Name: Cette Janvier au JoVE (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-01-02T00:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 9 s
Description: Découvrez les avancées en neurosciences et biologie de ce numéro de JoVE. Explorez des méthodes visuelles innovantes pour améliorer la reproductibilité des expériences et partager les découvertes scientifiques.

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<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3122">Sélection des parasites de Plasmodium falciparum pour la cytoadhésion aux cellules endothéliales du cerveau humain</a></h2>
Antoine Claessens, J. Alexandra Rowe Centre for Immunity, Infection and Evolution, Université d’Édimbourg
Un modèle in vitro de séquestration du paludisme cérébral est décrit1. Les globules rouges infectés par Plasmodium falciparum sont sélectionnés pour se lier aux cellules endothéliales microvasculaires du cerveau humain immortalisées. Les parasites sélectionnés présentent un phénotype distinct. Le processus de sélection peut être appliqué à l’aide de diverses souches de P. falciparum et de lignées cellulaires endothéliales.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3308">Implantation d’un brassard carotidien pour déclencher l’athérosclérose induite par le stress de cisaillement chez la souris</a></h2>
Michael T. Kuhlmann1, Simon Cuhlmann2, 3, Irmgard Hoppe1, Rob Krams3, Paul C. Evans2, Gustav J. Strijkers4, Klaas Nicolay4, Sven Hermann1, Michael Schäfers1 1 1Institut européen d’imagerie moléculaire, Westfälische Wilhelms-University Münster, 2British Heart Foundation Cardiovascular Sciences Unit, Imperial College London , 3Département de bio-ingénierie, Imperial College London , 4Génie biomédical, Université de technologie d’Eindhoven
Le brassard constricteur présenté dans cet article est conçu pour induire l’athérosclérose dans l’artère carotide commune murine. En raison de la forme conique de sa lumière interne, le brassard implanté génère des régions bien définies de stress de cisaillement faible, élevé et oscillatoire, déclenchant le développement de lésions athéroscléreuses de différents phénotypes inflammatoires.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3330">Analyse de la migration des cellules de la crête neurale du tronc à l’aide d’un test en chambre de Zigmond modifié</a></h2>
Christopher C. Walheim1, Juan Pablo Zanin2, Maria Elena de Bellard1 1Département de biologie, California State University, Northridge, 2Centro de Biología Celular y Molecular, Universidad Nacional de Córdoba
Une approche pour analyser la migration des cellules explantées (cellules de la crête neurale du tronc) est décrite. Cette méthode est peu coûteuse, douce et capable de distinguer la chimiotaxie à la fois de la chimiokinésie et d’autres influences sur la polarité migratoire telles que celles dérivées des interactions cellule-cellule dans la culture cellulaire de la crête neurale du tronc primaire.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3350">Cultures de tranches organotypiques du mésencéphale ventral embryonnaire : un système pour étudier le développement neuronal dopaminergique in vitro</a></h2>
Gabriela Oana Bodea, Institut Sandra Blaess de neurobiologie reconstructive, Université de Bonn
