Name: Former une technique microchirurgicale sophistiquée: Interposition de greffe veine jugulaire externe dans lartère carotide commune chez les rats (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-11-11T14:00:00.000+00:00
Duration: 15 min 21 s
Description: Apprenez la technique de microchirurgie par manchon pour greffer la veine jugulaire externe dans l'artère carotide commune chez le rat Sprague Dawley. Cette méthode simplifiée améliore la survie des greffons et forme les chirurgiens débutants.

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Cette étude a été financée par le programme de promotion de la recherche &quot;START&quot; de la faculté de médecine de l&#39;université RWTH Aachen, Allemagne (titre: &quot;Die artérialisation venöser Gefäße&quot; START 690753). Nous tenons à remercier Mme Marie-Jeanne Blümich pour son aide excellent montage.

1. Animaux d&#39;expérimentation <ol><li> Obtenir une approbation du comité d&#39;éthique local pour toutes les expériences qui seront effectuées, conformément aux directives de protection des animaux FELASA. </li><li> Utilisez femelles Sprague-Dawley disponibles à l&#39;achat à partir de n&#39;importe quel éleveur commercial (par exemple Charles River Wiga GmbH, Sulzfeld, Allemagne). Nous avons utilisé 21 animaux répartis en trois groupes de 7 animaux chacun, qui ont été sacrifiés à 3, 6 et 12 semaines après l&#39;opération. Au moment de l&#39;achat, les animaux doivent être de 12 semaines d&#39;âge et pèse 250-300 g. </li><li> Garder les animaux dans les chambres à atmosphère contrôlée ayant une température ambiante de 21 ° C, 60% d&#39;humidité relative et de 12 h cycle lumière-obscurité avec un accès libre à la nourriture et à l&#39;eau. </li></ol> 2. L&#39;anesthésie et la préparation d&#39;Exploitation <ol><li> Induire une anesthésie générale en utilisant une boîte en plexiglas connecté à l&#39;appareil d&#39;anesthésie, fixé à un débit d&#39;oxygène de 1 L / min, et un vaporisateur isofluorane wvec gaz anesthésique 5%. </li><li> Maintenir l&#39;anesthésie avec le vaporisateur isofluorane à 1,5% dès que les réflexes profonds sensorielles des animaux sont supprimées. </li><li> Fixer les rats en position couchée sur une plaque chauffante corps. </li><li> Préparer la zone de fonctionnement de chaque animal en enlevant sa fourrure avec une crème dépilatoire, sous l&#39;angle de la mâchoire jusqu&#39;à 2 cm au-dessous du manubrium sternal. </li><li> Préparer un champ opératoire stérile en prêtant attention à la zone chirurgicale, la surface préparée sur l&#39;animal et l&#39;avant du chirurgien: </li><ul><li> Nettoyez la table de travail avec un désinfectant. </li><li> Préparer le site d&#39;incision en utilisant plusieurs applications de solution lavage chirurgical (par exemple chlorhexidine et 70% d&#39;alcool isopropylique). Appliquer la chlorhexidine premier, le deuxième alcool, et enfin, la solution de lavage. </li><li> Porter une blouse chirurgicale jetable et des gants chirurgicaux, ou encore, des gants d&#39;examen qui ont été préalablement lavée avecvec un désinfectant chirurgical. </li></ul><li> Utiliser des instruments de microchirurgie stériles dans la procédure de fonctionnement. </li><li> Utiliser un microscope opératoire (Wild Heerbrugg M650, Gais, Suisse) 10-20-grossissement. </li></ol> 3. Anatomie La figure 1 illustre l&#39;anatomie du cou du rat: 1a) Situs avant résection du muscle sterno droit. 1b) Situs après section du muscle sterno droit. 4. Préparation du brassard Couper les poignets dans une longueur de 3 mm à la main à partir d&#39;un tube en plastique (Portex, diamètre intérieur 0,75 mm, diamètre extérieur 0,94 mm, Smiths Medical, Royaume-Uni). Ces manchettes sont constitués d&#39;un corps de manchon tubulaire dont le volume complet du tube en matière plastique, et une poignée de manchon constitué par la moitié du volume du brassard. Le corps et le manche manchette manchette devrait être tout aussi long. La poignée brassard est essentielle pour l&#39;utilisation de la manchette au cours de l&#39;intervention chirurgicale. Après le brassard est enfilé sur le récipient, un mini-pince Bulldog est placé simultanément sur la poignée manchon et le récipient, afin d&#39;éviter des saignements, garder la manchette en position et assurer la stabilité. 