Name: Tridimensionnelle modèle de culture cellulaire pour mesurer les effets de lécoulement des fluides interstitiels sur linvasion tumorale (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-07-25T12:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 41 s
Description: Découvrez un modèle tridimensionnel de culture cellulaire pour mesurer l'impact de l'écoulement des fluides interstitiels sur l'invasion tumorale. Cette méthode utilise du collagène et du matrigel.

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1. Essai Set-up <ol><li> Décongeler une aliquote de petite taille (&lt;500 pi) de Matrigel sur la glace à 4 ° C (environ 2 h). </li><li> Préparez la recette du gel (voir les volumes, par exemple dans le tableau ci-dessous): 10x PBS (1x dans le volume total), l&#39;hydroxyde de sodium 1N (équivalent à 0,023 volumes de collagène ajoutée, ou par les recommandations du fabricant du collagène, le cas échéant), le Matrigel et du collagène de type I à des concentrations finales de 1 mg / ml et 1,3 mg / ml, respectivement (formulations de la matrice d&#39;autres peuvent être utilisés en fonction du type de cellule et de l&#39;expérience). </li></ol> Recette gel Exemple <table border="1"><tbody><tr><td> Composants </td><td> Concentration d&#39;images </td><td> Concentration finale </td><td> Ajouter le volume </td></tr><tr><td> PBS 10X </td><td> 10X </td><td> 1X </td><td> 0,090 ml </td></tr><tr><td> L&#39;eau stérile </td><td></td><td></td><td> 0,346 ml </td></tr><tr><td> NaOH 1N </td><td></td><td></td><td> 0,008 ml </td></tr><tr><td> Matrigel </td><td> 9,90 mg / ml </td><td> 1 mg / ml </td><td> 0,101 ml </td></tr><tr><td> La queue de type I de rat collagène </td><td> 3,66 mg / ml </td><td> 1,3 mg / ml </td><td> 0,355 ml </td></tr></tbody></table><ol start="3"><li> Mélanger les composants du gel sur la glace dans la même séquence que ci-dessus et incuber la solution finale pendant 1 h à 4 ° C. Dans notre expérience, une incubation de 1 h avant l&#39;ensemencement des résultats de cellules dans une gélification plus uniforme du collagène. Assurez-vous de garder Matrigel et du collagène sur la glace en tout temps et à travailler aussi vite que possible pour empêcher la gélification. </li><li> Placer les 12 mm de diamètre 8 um pores inserts de culture cellulaire dans une plaque de 12 puits en utilisant des pinces stérilisées. </li><li> Compter les cellules et remettre en suspension dans un milieu sans sérum à 5 x 10 6 cellules / ml (devraient être volume total de 10% de la solution de gel). </li><li> Ajouter 100 ul de cellules suspension à 900 pi de solution de gel (concentration cellulaire finale de 5 x 10 5 cellules / ml) et bien mélanger par pipetage doucement de haut en bas. </li><li> Ajouter 150 ul du mélange final à chaque insertion et le transfert à un 37 ° C, 5% de CO 2 incubateur pendant 30 minutes jusqu&#39;à ce que gel polymérise. </li><li> Utilisation de milieux sans sérum, </li></ol><ul><li> Ajouter 100 pi au-dessus du gel et 1200 pi sous l&#39;insert pour l&#39;état statique. Les niveaux de liquide à l&#39;intérieur de l&#39;insert et à l&#39;extérieur dans le puits doit être approximativement égale, résultant en la différence de pression minimale dans le gel et aucun flux interstitiel. </li><li> Ajouter 100 pi sous l&#39;insert et 650 pi au-dessus de gel pour la condition de flux. Soyez prudent pour éviter les bulles d&#39;air sous l&#39;insert, car ils empêchent les cellules de migrer à travers la membrane à ces endroits. La différence de pression générée par ces volumes est d&#39;environ 1,3 cm H 2 O (ou 1 mm Hg). </li></ul><ol start="9"><li> Placer la plaque dans un 37° C, 5% de CO 2 incubateur pendant 24 heures. </li></ol> 2. Cellule de coloration et de comptage <ol><li> Ajouter 500 ul de PBS 1X par puits dans de nouvelles de 24 puits de plaque, ce qui sera utilisée pour laver les inserts. </li><li> Retirer le milieu restant dans la partie supérieure des transwells écoulement et déterminer le volume. Calculer le volume total éluée en soustrayant le volume restant du volume total initialement ajouté, 650 pi (il sera utilisé pour les calculs de débit, voir ci-dessous). Utilisez des cotons-tiges pour enlever le gel des inserts et d&#39;essuyer la surface supérieure de la membrane pour éliminer les cellules non-envahis. Placez les inserts dans la plaque de 24 puits contenant du PBS 1X pendant 15 s pour laver inserts. </li><li> Retirez du PBS et ajouter 500 ul de paraformaldéhyde à 4% (PFA) en dessous de chaque insert et incuber pendant 30 minutes à température ambiante pour fixer les cellules transmigré. </li><li> Retirez la PFA et rincer une fois avec 500 pl 1X PBS pour éliminer fixateur résiduel. </li><li> Ajouter 500 ul of 0,5% Triton X-100 solution sous les inserts et les incuber pendant 