Une méthode pour générer des coupes organotypiques à partir du mésencéphale embryonnaire murin E12.5 est décrite. Les cultures de coupes organotypiques peuvent être utilisées pour observer le comportement des neurones dopaminergiques ou d’autres neurones du mésencéphale ventral.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3362">Visualisation des structures cuticulaires de Caenorhabditis elegans à l’aide du colorant vital lipophile, DiI</a></h2>
Robbie D. Schultz1, 2, Tina L. Gumienny2 1Département de médecine moléculaire et cellulaire, Texas A&M University System Health Science Center, 2Département de médecine moléculaire et cellulaire, Texas A&M University System Health Science Center, Collège de médecine
Nous présentons une méthode pour visualiser la cuticule chez C. elegans vivant en utilisant le colorant lipophile fluorescent rouge DiI (perchlorate de 1,1'-dioctadécyl-3,3,3',3'-tétraméthylindocarbocyanine), qui est couramment utilisé chez C. elegans pour visualiser les neurones exposés à l’environnement. Avec ce protocole optimisé, les structures cuticulaires alae et annulaires sont colorées par DiI et observées à l’aide de la microscopie composée.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3406">Un protocole pour la détection et le piégeage des radicaux libres en phase gazeuse dans la fumée de cigarette principale</a></h2>
<font color='black'>Long-Xi Yu1, Boris G. Dzikovski2, Jack H. Libéré3, 2 1Laboratoire CDCF-AOX, 2Centre biomédical national pour la technologie ESR avancée (ACERT), Département de chimie et de biologie chimique, Université Cornell, 3Recherche ACERT, Centre Département de chimie et de biologie chimique, Laboratoire Baker, Université Cornell
La spectroscopie ESR à piégeage de spin a été utilisée pour étudier l’effet des antioxydants végétaux lycopène, pycnogénol et extrait de pépins de raisin sur le piégeage des radicaux libres en phase gazeuse dans la fumée de cigarette.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3417">Comment mesurer le repliement cortical à partir d’images IRM : un tutoriel étape par étape pour calculer l’indice de gyrification local</a></h2>
Marie Schaer1, Meritxell Bach Cuadra2, 3, Nick Schmansky4, Bruce Fischl4, Jean-Philippe Thiran2, Stephan Eliez1 1Département de psychiatrie, Ecole de l’Université de Genève de médecine, 2Laboratoire de traitement du signal, École Polytechnique Fédérale de Lausanne, 3Département de radiologie, Centre hospitalier universitaire et Université de Lausanne, 4Centre Athinoula A. Martinos d’imagerie biomédicale, Massachusetts General Hospital
La mesure de la gyrification (pliage cortical) à tout âge représente une fenêtre sur le développement précoce du cerveau. Par conséquent, nous avons précédemment développé un algorithme pour mesurer la gyrification locale à des milliers de points sur l’hémisphère1. Dans cet article, nous détaillons le calcul de cet indice de gyrification local.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3551">L’utilisation de l’imagerie infrarouge thermique pour détecter les douleurs musculaires d’apparition retardée</a></h2>
Hani H. Al-Nakhli1, Jerrold S. Petrofsky1, 2, Michael S. Laymon2, Lee S. Beurk1 1Université de Loma Linda, 2Université Azusa Pacific
Le but de cette enquête était d’évaluer si l’utilisation d’une caméra thermique infrarouge est un outil valable pour détecter et quantifier les douleurs musculaires après l’effort.