5. Technique Cuff <ol><li> Glissez le brassard sur le navire. </li><li> Immédiatement après, retourner la cuve, tirez sur l&#39;extérieur du corps de gaine et le fixer avec une ligature de soie 7-0. De cette manière, le passage de la manchette est recouvert d&#39;endothélium. Par la suite, glisser le greffon veineux sur le corps brassard et fixez-le avec une nouvelle ligature de soie 7-0. Pour prévenir la formation de thrombus, il est indispensable de fixer l&#39;attache greffon veineux très proche de la marge de manchette afin d&#39;éviter la mise en contact du sang à partir de l&#39;attache de maintien de l&#39;artère en place. Ceci est crucial pour l&#39;anastomose distale en raison de la direction de l&#39;écoulement du sang. Cependant, selon les auteurs, il n&#39;est pas considéréessentiel pour l&#39;anastomose proximale pour la même raison. </li></ol> 6. Procédure chirurgicale 6.1 Préparation de la veine jugulaire droite externe <ol><li> Faire une d&#39;environ 2,5 cm de long incision médiane du col directe au-dessus du manubrium sternal. </li><li> Séparer complètement de 1 cm de long segment de la veine jugulaire droite externe des tissus environnants </li><li> Ligaturer les tributaires veineux avec des sutures en soie 7-0. </li></ol> 6.2 Préparation de l&#39;artère carotide commune droite <ol><li> Préparer le muscle sterno et il transect au milieu. </li><li> Préparer l&#39;artère carotide commune droite avec soin, en veillant à ne pas comprimer l&#39;artère ou la nerf vague. La mobiliser à partir de la bifurcation carotidienne vers le tronc brachio-céphalique. </li><li> Par la suite, le ligaturer deux fois au milieu des sutures de soie 7-0 avant transection. </li><li> Glissez une manchette en nylon consisting d&#39;un corps et un manche (Figure 2a) au-dessus de l&#39;extrémité distale de l&#39;artère carotide commune, grâce à quoi il est important de veiller à ce que la poignée de manchon est derrière le navire (figure 2b). </li><li> Serrer la fin menotté de l&#39;artère carotide commune distale avec une pince Bulldog Mini exactement sur ​​la poignée de manchette pour assurer la stabilité (figure 2c). </li><li> Ensuite, couper l&#39;artère directement derrière la ligature, de sorte que la souche résultante artérielle doit être aussi longue que le corps de gaine. </li><li> Rincer la lumière artérielle avec l&#39;héparine solution saline (20 UI d&#39;héparine / ml de NaCl 0,9%). Régler une boucle de ligature de côté dans la position appropriée pour une utilisation ultérieure. </li><li> Tirez le moignon artériel et le glisser comme un manchon sur le corps de gaine. </li><li> Par la suite, tirez la boucle de ligature et il noeud serré. </li><li> Pour empêcher l&#39;artère de glisser hors de son fourreau, vous pouvez mettre en œuvre une astuce: saisir à la fois la paroi artérielle et la suture avec la main droite simultaneously et avec la pince gauche (figure 2d) faire le nœud (figure 2e). </li><li> Répétez la même procédure pour le moignon proximal artérielle (figure 2f). </li></ol> 6,3 positionnement du greffon veineux <ol><li> D&#39;accise de 1 cm de long segment de la veine jugulaire externe serré </li><li> Comme les deux artères revers sont trop éloignés les uns des autres pour l&#39;interposition veineuse, environ la distance correcte pour cette procédure en utilisant un 3-0 Vicryl-suture qui vous devriez boucle autour de chaque pince mini-Bulldog. </li><li> Croisez les deux sutures. </li><li> Par la suite, retirer les fils de suture dans des directions opposées, ce qui permet le bon positionnement des souches ballonnet artériel (figure 2g) </li><li> Rincer le segment de veine avec la solution saline à l&#39;héparine. </li><li> Glissez une extrémité du segment de veine préalablement inversé au cours de l&#39;artère carotide distale menotté et fixez-le dans la position correctetion avec une soie 7-0 ligature. </li><li> Il est important de noter ici que la circonférence de la veine doit être complètement et uniformément saisi. </li><li> Rincer le segment de veine avec l&#39;héparine de solution saline solution, et glisser l&#39;autre extrémité du segment de veine sur le moignon proximal carotide. </li><li> Remplissez la ligature (figure 2h); </li><li> Enlever les colliers de serrage pour mini bouledogue une après l&#39;autre, sur le premier tronçon de la carotide distale et proximale sur l&#39;une, en permettant ainsi la circulation sanguine et la libre artérialisation de la greffe veineuse (figure 2i). La chirurgie est considérée comme réussie si la circulation sanguine et les pulsations sont observés dans le greffon et l&#39;artère carotide commune (évalué visuellement). </li></ol> 6,4. Fermeture de la plaie Pour le surjet sous-cutanée, utilisez Vicryl 4-0. Pour une suture cutanée en cours d&#39;exécution, utilisez Vicryl 3-0. 