10 minutes à température ambiante pour perméabiliser les cellules. </li><li> Couper les membranes de l&#39;insert à l&#39;aide d&#39;une lame de rasoir et le placer dans 100 pi de 2 ug / ml dans du PBS 1X DAPI solution, en prenant soin de placer la partie inférieure du visage membrane vers le bas (cellules transmigré face vers le bas). </li><li> Entourer la plaque dans de l&#39;aluminium et le placer sur un agitateur à 150 tours par minute pendant 30 minutes à température ambiante. </li><li> Laver les membranes dans 500 ul de PBS 1X sur agitateur (répéter 3 fois pendant 10 minutes chaque) pour enlever DAPI libre. </li><li> Membranes placer sur des lames de verre avec des cellules transmigré vers le haut, ajouter la solution de montage et de lamelle. </li></ol> 3. Analyse des données <ol><li> Comptez DAPI-noyaux colorés sur 5 sites choisis au hasard de chaque membrane (rester à l&#39;écart des bords et utilisez un 10X ou 20X objectif). </li><li> Calculer la moyenne et le nombre de cellules obtenir l&#39;invasion pour cent en utilisant la formule suivante: Invasions = x pour cent à 100% (moyenne numération cellulaire x surface membranaire) / (surface de l&#39;image de microscope nombre x de cellules ensemencées) L&#39;invasion pour cent peut être normalisée à une condition de contrôle (généralement à l&#39;état statique) pour permettre la comparaison entre les expériences indépendantes. </li><li> Calculer le débit moyen: diviser le volume total éluée dans la condition d&#39;écoulement par le temps d&#39;incubation (par exemple, 24 h). </li><li> Calculer la vitesse d&#39;écoulement moyenne: diviser le débit moyen par l&#39;aire de section transversale du gel / membrane (dans ce cas à 60 mm 2). </li></ol> 4. Les résultats représentatifs Pour mesurer l&#39;invasion des cellules tumorales sous flux interstitiel, nous avons effectué notre test 3-D invasion de flux en utilisant MDA-MB-435S cellules de mélanome métastatique. Ces cellules ont déjà été montré à envahir en réponse à l&#39;écoulement du fluide interstitiel 13-14. Les cellules ont été noyées dans une matrice composée de 1,3 mg / ml de rat taiType de l collagène de tendon I et 1 mg / ml de Matrigel matrice de la membrane sous-sol à une concentration cellulaire finale de 5 x 10 5 cellules / ml. Deux conditions différentes ont été comparées: (1) débit moyen interstitielle = 0,1 um s -1 et (2) condition statique = pas de débit mesurable (figure 1). Après 24 h, les cellules qui ont envahi à travers les pores de la membrane ont été colorées avec du DAPI pour faciliter le comptage des cellules. La figure 2 montre une image représentative des cellules envahies. Sous fond clair, que les pores de la membrane sont visibles. Utilisation de la fluorescence, les noyaux au DAPI teinté ont été utilisés pour le comptage des cellules et les phalloïdine colorés F-actine structures ont été utilisés pour visualiser le corps de la cellule (en option). L&#39;utilisation d&#39;un de test t de Student en supposant des variances égales, nous avons montré que l&#39;écoulement interstitiel augmente significativement l&#39;invasion des cellules MDA-MB-435S de 2,3 fois par rapport à des conditions statiques (p = 0,003) (figure 3). Cette corroboraTes résultats similaires (mais avec des conditions différentes de la matrice et par conséquent la vitesse d&#39;écoulement) en utilisant cette ligne 13-14 cellule. <img alt="Figure 1" src="/files/ftp_upload/4159/4159fig1.jpg" /> Figure 1. Schéma de la 3-D dosage de liquide interstitiel invasion de flux. D&#39;abord préparer la solution de gel en utilisant des concentrations appropriées et des volumes. Puis ajouter des cellules à la solution de gel et transfert à inserts de culture cellulaire. Enfin, ajoutez un volume approprié des médias pour chaque condition et incuber. L&#39;écoulement de fluide interstitiel est entraîné par une tête de pression de fluide. <img alt="Figure 2" src="/files/ftp_upload/4159/4159fig2.jpg" /> Figure 2. Transmigré MDA-MB-435S cellules sur la membrane. Cellules envahies ont été fixés après notre test de fluide interstitiel invasion débit et colorées avec du DAPI et Alexa Fluor 488-conjugué phalloïdine pour faciliter le comptage des cellules envahies; une image) de la membrane sous champ lumineux; B) DAPI stanoyaux Ined (en bleu); C) Alexa Fluor 488-phalloïdine teinté F-actine (en vert). La barre d&#39;échelle représente 50 um. <img alt="Figure 3" src="/files/ftp_upload/4159/4159fig3.jpg" /> Figure 3. Augmentation invasion de cellules MDA-MB-435S cellules sous écoulement. L&#39;invasion cellulaire après 24 h significativement renforcée par écoulement interstitiel (p = 0,003). Les résultats sont normalisés à l&#39;état statique moyenne et les valeurs représentent la moyenne ± SEM de 6 inserts de culture cellulaire.