cette janvier au jove

January 2012: This Month in JoVE

Le Journal of Visualized Experiments (JoVE) commence 2012 en publiant son 1500e article, qui porte sur une méthode d'analyse de la composition en radicaux libres de la fumée de cigarette. Bien que l'on considère le goudron du tabac comme l'agent le plus cancérigène présent dans la fumée de cigarette, les radicaux libres sont des molécules bien connues pour provoquer le cancer, et le niveau de ces cancérigènes contenus dans la fumée de cigarette n'est actuellement pas connu. La méthode utilisée dans cet article combine l'utilisation d'un dispositif de fumage à un seul orifice, qui simule l'inhalation de la cigarette, avec la spectroscopie de résonance paramagnétique électronique (RPE), une technique qui mesure l'énergie de spin émise par les électrons non appariés dans les radicaux libres. Une modification importante du dispositif de fumage à un seul orifice utilisé dans cet article est l'introduction d'un piège à azote liquide placé devant le piège à spins. L'azote liquide élimine la vapeur d'eau de la fumée de cigarette et améliore ainsi considérablement les spectres de RPE.
En plus de mesurer la concentration en radicaux libres présente dans la fumée de cigarette, des antioxydants d'origine végétale sont introduits dans des filtres à cigarettes modifiés et les spectres de résonance de spin électronique (ESR) de la fumée de cigarette ayant traversé ces filtres sont obtenus. L'extrait de pépins de raisin et la lycopène se sont révélés avoir les effets piégeurs les plus significatifs sur les radicaux libres, et si des moyens rentables d'incorporer ces molécules dans les filtres à cigarettes peuvent être mis au point, une cigarette moins nocive pourrait être créée.
Dans Médecine clinique et translationnelle, JoVE présente une méthode analytique permettant de déterminer l'indice de giration local (lGI), une mesure de l'importance du repliement cortical. Les sillons corticaux se développent durant les premiers mois suivant la naissance, et des événements indésirables survenant à cette période peuvent entraîner des anomalies de l'anatomie de la surface cérébrale, qui pourraient finalement être associées à des troubles neuropsychiatriques.
L'outil d'analyse développé pour calculer l'indice de gyrification local est Freesurfer, qui peut convertir des images IRM pondérées en T1 en reconstructions 3D du cortex. Des reconstructions séparées sont créées pour les interfaces matière grise/blanche et grise/piale, qui sont ajustées manuellement avant de calculer l'IGl. Après une opération de lissage, des régions circulaires des surfaces piale et grise/blanche sont comparées afin de calculer l'IGl pour des milliers de points répartis sur l'ensemble du cerveau. Freesurfer rend l'analyse de la gyrification simple et accessible aux cliniciens et aux chercheurs en neurosciences, intéressés par la comparaison de l'ampleur du repliement cortical entre différents individus dans des états normaux et pathologiques.
L'article de JoVE sur l'Immunologie et les infections du mois de janvier poursuit la tradition de la revue de publier des méthodologies de pointe dans le domaine de la recherche sur les maladies transmises par des vecteurs. Plus précisément, cet article enrichit la collection exhaustive de protocoles de JoVE consacrés à la recherche sur le paludisme en étendant notre bibliothèque au paludisme cérébral — une affection dévastatrice présentant une forte susceptibilité chez les enfants. En bref, ce protocole consiste à exposer une monocouche de cellules endothéliales cérébrales humaines, cultivées dans des boîtes de Pétri, à des globules rouges infectés par Plasmodium falciparum. Après des étapes de lavage et d'enrichissement, des rendements élevés de parasites, capables d'infecter le cerveau, peuvent être isolés et caractérisés plus avant.
En neurosciences, JoVE présente une méthode permettant d'étudier la migration des cellules de la crête neurale. Ces cellules constituent un type cellulaire transitoire, multipotent et développemental qui peut, outre se différencier en tissu neuronal, donner naissance à du muscle lisse, à des cellules chromaffines, du cartilage et des os. Des embryons de poulet sont soigneusement préparés afin d'isoler la région du tronc et d'extraire le tube neural pour une culture nocturne sur des lamelles recouvertes de fibronectine, ce qui permet aux cellules de la crête neurale de s'émigrer du tube neural. Après retrait du tube neural, les lamelles contenant les cellules de la crête neurale cultivées sont transférées dans une chambre de Zigmond modifiée — une chambre qui permet d'établir un gradient de concentration d'un agent chimiotactique présumé à travers la culture. Une imagerie en temps réel suivie d'une analyse des trajectoires cellulaires est utilisée pour évaluer le potentiel chimiotactique des molécules introduites dans la chambre de Zigmond, offrant ainsi des informations sur les signaux moléculaires qui orientent la migration de ce type cellulaire développemental important.
Ces articles vedettes comprennent quatre des cinquante protocoles vidéo publiés en janvier. D'autres articles notables incluent des méthodes pour visualiser les structures de la cuticule de C. elegans, l'imagerie thermique de la douleur musculaire à apparition retardée, la culture du mésencéphale ventral en tranches organotypiques, et l'induction de l'athérosclérose chez la souris.

