Name: Février 2012: Ce mois-ci dans JoVE (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-02-01T09:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 53 s
Description: Découvrez les avancées récentes en neuroscience et biologie grâce aux protocoles expérimentaux visualisés de JoVE. Cette méthode aide les chercheurs à adopter de nouvelles approches méthodologiques.

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<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3445">MALDI Imagerie par spectrométrie de masse des neuropeptides dans la maladie de Parkinson</a></h2>
Jörg Hanrieder1, 2, Anna Ljungdahl1, Malin Andersson1 1Département de biosciences pharmaceutiques, Université d’Uppsala, 2Département de génie chimique et biologique, Université de technologie Chalmers
La pharmacothérapie de remplacement de la dopamine utilisant la L-DOPA est le traitement symptomatique le plus couramment utilisé de la maladie de Parkinson, mais elle s’accompagne d’effets secondaires, notamment des mouvements anormaux involontaires, appelés dyskinésie 1. Ici, un protocole de spectrométrie de masse d’imagerie MALDI est présenté qui détecte les changements dans les niveaux de neuropeptides du cerveau du rat liés à la dyskinésie.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3466">Détection de l’hypoxie microrégionale dans le cortex cérébral de la souris par imagerie à deux photons de la fluorescence endogène du NADH</a></h2>
Oksana Polesskaya1, Anita Sun2, Gheorghe Salahura2, Jharon N. Silva1, Stephen Dewhurst1, Karl Kasischke3 1Département de microbiologie et d’immunologie, Université de Centre médical de Rochester, 2Centre de développement et de maladies neuronaux, Centre médical de l’Université de Rochester, 3Département de neurologie, Centre de développement et de maladies neuronales, Centre médical de l’Université de Rochester 
Nous décrivons ici une méthode permettant de visualiser directement l’hypoxie tissulaire microrégionale dans le cortex de la souris in vivo. Il est basé sur l’imagerie simultanée à deux photons du nicotinamide adénine dinucléotide (NADH) et de la microcirculation corticale. Cette méthode est utile pour l’analyse à haute résolution de l’approvisionnement en oxygène des tissus.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3661">MAME Modèles pour l’imagerie 4D de cellules vivantes de tumeurs : interactions microenvironnementales qui ont un impact sur la progression maligne</a></h2>
Mansoureh Sameni1, Arulselvi Anbalagan1, Mary B. Olive1, Kamiar Moin1, 2, Raymond R. Mattingly1, 2, Bonnie F. Sloane1, 2 1Département de pharmacologie, Wayne State Université, 2Institut du cancer Barbara Ann Karmanos, Université d’État de Wayne 
Nous avons développé des modèles de coculture 3D pour l’imagerie en temps réel des interactions entre les cellules tumorales du sein et d’autres cellules de leur microenvironnement qui ont un impact sur la progression vers un phénotype invasif. Ces modèles peuvent servir de criblages précliniques pour des médicaments ciblant les voies protéolytiques, chimiokines/cytokines et kinases induites par les paracrines impliquées dans l’invasivité.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3671">The WATCHMAN Dispositif de fermeture de l’appendice auriculaire gauche pour la fibrillation auriculaire</a></h2>
Sven Möbius-Winkler, Marcus Sandri, Norman Mangner, Phillip Lurz, Ingo Dähnert, Gerhard Schuler University of Leipzig Heart Center