7. Récupération et &lt;Traitement postopératoire/ P&gt; <ol><li> Laissez les animaux se remettre de l&#39;anesthésie sur une litière de papier à plat sous une lampe chauffante infrarouge. Ne retournez pas les animaux opérés à la zone d&#39;attente jusqu&#39;à ce que les animaux tous les animaux semblent normaux. </li><li> Après l&#39;opération d&#39;administrer la buprénorphine (Temgésic) de la concentration de 0.03 à 0,05 sc mg / kg de poids corporel toutes les heures 8-12 pour les 2 jours. La buprénorphine peut être administrée juste avant l&#39;induction isofluorane. </li><li> De surveiller les animaux en post-opératoire pour leur état général et des signes de maladie ou d&#39;infection. </li></ol> 8. Mesure du débit sanguin La perméabilité postopératoire du greffon a été prouvé par la mesure du débit sanguin, en utilisant un système de recherche Transonic de mesure du flux sanguin (Modèle: TS420, Transonic Systems Europe BV, Maastricht, Pays-Bas) avec un flowprobe périvasculaire (3 mm, MA3PSB). Le système est basé sur le principe Doppler. 9. Les résultats représentatifs Par faithfully gardant les instructions ci-dessus, la durée moyenne des interventions chirurgicales était d&#39;environ 65 min. Les animaux présentés une excellente condition physique et pris du poids comme prévu tout au long de toute l&#39;expérience: au point de départ de l&#39;opération les animaux pesé 312 ± 20,39 g. Au point de temps sacrifice de 3 semaines post-opératoire des animaux pesait 325,2 ± 28,7 g, à 6 semaines 333 ± 39,9 g et à 12 semaines 362,22 ± 29 g. Aucune infection n&#39;a été observée au site d&#39;exploitation et aucune lésion développés. Les plaies opératoires complètement guéri à l&#39;heure prévue. Le contrôle neurologique n&#39;a montré aucun signe d&#39;infarctus cérébral ou d&#39;une déficience motrice. Ce dernier était un point important car les animaux ont été opérés dans l&#39;artère carotide et l&#39;un des deux veines jugulaires externes a été retiré et utilisé comme auto-transplantation. Pas de réactions allergiques à la thérapie soulagement de la douleur post-opératoire n&#39;a été observée. &gt; Tous les animaux ont été vigilants et sociale tout au long de toute l&#39;expérience. Leurs habitudes en matière de recevoir de la nourriture et de l&#39;eau est restée inchangée pendant tout le temps. Le taux de survie de toutes les expériences a été de 100% à l&#39;instant du sacrifice. Le taux de perméabilité du greffon était de 60% pour les 10 premiers animaux opérés et, par conséquent 82% pour les 11 autres animaux. La perméabilité du greffon totale était de 71%. Le flux sanguin dans les greffons veineux artérialisée a été mesurée à l&#39;instant du sacrifice et était de 8 ± 3 ml / min sans aucune différence statistiquement significative entre les trois points dans le temps des sacrifices. <img src="/files/ftp_upload/4124/4124fig1.jpg" alt="Figure 1" /> Figure 1. Anatomie du cou du rat. 1a) Situs avant résection du muscle sterno droit. 1b) Situs après section du muscle sterno droit. e_content &quot;fo: keep-together.within pages =&quot; always &quot;&gt; <img src="/files/ftp_upload/4124/4124fig2.jpg" alt="Figure 2" /> . Figure 2 images peropératoires microscopiques: une manchette) composé de boutons de manchette boutons de manchette corps et manche; b) le brassard enfilé sur l&#39;extrémité distale de l&#39;artère carotide commune; c) de serrage du ballonnet moignon distal artère carotide commune; d) éversion la souche artère carotide commune sur la manchette; e) assurer la souche éversée l&#39;artère carotide commune avec une ligature; f) situs après éversion de deux revers distale et proximale communs souches artère carotide, g) sillonnent la technique de rapprochement des deux menottées communs souches artère carotide, h) après interposition veineuse situs; i) situs après la reperfusion du greffon d&#39;interposition veineuse. <img src="/files/ftp_upload/4124/4124fig3.jpg" alt="Figure 3" /> Figure 3. Représentation schématique du situsaprès la reperfusion du greffon d&#39;interposition veineuse. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/4124/4124fig3large.jpg" target="_blank">Cliquez ici pour agrandir la figure</a> .