Cette Janvier au JoVE

Le Journal of Visualized Experiments (JoVE) commence l'année 2012 en publiant son 1 500e article, lequel porte sur une méthode d'analyse de la composition en radicaux libres de la fumée de cigarette. Bien que l'on considère que le goudron de tabac soit l'agent le plus carcinogène de la fumée de cigarette, les radicaux libres sont des molécules cancérogènes bien connues, et le taux de ces carcinogènes contenus dans la fumée de cigarette n'est pas actuellement connu. La méthode employée dans cet article combine l'utilisation d'un dispositif de fumage à orifice unique, qui simule le tirage d'une cigarette, avec la spectroscopie de résonance paramagnétique électronique (RPE), une technique qui mesure l'énergie de spin émise par les électrons non appariés des radicaux libres. Une modification importante du dispositif de fumage à orifice unique utilisé dans cet article est l'introduction d'un piège à azote liquide en amont du piège à spins. L'azote liquide élimine la vapeur d'eau de la fumée de cigarette et améliore ainsi considérablement les spectres RPE. En plus de mesurer la concentration de radicaux libres présents dans la fumée de cigarette, des antioxydants végétaux sont introduits dans des filtres à cigarettes modifiés, et les spectres RPE de la fumée de cigarette passée à travers ces filtres sont obtenus. Il a été observé que l'extrait de pépins de raisin et le lycopène présentaient les effets de piégeage des radicaux libres les plus significatifs ; si des moyens rentables d'incorporer ces molécules dans les filtres à cigarettes peuvent être développés, une cigarette moins nocive pourrait être créée. En Médecine Clinique et Translationnelle, JoVE présente une méthode analytique pour déterminer l'index de gyrification local (lGI), une mesure de l'étendue du plissement cortical. Les plis corticaux se développent au cours des premiers mois après la naissance, et des événements indésirables durant cette période peuvent entraîner des anomalies de l'anatomie de surface du cerveau, lesquelles peuvent finalement être corrélées à des troubles neuropsychiatriques. L'outil d'analyse développé pour calculer l'index de gyrification local est Freesurfer, qui peut convertir des clichés d'IRM pondérés en T1 en reconstructions 3D du cortex. Des reconstructions distinctes sont créées pour les interfaces substance grise/substance blanche et substance grise/pie-mère, lesquelles sont ajustées manuellement avant le calcul du lGI. Après une opération de lissage, des régions circulaires des surfaces piales et grise/blanche sont comparées afin de calculer le lGI pour des milliers de points sur l'ensemble du cerveau. Freesurfer rend l'analyse de la gyrification simple et accessible aux cliniciens et aux neuroscientifiques souhaitant comparer l'étendue du plissement cortical entre différents individus, dans des états normaux ou pathologiques. L'article d'Immunologie et d'Infection de JoVE pour le mois de janvier poursuit la tradition de la revue de publier des méthodologies de pointe dans la recherche sur les maladies vectorielles. Plus précisément, cet article enrichit la collection complète de protocoles de JoVE pour la recherche sur le paludisme en étendant notre bibliothèque au paludisme cérébral, une affection dévastatrice à laquelle les enfants sont très vulnérables. En résumé, ce protocole consiste à exposer une monocouche de cellules endothéliales cérébrales humaines, ensemencées sur des boîtes de Pétri, à des globules rouges infectés par Plasmodium falciparum. Après des étapes de lavage et d'enrichissement, des rendements élevés de parasites, capables d'infecter le cerveau, peuvent être isolés et caractérisés plus précisément. En Neurosciences, JoVE présente une méthode pour étudier la migration des cellules de la crête neurale. Ces cellules constituent un type cellulaire développemental multipotent et transitoire qui peut, outre la formation de tissu neuronal, se différencier en muscles lisses, en cellules chromaffines, en cartilage et en os. Des embryons de poulet sont soigneusement préparés afin que la région du tronc puisse être isolée et le tube neural excisé pour une culture nocturne sur des lamelles revêtues de fibronectine, ce qui permet aux cellules de la crête neurale d'émigrer du tube neural.

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