<ol><li>Cichon, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microenvironmental+influences+that+drive+progression+from+benign+breast+disease+to+invasive+breast+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Mammary+Gland.+Biol.+Neoplasia%22%5BJournal%5D)">Microenvironmental influences that drive progression from benign breast disease to invasive breast cancer.</a> J. Mammary Gland. Biol. Neoplasia. 15, 389-3897 (2010).</li>
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<li>Ng, C. P., Hinz, B., Swartz, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interstitial+fluid+flow+induces+myofibroblast+differentiation+and+collagen+alignment+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Cell.+Sci%22%5BJournal%5D)">Interstitial fluid flow induces myofibroblast differentiation and collagen alignment in vitro.</a> J. Cell. Sci. 118, 4731-4739 (2005).</li>
<li>Kunder, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mast+cell-derived+particles+deliver+peripheral+signals+to+remote+lymph+nodes%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Exp.+Med%22%5BJournal%5D)">Mast cell-derived particles deliver peripheral signals to remote lymph nodes.</a> J. Exp. Med. 206, 2455-2467 (2009).</li>
<li>Helm, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synergy+between+interstitial+flow+and+VEGF+directs+capillary+morphogenesis+in+vitro+through+a+gradient+amplification+mechanism%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+U.S.A%22%5BJournal%5D)">Synergy between interstitial flow and VEGF directs capillary morphogenesis in vitro through a gradient amplification mechanism.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 102, 15779-15784 (2005).</li>
<li>McGuire, P. G., Seeds, N. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+interaction+of+plasminogen+activator+with+a+reconstituted+basement+membrane+matrix+and+extracellular+macromolecules+produced+by+cultured+epithelial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Biochem%22%5BJournal%5D)">The interaction of plasminogen activator with a reconstituted basement membrane matrix and extracellular macromolecules produced by cultured epithelial cells.</a> J Cell Biochem. 40, 215-227 (1989).</li>
<li>Kleinman, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+and+characterization+of+type+IV+procollagen%2C+laminin%2C+and+heparan+sulfate+proteoglycan+from+the+EHS+sarcoma%5BTitle%5D)+AND+%22Biochemistry%22%5BJournal%5D)">Isolation and characterization of type IV procollagen, laminin, and heparan sulfate proteoglycan from the EHS sarcoma.</a> Biochemistry. 21, 6188-6193 (1982).</li>
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</ol>

Pas de conflits d&#39;intérêt déclarés.