La vidéo ci-jointe décrit une procédure de mise en place percutanée du dispositif WATCHMAN Left Atrial Appendage (LAA). Le WATCHMAN est un dispositif au nitinol conçu pour être implanté de manière permanente au niveau de l’ouverture de l’appendice auriculaire gauche (AAL) ou légèrement distal, afin de piéger les caillots sanguins avant qu’ils ne sortent de l’AAL, prévenant ainsi l’AVC thromboembolique.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3756">Mesure de la pression ventriculaire gauche chez les souris embryonnaires et néonatales tardives</a></h2>
Victoria P. Le1, Attila Kovacs2, Jessica E. Wagenseil1 1 Départementde génie biomédical, Université de Saint Louis, 2Département de médecine interne, Faculté de médecine de l’Université de Washington
La mesure de la pression ventriculaire gauche (VG) chez les souris embryonnaires et néonatales est décrite. La pression est mesurée en insérant une aiguille reliée à un transducteur rempli de liquide dans le VG sous guidage par ultrasons. Des précautions doivent être prises pour maintenir une fonction cardiaque normale pendant le protocole expérimental.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3888">Essai de clairance mésothéliale in vitro qui modélise les premières étapes des métastases du cancer de l’ovaire</a></h2>
Rachel A. Davidowitz, Marcin P. Iwanicki, Joan S. Brugge Département de biologie cellulaire, Harvard Medical School
Le test de clairance mésothéliale décrit ici tire parti des cellules marquées par fluorescence et de la microscopie vidéo en accéléré pour visualiser et mesurer quantitativement les interactions entre les sphéroïdes multicellulaires du cancer de l’ovaire et les monocouches de cellules mésothéliales. Ce test modélise les premières étapes des métastases du cancer de l’ovaire.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3894">Collection de salive, de glandes salivaires et d’hémolymphe de Ixodes Scapularis Ticks</a></h2>
Toni G. Patton1, Gabrielle Dietrich2, Kevin Brandt1, Marc C. Dolan2, Joseph Piesman2, Robert D. Gilmore Jr. 11Activité de microbiologie et de pathogenèse, Direction des maladies bactériennes, Division des maladies à transmission vectorielle, Centre national des maladies infectieuses émergentes et zoonotiques, Centres de contrôle et de prévention des maladies, 2Activité des maladies transmises par les tiques, Branche des maladies bactériennes, Division des maladies à transmission vectorielle, Centre national des maladies infectieuses émergentes et zoonotiques, Centres de contrôle et de prévention des maladies
La collecte de l’hémolymphe, des glandes salivaires et de la salive des tiques infectées est importante pour étudier comment les agents pathogènes transmis par les tiques causent des maladies. Dans ce protocole, nous montrons comment collecter l’hémolymphe et les glandes salivaires des nymphes d’Ixodes scapularis qui se nourrissent. Nous démontrons également la collecte de salive chez les femelles I. scapularis adultes.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3750">Un nouveau défibrillateur implantable à chambre unique avec détection auriculaire : une démonstration pratique de la détection et de la facilité d’implantation</a></h2>
Dietmar Bänsch, Ralph Schneider, Ibrahim Akin, Cristoph A. Nienaber Heart Center Rostock, Hôpital universitaire de Rostock, Allemagne
Les défibrillateurs automatiques implantables (DCI) à double chambre peuvent améliorer la détection de la fibrillation auriculaire ainsi que la différenciation des tachycardie. Cependant, cet avantage est miné par des complications associées à la deuxième électrode, qui est requise dans les dispositifs conventionnels à double chambre. C’est pourquoi BIOTRONIK a mis au point une nouvelle électrode appelée LinoxSMART S DX qui, lorsqu’elle est utilisée en conjonction avec le DCI Lumax DX, offre une détection à double chambre sans les risques associés à la deuxième électrode.