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Aucun conflit d&#39;intérêt déclaré.

L&#39;interposition d&#39;un greffon veineux jugulaire externe dans l&#39;artère carotide commune est une technique de microchirurgie sophistiqué. Cette vidéo aide le chirurgien novice maîtriser cette technique en un minimum de temps avec un moindre gaspillage des animaux de laboratoire. Anesthésie par inhalation est la meilleure option pour cette opération, car elle évite un stade d&#39;anesthésie trop profonde, peut être bien contrôlée et permet au chirurgien de temps suffisant pour foncti...

<table border="1"><tbody><tr><td> Nom du réactif </td><td> Entreprise </td><td> Numéro de catalogue </td><td> Commentaires </td></tr><tr><td> Soie noire tressée 7-0 </td><td> Produits Ethicon </td><td> 892100 </td><td></td></tr><tr><td> Vicryl 3-0 </td><td> Produits Ethicon </td><td> J285G </td><td></td></tr><tr><td> Vicryl 4-0 </td><td> Produits Ethicon </td><td> J284G </td><td></td></tr><tr><td> Portex non tubulure stérile nylon 0,75 mm, 0,94 mm de petit calibre en polyéthylène (polyéthylène) Tuyau </td><td> Portex Royaume-Uni </td><td> 800/200/175/100 </td><td></td></tr><tr><td> Isofluorane 5% </td><td></td><td></td><td> Toute genericon </td></tr><tr><td> L&#39;héparine </td><td></td><td></td><td> Toute genericon </td></tr><tr><td> Une solution saline à 0,9% </td><td></td><td&gt; </td><td> Toute genericon </td></tr><tr><td> La buprénorphine </td><td></td><td></td><td> Toute genericon </td></tr></tbody></table>

former une technique microchirurgicale sophistiquée: interposition de greffe veine jugulaire externe dans l&#39;artère carotide commune chez les rats

Training a Sophisticated Microsurgical Technique: Interposition of External Jugular Vein Graft in the Common Carotid Artery in Rats

