La transmission des virus de plante à l'aide aleurodes

L’objectif général de l’expérience suivante est de transmettre des virus végétaux à l’aide de mouches blanches. Ceci est réalisé en établissant et en maintenant une colonie de mouches blanches qui approvisionnent chaque semaine les mouches blanches adultes nouvellement émergées, qui ne sont pas contaminées par d’autres vecteurs et agents pathogènes potentiels. Les colonies se maintiennent en ajoutant régulièrement des mouches blanches aux jeunes plants exempts d’insectes à partir desquels de nouveaux adultes sont produits.

Après 17 à 20 jours par semaine, les adultes nouvellement émergés peuvent être transférés dans des plantes d’essai pour acquérir ou transmettre la transmission du virus. Des rendements de près de 100 % sont généralement obtenus, et les taux de transmission commencent généralement par être faibles et augmentent avec une optimisation systématique. L’aspect le plus difficile de l’utilisation des mouches blanches pour inoculer les virus est d’élever les mouches blanches de manière à exclure les agents pathogènes et les insectes indésirables.

Les agents pathogènes, en particulier les champignons qui pourrissent les racines et les brûlures des feuilles, réduisent la qualité des plantes hôtes du virus. Les insectes indésirables tels que les friperies peuvent supprimer la reproduction des aleurodes et compromettre la qualité de la plante hôte du virus. Heather Capa Bianco, une technicienne de mon laboratoire, fera la démonstration des procédures.

Les colonies d’aleurodes doivent être maintenues dans une salle de croissance propre et contrôlée. Le contrôle de l’humidité relative, de la température, de la photopériode et de l’intensité lumineuse est essentiel pour une colonie qui passe de l’œuf à l’adulte en 18 jours, utilisez les paramètres suivants. La température doit être réglée entre 26 et 30 degrés Celsius, et l’humidité relative doit idéalement être comprise entre 30 et 50 %Si l’humidité relative dépasse 70 %, les agents pathogènes fongiques des insectes et des plantes sont susceptibles de devenir un problème.

La période photo idéale est de 14 heures. L’intensité lumineuse doit être assez élevée et les ampoules fluorescentes VHO peuvent produire des bougies de 800 à 1000 pieds dans la canopée des plantes. Les taux d’engrais et d’arrosage doivent également être réduits pour décourager les agents pathogènes fongiques, ainsi que l’accumulation de sel Les cages blanches doivent permettre la ventilation, la facilité d’accès et un espace suffisant pour une population blanche croissante.

De bons résultats ont été obtenus avec l’organza d’organe et le tamisage en aluminium, ainsi que le criblage de l’espèce de plante est une considération importante. Tout d’abord, il doit avoir une croissance rapide, mais ne pas envahir la chambre. Deuxièmement, la plante doit être suffisamment forte pour supporter une forte population d’insectes sans s’effondrer.

Pour ces raisons, les cultivars nains ou de brousse font de bons choix de plantes. Troisièmement, la plante doit être capable d’héberger ou non le virus utilisé en fonction du type de colonie élevée. Parce que la colonie peut s’effondrer à cause des acariens, des THP, des mouches blanches sauvages ou d’autres insectes envahissants, les cultivars choisis doivent être cultivés dans un environnement protégé afin d’exclure d’autres insectes.

Les premières mouches blanches d’une nouvelle colonie doivent être exemptes de virus végétaux, d’autres insectes et d’insectes pathogènes. Si des mouches blanches sont récoltées dans le champ, élevez-les pendant au moins huit semaines sur des plantes qui ne sont pas des hôtes du virus pendant cette période, vérifiez l’absence de symptômes de la plante. Une fois que vous avez obtenu des mouches blanches propres, introduisez-en entre 20 et 100 dans une cage de plantes par aspiration ou en les secouant doucement à partir d’une autre plante source.

Chaque semaine, une nouvelle cage doit être établie. Pendant les trois premières semaines, utilisez les aleurodes sur les plantes non ST pour établir la nouvelle cage. À partir de la quatrième semaine, utilisez de jeunes aleurodes adultes de la cage de trois semaines pour établir la cage suivante.

Au cours de la première semaine en cage, les aleurodes pondront des œufs sur la face inférieure des feuilles des plantes. Au cours de la deuxième semaine, des mouches blanches immatures apparaîtront et certains des adultes seront encore en vie. Au cours de la troisième semaine, de nombreuses nouvelles mouches blanches adultes auront émergé, et il devrait y avoir une augmentation très notable de la population d’aleurodes adultes.