Aucun conflit d&#39;intérêt déclaré.

février 2012: ce mois-ci dans jove

February 2012: This Month in JoVE

Le numéro de février du Journal of Visualized Experiments (JoVE) aborde un thème clinique avec la publication de deux articles, qui démontrent l’implantation de dispositifs médicaux utilisés pour traiter l’arythmie cardiaque. Plus précisément, les deux articles se concentrent sur le traitement de la fibrillation auriculaire - une maladie dévastatrice qui peut finalement conduire à un accident vasculaire cérébral.
La première procédure, dirigée par le professeur Dietmar Baensch de l’hôpital universitaire de Rostock, consiste en l’implantation chirurgicale d’un défibrillateur automatique implantable, ou DCI. Les DCI sont des dispositifs largement utilisés pour mettre fin aux arythmies ventriculaires. Cependant, si le site de la stimulation anormale est d’origine supraventriculaire, comme dans l’oreillette gauche, ces dispositifs peuvent délivrer des chocs inappropriés et douloureux. Pour surmonter ce problème d’erreur de diagnostic potentielle, ainsi que les taux de complications plus élevés observés avec les électrodes à double chambre, Biotronik a mis au point une sonde ICD unique, capable de détecter à la fois l’oreillette et la ventricule. Guidés par la fluoroscopie à rayons X et l’électrophysiologie, le Dr Baensch et son équipe font la démonstration de la procédure chirurgicale d’insertion, de test et d’ancrage de l’électrode à chambre unique. Après le positionnement de l’électrode, le défibrillateur Lumax est joint à l’électrode et inséré dans le patient. Pour évaluer la fonction de l’appareil, la fibrillation ventriculaire est induite par un choc d’onde T, et la capacité du défibrillateur à détecter l’arythmie et à administrer un choc correctif est évaluée.
Alors que le système ICD Lumax peut atténuer l’arythmie cardiaque en corrigeant la stimulation cardiaque, le dispositif d’occlusion de l’appendice auriculaire gauche (LAA) WATCHMAN de Boston Scientific est conçu pour traiter une complication grave de la fibrillation auriculaire - l’AVC thromboembolique. Chez les patients atteints de fibrillation auriculaire, l’appendice auriculaire gauche, une poche musculaire située dans l’oreillette gauche, peut agir comme un réservoir pour la coagulation du sang, qui, s’il est délogé, peut former des embolies pouvant provoquer un accident vasculaire cérébral. Lorsqu’il est implanté, le dispositif WATCHMAN peut piéger les caillots dans l’AAG avant qu’ils n’en sortent. Après une évaluation de la morphologie de l’AAL, nos auteurs, dirigés par le Dr Sven Möbius-Winkler de l’Université de Leipzig, démontrent des méthodes pour insérer un fil-guide à travers l’artère fémorale dans le cœur, faire avancer le dispositif dans l’oreillette gauche et déployer le dispositif dans l’appendice auriculaire gauche. Des études ont montré que les patients recevant l’intervention WATCHMAN ont une probabilité réduite d’événements cardiaques indésirables par rapport aux patients recevant le médicament anticoagulant warfarine.
Bien que le système ICD Lumax et le dispositif d’occlusion WATCHMAN soient prometteurs pour le traitement de l’arythmie cardiaque et de ses complications, aucune utilisation n’est approuvée aux États-Unis. Par le biais d’une publication vidéo dans JoVE, nos auteurs ont fourni une ressource aux médecins américains pour qu’ils puissent voir ces procédures d’implantation de dispositifs sensibles avant qu’elles ne soient disponibles de l’autre côté de l’Atlantique.