Hyperplasie néo-intimale est l&#39;une des principales causes de sténose dans les veines artérialisée qui sont d&#39;une grande importance dans la chirurgie de pontage artériel coronaire, pontage artériel périphérique ainsi que dans les fistules artério-veineuses. 5.1 La procédure expérimentale de interposition veineuse dans l&#39;artère carotide commune en utilisant le brassard technique a été appliquée dans plusieurs projets de recherche afin d&#39;examiner l&#39;étiologie de l&#39;hyperplasie néo-intimale et les options thérapeutiques pour y remédier. 6-8 La manchette empêche navire anastomotique remodelage et induit des turbulences au sein de la greffe et donc le développement de l&#39;hyperplasie néo-intimale. Utilisation de la greffe de veine cave supérieure est une petite établi un modèle animal d&#39;expérimentation artérialisation veineuse 9-11. Ce protocole actuel se réfère à une technique établie veine jugulaire interposition première greffe décrite par Zou et al., 9 ainsi que d&#39;autres. 12-14 </sup&gt; Néanmoins, ces protocoles cités petits animaux sont compliquées. Pour simplifier la procédure et de réduire au minimum le nombre d&#39;animaux de laboratoire nécessaires, un protocole de fonctionnement détaillé de formation vidéo est présentée. Cette vidéo devrait aider le chirurgien novice d&#39;apprendre à la fois le brassard-technique et l&#39;interposition veineuse. Par la présente, le droit veine jugulaire externe a été greffé dans le brassard-technique dans l&#39;artère carotide commune de 21 rats femelles Sprague Dawley classés en trois groupes égaux qui ont été sacrifiés au jour 21, 42 et 84, respectivement. Notamment, aucun animal donateurs étaient nécessaires, car les auto-greffes ont été réalisées. Le taux de survie a été de 100% à l&#39;instant du sacrifice. En outre, le taux de perméabilité du greffon était de 60% pour les 10 premiers animaux opérés et 82% pour les 11 autres animaux. Le flux de sang au moment du sacrifice était de 8 ± 3 ml / min. En conclusion, ce protocole chirurgical simplifie considérablement, optimise et normalise cette complicated procédure. Il donne aux chirurgiens débutants facile, étape par étape, ce qui explique les écueils possibles, les aidant ainsi à acquérir une expertise rapide et d&#39;éviter le sacrifice inutile des animaux de laboratoire.

Hyperplasie néo-intimale est la principale cause de la sténose des veines artérialisée. Nous proposons un nouveau protocole selon lequel le droit veine jugulaire externe est greffé en utilisant la technique brassard sur l&#39;artère carotide commune des rats Sprague-Dawley. Le taux de survie a été de 100% à l&#39;instant du sacrifice.

Former une technique microchirurgicale sophistiquée: Interposition de greffe veine jugulaire externe dans l&#39;artère carotide commune chez les rats

L'hyperplasie néointimale est l'une des causes principales de sténose dans les veines artérialisées, lesquelles revêtent une grande importance dans la chirurgie du pontage aortocoronarien, dans...

L'hypertrophie néointimale est l'une des principales causes de sténose des veines artérialisées utilisées dans la chirurgie de pontage coronaire artériel, dans la chirurgie de pontage artériel périphérique, ainsi que dans les greffons veineux des fistules artério-veineuses. L'interposition dans l'artère carotide commune a été réalisée dans plusieurs projets de recherche afin d'étudier l'étiologie de l'hypertrophie néointimale et les options thérapeutiques actuelles pour y remédier. Toutefois, les techniques microchirurgicales conventionnelles utilisant des modèles animaux de petite taille sont complexes, frustrantes et nécessitent un sacrifice excessif d'animaux expérimentaux pour simplifier l'ensemble du protocole.Ce vidéo illustre un protocole opératoire détaillé, qui aidera le chirurgien débutant à apprendre la technique de coupe et la greffe veineuse. Interposition dans l'artère carotide commune : 21 rats femelles Sprague-Dawley provenant d'un éleveur commercial ont été répartis en trois groupes égaux, opérés et sacrifiés respectivement au jour 21, au jour 42 et au jour 84. L'anesthésie générale des animaux a été induite à l'aide d'une boîte en plexiglas reliée à un appareil d'

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Microchirurgie veineuse Pouch artériel Bifurcation anévrismes dans le modèle du lapin: Aspects techniques

Dans cette vidéo, nous montrons une procédure de prélèvement chirurgical d’un segment de la veine jugulaire à partir d’un modèle de lapin. Le segment réséqué peut être utilisé comme greffe veineuse autologue pour étudier l’hyperplasie intimale qui se développe en raison de la pression artérielle.

Prélèvement d’une greffe de veine jugulaire à partir d’un modèle de lapin : une intervention chirurgicale pour exciser un segment de veine jugulaire de lapin pour des études ex vivo

Cette vidéo démontre l’interposition de l’artère carotide du lapin avec la veine jugulaire pour induire une hyperplasie intimale veineuse en soumettant les veines à une pression artérielle. Ce modèle aidera à étudier les interventions moléculaires et génétiques visant à atténuer la progression de l’hyperplasie intimale après des chirurgies de revascularisation.

Interposition de l’artère carotide et de la veine jugulaire : une technique pour induire l’hyperplasie intimale veineuse dans un modèle de lapin

Dans cette vidéo, nous montrons une procédure chirurgicale pour canuler l’artère carotide gauche dans un modèle de rat.