Ici, nous avons décrit une méthodologie pour quantifier l&#39;effet de l&#39;écoulement interstitiel sur l&#39;invasion des cellules tumorales, en utilisant des cellules noyées dans une matrice 3-D au sein d&#39;un insert de culture cellulaire. Méthodes et d&#39;autres semblables ont été utilisés pour étudier l&#39;effet de l&#39;écoulement interstitiel sur une variété de types de cellules 13-15, 17. Notre approche reproduit partiellement le microenvironnement de la tumeur matrice en utilisant collagène de ty...

<table border="1"><tbody><tr><td> Nom du réactif </td><td> Entreprise </td><td> Numéro de catalogue </td><td> Commentaires </td></tr><tr><td> Collagène (queue de rat) </td><td> BD </td><td> 354236 </td><td> Gardez stérile </td></tr><tr><td> Insert Millicell culture cellulaire </td><td> Millipore </td><td> PI8P01250 </td><td> 8 diamètre de pore um, membrane de polycarbonate </td></tr><tr><td> Matrigel </td><td> BD </td><td> 354234 </td><td> Gardez stérile </td></tr><tr><td> PBS </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> 100M-8202 </td><td> 10x pour préparer la solution de gel, 1x pour les étapes de lavage </td></tr><tr><td> Hydroxyde de sodium, solution 1.0N </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> S2770 </td><td> Gardez stérile </td></tr><tr><td> DMEM 1X </td><td> Cellgro </td><td> 10-013-CV </td><td> Gardez stérile </td></tr><tr><td> Sérum fœtal bovin </td><td> Atlanta Biologicals </td><td> 511150 </td><td> Gardez stérile </td></tr><tr><td> Streptomycine Pénicilline </td><td> Cellgro </td><td> 30002CI </td><td> Gardez stérile </td></tr><tr><td> Triton X-100 </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> X100-500 ml </td><td> 0,5% dans du PBS </td></tr><tr><td> Paraformaldéhyde </td><td> Fisher Scientific </td><td> 04042-500 </td><td> 4% dans du PBS </td></tr><tr><td> Eau déminéralisée </td><td></td><td></td><td> Gardez stérile </td></tr><tr><td> 4 &#39;,6-diaminido-2-phénylindole (DAPI) </td><td> MP Biomedicals </td><td> 0215757401 </td><td> 1 mg / ml de solution mère </td></tr><tr><td> Solution de montage </td><td> Thermo Scientific </td><td> TA-030-FM </td><td></td></tr><tr><td> Trypsine-EDTA </td><td> Cellgro </td><td> 25-052-CI </td><td> Gardez stérile </td></tr></tbody> &lt;/ Table&gt;

tridimensionnelle modèle de culture cellulaire pour mesurer les effets de l&#39;écoulement des fluides interstitiels sur l&#39;invasion tumorale

Three-dimensional Cell Culture Model for Measuring the Effects of Interstitial Fluid Flow on Tumor Cell Invasion

La croissance et la progression de la plupart des tumeurs solides dépendra de la transformation initiale des cellules cancéreuses et leur réponse aux stroma associé à la signalisation dans le microenvironnement de la tumeur 1. Auparavant, la recherche sur le microenvironnement de la tumeur s&#39;est principalement concentrée sur la tumeur du stroma interactions 1-2. Toutefois, le microenvironnement tumoral comprend également une variété de forces, dont les effets biophysiques encore mal compris. Ces forces sont les conséquences biomécaniques de croissance de la tumeur qui entraînent des changements dans l&#39;expression des gènes, la division cellulaire, la différenciation et l&#39;invasion 3. La densité de la matrice 4, la raideur 5-6, et la structure 6-7, la pression du fluide interstitiel 8, et l&#39;écoulement du fluide interstitiel 8 sont tous modifiés lors de la progression du cancer. L&#39;écoulement du fluide interstitiel en particulier est plus élevé dans les tumeurs par rapport à la normale 8-10 tissus. Le fl fluide interstitiel estiméevitesses oe ont été mesurés et jugés dans la gamme de 0,1-3 um s -1, en ​​fonction de la taille tumorale et la différenciation 9, 11. Cela est dû à la pression du fluide interstitiel élevée causée par une tumeur induite par l&#39;angiogenèse et la perméabilité vasculaire accrue 12. L&#39;écoulement du fluide interstitiel a été montré pour augmenter l&#39;invasion des cellules cancéreuses 13-14, les fibroblastes et les cellules musculaires vasculaires lisses 15. Cette invasion peut être due à des gradients chimiotactiques autologues créés autour des cellules en 3-D 16 ou augmenté métalloprotéinases matricielles (MMP) l&#39;expression 15, la sécrétion de chimiokines et de l&#39;expression des molécules d&#39;adhésion cellulaire 17. Cependant, le mécanisme par lequel les cellules détectent l&#39;écoulement du fluide n&#39;est pas bien comprise. En plus de modifier le comportement des cellules tumorales, l&#39;écoulement du fluide interstitiel module l&#39;activité d&#39;autres cellules dans le microenvironnement tumoral. Il est associé à la différenciation de conduite (a) des fibroblastes en promotion de tumeurs myofibroblasts 18, (b) le transport des antigènes solubles et d&#39;autres facteurs de ganglions lymphatiques 19, et (c) moduler la morphogenèse des cellules endothéliales lymphatique 20. La technique présentée ici impose l&#39;écoulement du fluide interstitiel sur des cellules in vitro et quantifie les effets sur l&#39;invasion (figure 1). Cette méthode a été publié dans de nombreuses études pour mesurer les effets de l&#39;écoulement du fluide sur stroma et l&#39;invasion des cellules cancéreuses 13-15, 17. En changeant la composition de la matrice, le type de cellule, et la concentration cellulaire, cette méthode peut être appliquée à d&#39;autres maladies et des systèmes physiologiques d&#39;étudier les effets de l&#39;écoulement interstitiel sur les processus cellulaires tels que l&#39;invasion, la différenciation, la prolifération et l&#39;expression des gènes.