Une conséquence de la thromboembolie est l’hypoxie, et JoVE se rend à l’Université de Rochester pour documenter une méthode d’imagerie à 2 photons de l’hypoxie microrégionale dans le cortex cérébral. Nos auteurs illustrent une préparation détaillée de la fenêtre crânienne ouverte suivie d’une imagerie à 2 photons de la fluorescence endogène du nicotinamide adénine dinucléotide, ou NADH. Le NADH est bien connu pour sa capacité à transporter des électrons pendant la respiration cellulaire, et il se trouve que la fluorescence du NADH présente une relation non linéaire avec la pression partielle de l’oxygène dans les tissus. Dans le cortex, la fluorescence du NADH augmente à mesure que l’hypoxie est induite, ce qui permet à ces chercheurs de déterminer quelles zones corticales sont les plus vulnérables à l’hypoxie, ainsi que le modèle géométrique de diffusion de l’oxygène à partir des vaisseaux.
Pour la bio-ingénierie, JoVE se rend à l’Université d’État de Wayne pour capturer une procédure de visualisation du microenvironnement de la tumeur du cancer du sein, in vitro. Nos auteurs démontrent une procédure d’assemblage d’un système de co-culture de cancer du sein, qu’ils appellent Mammary Architecture and Microenvironment Engineering, ou MAME. En bref, ces modèles de culture consistent en une couche de fibroblastes mammaires humains dans une matrice de collagène 1, sous une couche de matrice de membrane basale reconstituée, sur laquelle des cellules de carcinome canalaire du sein sont ajoutées avant que le modèle entier ne soit immergé dans le milieu. Lorsqu’elle est imagée en 4D, ou en 3 dimensions dans le temps, la prolifération des cellules du carcinome peut être suivie. De plus, la dégradation de la membrane basale peut également être évaluée, grâce à l’incorporation d’un type de collagène qui devient fluorescent lorsqu’il est hydrolysé. Ce système de culture innovant peut fournir aux chercheurs sur le cancer du sein des informations sur les voies protéolytiques qui favorisent les phénotypes invasifs dans les cellules cancéreuses du sein et peut être utilisé pour dépister de nouveaux inhibiteurs de petites molécules susceptibles d’entraver la prolifération tumorale.
Dans Immunology and Infection, JoVE se concentre sur les maladies à transmission vectorielle, où des chercheurs du Center for Disease Control de Fort Collins, au Colorado, présentent trois procédures fondamentalement importantes pour comprendre comment les agents pathogènes infectieux migrent à travers la tique. La première procédure consiste à retirer l’une des pattes de la tique, ce qui permet la collecte de l’hémolymphe - le liquide transporte l’oxygène vers les organes de la tique. La bactérie qui cause la maladie de Lyme, Borrelia burgdorferi, se déplacera vers l’hémolymphe de la tique une fois qu’un repas de sang aura été absorbé par l’intestin moyen. Le deuxième protocole de dissection illustre les étapes d’accès à l’hémocèle et d’ablation des glandes salivaires, où résident Borrrelia avant la transmission à un hôte. Le protocole final commence par l’application de l’agoniste muscarinique, la pilocarpine, sur la surface dorsale d’une tique engorgée, afin d’induire la salivation. La salive est recueillie à partir d’une pièce buccale appelée hypostome et des techniques manuelles pour favoriser la salivation des tiques par un massage doux sont démontrées.
De la maladie à transmission vectorielle à l’implantation de dispositifs médicaux, le mois de février regorge de contenu soumis par des auteurs dédiés à la compréhension et au traitement des maladies humaines. Parmi les autres articles notables du mois de février, citons les méthodes d’évaluation du potentiel métastatique du cancer de l’ovaire, l’analyse spatiale des neuropeptides dans un modèle de rongeur de la maladie de Parkinson et les mesures de la pression ventriculaire chez les souris néonatales et embryonnaires. Du laboratoire au chevet du patient, aucune autre revue n’offre une fenêtre sur la recherche biomédicale comme JoVE. Restez à l’affût pour le contenu de février !

