatique médiastinal après un défi par FITC Val Boomin peuvent être évalués par analyse en cytométrie en flux. Cette méthode peut nous aider à répondre à des questions clés concernant les réponses immunitaires pulmonaires, telles que la maturation des cellules dendritiques suite à une exposition à un antigène, et leur migration vers les ganglions lymphatiques de drainage.Et si elles migrent, quelle est la vitesse de migration. Commencez par ajouter, goutte à goutte, une solution fraîchement préparée de Val Boomin, en ra

analysis-pulmonary-dendritic-cell-maturation-migration-during

Research

Recherche

JoVE Journal

Immunology and Infection

Immunologie et infection

Une préparation hautement purifiée de cellules de souris pulmonaires dendritiques est décrite. Un accent particulier est donné à l'isolement de sous-ensemble de cellules dendritiques conventionnelles.

L&#39;isolement des cellules de souris poumon dendritiques

Les cellules immunitaires résidentes dans les poumons, y compris les cellules dendritiques (DC) chez l’homme, sont essentielles à la défense contre les agents pathogènes et les allergènes inhalés. Cependant, en raison de la rareté du tissu pulmonaire humain, les études sont limitées. Ce travail présente des protocoles de traitement des biopsies endobronchiques de la muqueuse humaine pour l’étude des DC pulmonaires à l’aide de l’immunohistochimie et de la cytométrie en flux.

Human Cells Lung dendritiques: Répartition spatiale et phénotypique identification dans endobronchique Biopsies par immunohistochimie et cytométrie de flux

Nous décrivons un procédé pour générer des tranches de poumon couper avec précision (PCLS) et les immunocoloration pour visualiser la localisation de divers types de cellules immunitaires dans le poumon. Notre protocole peut être étendu pour visualiser l'emplacement et la fonction de différents types de cellules dans une variété de conditions.

coupe de précision de la souris Tranches Lung pour visualiser les cellules vivantes pulmonaire dendritiques

Nous présentons ici un protocole visant à développer et caractériser les cellules dendritiques tolérogène (TolDCs) et évaluer leur utilité immunothérapeutique.

Développement et caractérisation fonctionnelle des cellules dendritiques tolérogène murin

L’objectif du présent article est de fournir une description détaillée des procédures recommandées pour évaluer la fonction respiratoire chez des souris conscientes par pléthysmographie double-chambre.

Évaluation de la fonction respiratoire chez des souris conscientes par pléthysmographie Double-chambre

Le protocole introduit ici permet la caractérisation de la capacité de radioralliement pulmonaire des lymphocytes humains primaires dans des conditions inflammatoires in vivo. Une infiltration pulmonaire des cellules immunitaires humaines moutschen transférés dans un modèle murin d’inflammation allergique peut être imagée et quantifiée par microscopie à fluorescence lumière-feuille de tissu pulmonaire chimiquement défrichées.

Avancée d’imagerie du poumon Homing des Lymphocytes humains dans un modèle In Vivo de l’Inflammation allergique, issue des feuilles lumière microscopie expérimentale

Dans ce protocole, les lymphocytes sont placés dans la chambre supérieure d'un système de transmigration, séparés de la chambre inférieure par une membrane poreuse. La chimiokine est ajoutée à la chambre inférieure, qui induit une migration active le long d'un gradient de chimiokine. Après 48 h, les lymphocytes sont comptés dans les deux chambres pour quantifier la transmigration.

Évaluation de la migration des lymphocytes dans un système de transmigration ex vivo

Ce protocole décrit l’utilisation de la cytométrie en flux pour identifier les changements dans la composition des cellules immunitaires, le profil des cytokines et le profil de chimiokine dans l’environnement pulmonaire après une occlusion transitoire de l’artère cérébrale moyenne, un modèle murin d’AVC ischémique.

Caractérisation des cellules immunitaires et des médiateurs pro-inflammatoires en milieu pulmonaire

Nous fournissons ici un protocole pour le dépistage des facteurs de transcription potentiels impliqués dans le développement de cellules dendritiques (DC) en utilisant la transduction lentivirale de l’ARNh pour obtenir des lignées cellulaires knockdown stables pour la différenciation DC in vitro .

Étude du développement de cellules dendritiques par knockdown de gènes médiés par l’ARN en épingle à cheveux court dans une lignée cellulaire hématopoïétique et progénitrice in vitro

Dans cette étude, nous présentons un protocole efficace et reproductible pour isoler les populations immunitaires du système respiratoire murin. Nous fournissons également une méthode pour l’identification de toutes les cellules immunitaires innées et adaptatives qui résident dans les poumons de souris saines, en utilisant un panel de cytométrie en flux à base de 9 couleurs.

Analyse cytométrique en flux pour l’identification des cellules immunitaires innées et adaptatives du poumon murin

Découvrez l'analyse de la maturation et de la migration des cellules dendritiques pulmonaires lors de l'inflammation allergique des voies respiratoires chez la souris. Cette méthode par cytométrie en flux évalue les réponses immunitaires.

Lanalyse de la maturation des cellules dendritiques pulmonaire et de la migration au cours de linflammation allergique des voies respiratoires (Vidéo) | JoVE Journal

L'analyse de la maturation des cellules dendritiques pulmonaire et de la migration au cours de l'inflammation allergique des voies respiratoires

Explorer plus de vidéos