L&#39;écoulement du fluide interstitiel est élevée dans les tumeurs solides et peut moduler l&#39;invasion des cellules tumorales. Nous décrivons ici une technique d&#39;appliquer l&#39;écoulement du fluide interstitiel aux cellules noyées dans une matrice, puis de mesurer ses effets sur l&#39;invasion des cellules. Cette technique peut être facilement adapté pour étudier d&#39;autres systèmes.

Tridimensionnelle modèle de culture cellulaire pour mesurer les effets de l&#39;écoulement des fluides interstitiels sur l&#39;invasion tumorale

La croissance et la progression de la plupart des tumeurs solides dépendent de la transformation initiale des cellules cancéreuses et de leur réponse à la signalisation associée au stroma...

L'objectif de cette procédure est d'exposer des cellules cultivées en 3D à un écoulement de fluide interstitiel et de quantifier les effets induits par l'écoulement sur l'invasion cellulaire. Cela est réalisé en préparant tout d'abord une solution de gel composée de collagène de type I et de matrigel. La deuxième étape consiste à ajouter une concentration définie de cellules à la solution de gel.Ensuite, la suspension cellulaire est ajoutée à un transwell de 12 millimètres de diamètre et de 8 micromètres de taille de pore, puis incubée à 37 degrés Celsius jusqu'à ce que la matrice prenne. La dernière étape de la mise en place du test consiste à ajouter des volumes précis de milieu dans les transwells afin de créer des conditions statiques et sous flux. Vingt-quatre heures plus tard, les membranes des transwells sont fixées, colorées et observées afin de quantifier le nombre de cellules ayant envahi.Le principal avantage de cette technique par rapport aux méthodes existantes, telles que les chambres à flux interstitiel microfluidiques, est qu'elle ne nécessite ni pompes ni équipement spécialisé, et permet aux chercheurs de tester facilement et rapidement plusieurs conditions ou trai

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Modèles de l'invasion des cellules tumorales en trois dimensions de la matrice extracellulaire de mieux refléter...

Modélisation et Imagerie en 3 dimensions l&#39;invasion des cellules collectives

Cette vidéo présente une méthode permettant d’établir une co-culture tridimensionnelle de sphéroïdes tumoraux et de lymphocytes T. Un moulage à l’agarose avec des micropuits contenant des sphéroïdes tumoraux est préparé, suivi de l’ajout de lymphocytes T. Après l’incubation, cette configuration permet d’étudier l’interaction des lymphocytes T avec les sphéroïdes tumoraux dans un environnement tridimensionnel contrôlé.

Un modèle de co-culture tridimensionnelle de lymphocytes T infiltrants dans des sphéroïdes tumoraux

Cet article fournit des méthodologies détaillées pour l'utilisation de trois dimensions (3D) des essais pour quantifier l'invasion des cellules du cancer du sein. Plus précisément, nous discutons les procédures nécessaires pour mettre en place de tels essais, la quantification et l'analyse des données, ainsi que des méthodes pour examiner la perte de l'intégrité de la membrane qui se produit lorsque les cellules envahissent.