Février 2012: Ce mois-ci dans JoVE

Le numéro de février du Journal of Visualized Experiments (JoVE) adopte une thématique clinique avec la publication de deux articles démontrant l'implantation de dispositifs médicaux utilisés pour traiter l'arythmie cardiaque. Plus précisément, les deux articles se concentrent sur le traitement de la fibrillation auriculaire, une affection dévastatrice pouvant mener à un accident vasculaire cérébral (AVC). La première procédure, dirigée par le professeur Dietmar Baensch de l'hôpital universitaire de Rostock, concerne l'implantation chirurgicale d'un défibrillateur automatique implantable, ou DAI. Les DAI sont des dispositifs largement utilisés pour mettre fin aux arythmies ventriculaires. Cependant, si le site du stimulateur anormal est d'origine supraventriculaire, comme dans l'oreillette gauche, ces dispositifs peuvent délivrer des chocs inappropriés et douloureux. Pour remédier à ce problème de diagnostic erroné potentiel, ainsi qu'aux taux de complications plus élevés observés avec les électrodes à double chambre, Biotronik a mis au point une sonde de DAI unique, capable d'assurer une détection à la fois auriculaire et ventriculaire. Guidés par fluoroscopie aux rayons X et par électrophysiologie, le Dr Baensch et son équipe présentent la procédure chirurgicale d'insertion, de test et d'ancrage de l'électrode à chambre unique. Après le positionnement de l'électrode, le défibrillateur Lumax est raccordé à celle-ci et inséré chez le patient. Pour évaluer le fonctionnement du dispositif, une fibrillation ventriculaire est induite via un choc sur l'onde T, et la capacité du défibrillateur à détecter l'arythmie et à administrer un choc correcteur est évaluée. Alors que le système DAI Lumax peut atténuer l'arythmie cardiaque en corrigeant le rythme cardiaque, le dispositif d'occlusion de l'appendice auriculaire gauche (AAG) WATCHMAN de Boston Scientific est conçu pour traiter une complication grave de la fibrillation auriculaire : l'AVC thromboembolique. Chez les patients souffrant de fibrillation auriculaire, l'appendice auriculaire gauche, une poche musculaire dans l'oreillette gauche, peut servir de réservoir pour le sang coagulé qui, s'il se détache, peut former des emboles provoquant un AVC. Une fois implanté, le dispositif WATCHMAN peut piéger les caillots à l'intérieur de l'AAG avant qu'ils n'en sortent. Après l'évaluation de la morphologie de l'AAG, nos auteurs, dirigés par le Dr Sven Möbius-Winkler de l'université de Leipzig, présentent les méthodes d'insertion d'un guide à travers l'artère fémorale vers le cœur, le passage du dispositif dans l'oreillette gauche et le déploiement du dispositif dans l'appendice auriculaire gauche. Des études ont montré que les patients bénéficiant d'une intervention WATCHMAN présentent une probabilité réduite d'événements cardiaques indésirables par rapport aux patients traités par la warfarine, un médicament anticoagulant. Bien que le système DAI Lumax et le dispositif d'occlusion WATCHMAN soient prometteurs pour le traitement de l'arythmie cardiaque et de ses complications, aucun de ces dispositifs n'est approuvé pour une utilisation aux États-Unis. Grâce à la publication vidéo dans JoVE, nos auteurs ont fourni une ressource permettant aux médecins américains d'observer ces procédures délicates d'implantation de dispositifs avant qu'elles ne soient disponibles de l'autre côté de l'Atlantique. L'une des conséquences de la thromboembolie est l'hypoxie, et JoVE se rend à l'université de Rochester pour documenter une méthode d'imagerie biphotonique de l'hypoxie microrégionale dans le cortex cérébral. Nos auteurs illustrent une préparation détaillée de fenêtre crânienne ouverte, suivie d'une imagerie biphotonique de la fluorescence endogène du nicotinamide adénine dinucléotide, ou NADH. Le NADH est reconnu pour sa capacité à transporter des électrons lors de la respiration cellulaire, et il se trouve que la fluorescence du NADH présente une relation non linéaire avec la pression partielle d'oxygène dans les tissus. Dans le cortex, la fluorescence du NADH augmente lors de l'induction d'une hypoxie, permettant à ces chercheurs de déterminer quelles zones corticales sont les plus vulnérables à l'hypoxie, ainsi que le schéma géométrique de la diffusion de l'oxygène à partir des vaisseaux. Pour la section Bioengineering, JoVE se rend à l'université Wayne State pour capturer une procédure de visualisation in vitro du microenvironnement tumoral du cancer du sein.

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Aaron Kolski-Andreaco

Février 2012: Ce mois-ci dans JoVE

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