Canulation de l’artère carotide chez un modèle de rat

Les accès vasculaires permettant de mesurer l’hémodynamique, de fournir des fluides et d’effectuer des prélèvements sanguins sont importants pour toute étude de petit modèle animal. Nous présentons une technique d’implantation de cathéters dans l’artère carotide et la veine jugulaire commune chez un rat anesthésié pour se connecter à un système de surveillance, de perfusions et d’échantillonnage.

Cathétérisme de l&#39;artère carotide et Veine jugulaire faire pour effectuer des mesures hémodynamiques, Infusions et prélèvement sanguin dans un modèle de rat Conscients

Le modèle de lésion carotidienne par ballonnet de rat décrit ci-dessous permet aux chercheurs d’évaluer des médicaments ou des traitements qui annulent l’hyperplasie artérielle induite par une lésion. La préparation préopératoire détaillée, l’intervention chirurgicale et les soins postopératoires de l’animal sont décrits.

A Rat carotidienne Balloon Modèle de lésion pour tester Therapeutics Rénovation Anti-vasculaires

Cette méthode décrit le placement des greffes de veine d’interposition chez le lapin, la transduction des greffons et la réalisation d’expression du transgène durables. Cela permet à l’enquête des rôles physiologiques et pathologiques des transgènes et leurs produits protéiques dans les veines greffées et essais de thérapies géniques pour veine du greffon.

Un modèle de lapin d’Expression du transgène durables dans la veine jugulaire à des greffes d’Interposition artère carotide commune

Le protocole actuel vise à créer expérimentalement l’hyperplasie intimale veineuse en soumettant les veines à la tension artérielle pour développer des stratégies pour atténuer l’hyperplasie intimale veineuse après la chirurgie de revascularisation utilisant des greffes de veine.

Un modèle d’interposition veineuse de lapin imitant la chirurgie de revascularisation utilisant des greffes de veine pour évaluer l’hyperplasie intimale sous la tension artérielle

Des techniques microchirurgicales détaillées sont démontrées pour établir un modèle de canulation de la veine jugulaire à plus long terme pour la collecte séquentielle de sang chez le même animal. Les paramètres physiologiques et hématologiques ont été surveillés pendant la phase de récupération du rat. Ce modèle a été appliqué pour étudier la pharmacocinétique du polyphénol administré par voie orale sans induire de stress animal.

Compétences microchirurgicales pour établir une canulation veineuse jugulaire permanente chez le rat pour le prélèvement sanguin en série d’un médicament administré par voie orale

Nous présentons un modèle murin reproductible d’allotransplantation composite vascularisée hétérotope du membre postérieur au cou. Ce protocole supermicrochirurgical, impliquant des anastomoses de vaisseaux de 0,3 à 0,5 mm, intègre un guidage de filament de nylon et un menottage veineux. Il offre une plateforme fiable pour des études translationnelles sur la tolérance, la lésion ischémie-reperfusion et les mécanismes immunologiques dans l’allotransplantation vascularisée composite.

Transplantation hétérotopique du membre postérieur au cou chez la souris : un modèle supermicrochirurgical d’allotransplantation composite vascularisée

Ce protocole expérimental décrit un modèle hépatique de rat canulé par canal lymphatique qui permet une évaluation directe et quantitative du drainage lymphatique et vasculaire hépatique. Le modèle permet un prélèvement simultané du sang lymphatique hépatique et du sang systémique pour étudier le transport hépatique, le métabolisme et la signalisation immunitaire, soutenant les études en pharmacocinétique des médicaments et en biologie spécifique au foie.

Un modèle complet de rats pour évaluer les voies de transport hépatique par prélèvement simultané des vasculaires lymphatiques et sanguins

Apprenez la technique de microchirurgie par manchon pour greffer la veine jugulaire externe dans l'artère carotide commune chez le rat Sprague Dawley. Cette méthode simplifiée améliore la survie des greffons et forme les chirurgiens débutants.

Former une technique microchirurgicale sophistiquée: Interposition de greffe veine jugulaire externe dans lartère carotide commune chez les rats (Vidéo) | JoVE Journal

Former une technique microchirurgicale sophistiquée: Interposition de greffe veine jugulaire externe dans l'artère carotide commune chez les rats

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