Quantification du cancer du sein cellulaire envahissement aide d&#39;un (3D) du modèle en trois dimensions

Ici, nous présentons un protocole de co-culture en trois dimensions, qui est utile pour étudier les interactions multicellulaires et la modulation dépendante de la matrice extracellulaire du comportement des cellules cancéreuses. Dans ce modèle expérimental, les cellules cancéreuses sont cultivées sur des gels de collagène intégrés à des fibroblastes humains associés au cancer.

En trois dimensions modèle de co-culture tumeur stromale-Interaction

L’invasion des tissus normaux environnants est une caractéristique déterminante des tumeurs malignes. Nous fournissons ici un test simple et semi-automatisé sur microplaque d’invasion dans une biomatrice 3D naturelle qui a été illustré par un certain nombre de modèles de cancers humains avancés.

Tridimensionnelle (3D) Tumor Spheroid Invasion Assay

Cette méthode évalue l’invasion des cellules cancéreuses des sphéroïdes dans une matrice 3D environnante.  Les sphéroïdes sont générés par la méthode de culture de gouttes suspendues, puis intégrés dans une matrice composée de matériaux de membrane basale et de collagène de type I.  L’invasion des sphéroïdes est ensuite surveillée.

Une cellule cancéreuse Spheroid test pour évaluer Invasion dans un Cadre 3D

Les cellules cancéreuses sont intégrées dans un gel de collagène, puis prises en sandwich dans un gel de fibrine acellulaire pour générer un système de culture 3D dans lequel le caractère invasif et la formation de tumeurs satellites peuvent être surveillés.

Three-Dimensional Culture Assay pour explorer des cellules cancéreuses invasives et Tumor Satellite Formation

Les processus d’invasion du cancer de la vessie représentent des occasions de biomarqueurs et de développement thérapeutique. Ici, nous présentons un modèle d’invasion de cancer de la vessie qui intègre la culture 3D des sphéroïdes de tumeur, Time-lapse imagerie et microscopie confocale. Cette technique est utile pour définir les caractéristiques du processus invasif et pour le dépistage des agents thérapeutiques.

Système de Culture cellulaire 3D pour étudier l’Invasion et l’évaluation thérapeutique dans le Cancer de la vessie

L'objectif de ce protocole est d'établir un modèle in vitro 3D pour étudier la différenciation des fibroblastes associés au cancer (CAF) dans un environnement en vrac tumoral, qui peut être abordé dans différents systèmes d'analyse, tels que l'immunofluorescence, la transcription l'analyse et l'imagerie des cellules de vie.

Un modèle sphéroïde 3D comme un système plus physiologique pour les fibroblastes associés au cancer différenciation et l'invasion des études in vitro

L’approche présentée évalue simultanément l’invasion de cellules cancéreuses dans les essais sphéroïdes 3D et la cytotoxicité de cellule T. Les sphéroïdes sont générés dans un jet de multi-microwell sans échafaudage. La co-culture et l’intégration dans la matrice de collagène de type I sont effectuées dans le même dispositif qui permet de surveiller l’invasion des cellules cancéreuses et la cytotoxicité médiée par cellules T.

Surveillance de l’invasion des cellules cancéreuses et de la cytotoxicité des lymphocytes T dans la culture 3D

L’invasion est un phénomène biologique majeur dans le développement et la progression du cancer. Ce processus est influencé par les cellules non néoplasiques et les composants du microenvironnement tumoral. Le but de cette étude est de décrire une méthode alternative pour analyser l’invasion des cellules tumorales in vitro à l’aide de cultures tridimensionnelles (3D).

Stratégie alternative pour analyser l’invasion cellulaire in vitro de cultures 3D

Découvrez un modèle tridimensionnel de culture cellulaire pour mesurer l'impact de l'écoulement des fluides interstitiels sur l'invasion tumorale. Cette méthode utilise du collagène et du matrigel.

Tridimensionnelle modèle de culture cellulaire pour mesurer les effets de lécoulement des fluides interstitiels sur linvasion tumorale (Vidéo) | JoVE Journal

Tridimensionnelle modèle de culture cellulaire pour mesurer les effets de l'écoulement des fluides interstitiels sur l'invasion tumorale

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