Ces aleurodes peuvent être utilisées pour des expériences de transmission. Au cours de la quatrième semaine, les adultes âgés d’une semaine doivent être transférés dans une nouvelle cage. L’ancienne cage doit être retirée et ses plantes jetées. Précis.

Le transfert en douceur des mouches blanches est réalisé à l’aide d’un dispositif d’aspiration et les flacons de collecte ne s’aspirent jamais. Les mouches blanches qui se nourrissent des plantes lorsqu’elles nourrissent les styles blancs sont incrustées dans la plante et se détachent si elles sont éloignées de la plante. Rendant l’aleurode inutile pour collecter des mouches blanches d’une main, tenez une garde en plastique jaune à l’intérieur de la cage de la colonie de l’autre main.

Tapotez doucement les plantes pour encourager les mouches blanches adultes à voler. Les mouches blanches seront attirées par le carton jaune où elles pourront être collectées. À l’aide de l’aspirateur et d’une aspiration très douce, n’ajoutez pas plus de 20 mouches blanches à chaque flacon de prélèvement.

Tapotez ensuite le flacon pour désorienter les mouches et bouchez le flacon avec param. Pour assurer une transmission virale réussie, essayez de faire passer de 15 à 40 jeunes adultes des plantes infectées par le virus aux plantes saines, en fonction du virus et de la plante hôte. D’autres protocoles, comme le dépistage résistant, nécessitent des populations de démarrage plus importantes.

Dans ce cas, secouez les plantes infectées par le virus, qui sont infestées de mouches blanches, sur les plantes qui doivent être inoculées. Une fois que les mouches blanches sont placées sur une plante infectée par le virus, laissez-les se nourrir pendant 48 à 72 heures pour acquérir des virus transmis de manière persistante. Plus de temps n’augmente généralement pas le taux de transmission des virus transmis de manière non persistante ou persistante.

Une période d’accès à l’acquisition plus courte, d’une heure à une journée, suffira pour les expériences qui nécessitent une acquisition à partir de feuilles spécifiques. Des cages à pinces peuvent être utilisées, installez la cage de manière à ce que le dessous des feuilles soit accessible et n’utilisez pas plus de 10 mouches blanches femelles par cage de 2,5 centimètres de diamètre, sinon le taux de transmission diminuera en raison de l’encombrement. Pour l’inoculation des plantes, choisir la cage appropriée en fonction du nombre de plantes.

Une plante, par exemple, n’a besoin que d’une petite cage à peine plus grande qu’elle-même pour plusieurs plantes, choisissez entre un tube en PVC plus petit, une cage à cadre ou une cage à cadre en aluminium plus grande. Plus l’espace autour de la canopée est petit, mieux c’est. Une fois que les mouches blanches sont ajoutées à la nouvelle plante, le temps nécessaire à l’inoculation dépend du virus et de la plante hôte.

Tout comme pour l’acquisition, le temps nécessaire à la transmission dépend du mode de transmission. La transmission non persistante nécessite un temps d’accès beaucoup plus court que la transmission semi-persistante ou persistante. Vérifiez que les aleurodes sondent ou se nourrissent pendant la période d’accès à l’inoculation.

Ouvrez la cage et examinez le dessous de certaines feuilles de chaque plante. Pour l’inoculation plus longue. Les périodes d’accès perturbent doucement les plantes périodiquement pour favoriser leur redistribution sur les plantes.

Cela permettra d’augmenter le taux de transmission en contrecarrant les tendances naturelles des mouches blanches à s’agréger pour mettre fin à la période d’inoculation. Tuez les mouches blanches avec deux insecticides appliqués, l’un après l’autre. Appliquez d’abord un insecticide de contact pour éliminer rapidement les mouches blanches adultes, comme du savon insecticide.

Deuxièmement, appliquez un insecticide systémique pour éliminer les mouches blanches qui se développent dans les semaines suivantes. Et tous les adultes restants émettent, aride ou pyrazine sont des choix efficaces. En utilisant ces procédures, il est possible d’obtenir régulièrement des taux de transmission du virus de 100 %. Des taux de transmission aussi élevés sont essentiels lors du dépistage de la résistance au virus chez les plantes d’essai et sont souhaitables lors de l’évaluation de l’efficacité des composés chimiques pour leur capacité à interférer avec la transmission du virus.

Après avoir regardé cette vidéo, vous devriez avoir une bonne compréhension de la façon d’élever des mouches blanches et de les utiliser pour transmettre des virus végétaux. Ces procédures peuvent être utilisées à des fins de recherche ou pour le développement commercial de plantes résistantes aux virus, ou pour tester des composés dont la capacité à interférer avec la transmission du virus.