Name: Avril 2012: Ce mois-ci dans JoVE (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-04-01T00:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 13 s
Description: Découvrez les techniques expérimentales innovantes en neurosciences et biologie présentées dans ce numéro de JoVE. Ces méthodes visualisées facilitent la reproduction et l'application des protocoles scientifiques.

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<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3646">Système de culture de film de fibroïne de soie pour l’analyse in vitro et la conception de biomatériaux</a></h2>
Brian D. Lawrence1, Zhi Pan2, 1, Michael D. Weber1, David L. Kaplan3, Mark I. Rosenblatt1 1 MargaretM. Dyson Vision Research Institute, Weill Cornell Medical College , 21Institut de recherche sur la vision Margaret M. Dyson, Weill Cornell Medical College, 3Département de génie biomédical, Université Tufts
Les films de soie sont une nouvelle classe de biomatériaux facilement personnalisables pour un éventail d’applications biomédicales. Le système de culture sur film de soie présenté est hautement adaptable à une variété d’analyses in vitro. Ce système représente une plateforme de conception de biomatériaux offrant une optimisation in vitro avant traduction directe vers des modèles in vivo.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3666">Induction de l’infarctus du myocarde chez le poisson-zèbre adulte à l’aide de la cryolésion</a></h2>
Fabian Chablais, Anna Jaźwińska Département de biologie, Unité de zoologie, Université de Fribourg, Fribourg, Suisse
Zebrafish représente un modèle précieux pour étudier les mécanismes de régénération cardiaque chez les vertébrés. Ici, nous présentons un protocole pour l’induction d’un infarctus cardiaque chez le poisson-zèbre adulte à l’aide de la cryolésion. Cette méthode entraîne une mort cellulaire massive dans 20 % de la paroi ventriculaire, similaire à celle observée dans les infarctus de mammifères.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3680">Segmentation et mesure des volumes de graisse dans des modèles murins d’obésité à l’aide de la tomodensitométrie à rayons X</a></h2>
Todd A. Sasser1, Sarah E. Chapman2, Shengting Li1, Caroline Hudson2, Sean P. Orton1, Justin M. Diener3, Seth T. Gammon1, Carlos Correcher4, W. Matthew Leevy2 1Carestream Molecular Imaging , 2Département de chimie et de biochimie, Université de Notre Dame , 3Freimann Life Science Center, Université de Notre Dame , 4Recherche et développement, Oncovision, GEM-Imaging S.A.
L’analyse de la teneur en matières grasses est régulièrement effectuée dans le cadre d’études utilisant des modèles d’obésité murine. Les méthodes émergentes d’imagerie et d’analyse par tomodensitométrie chez les petits animaux permettent une analyse longitudinale détaillée de la teneur en matières grasses. Nous détaillons ici les procédures étape par étape pour effectuer l’imagerie, l’analyse et la visualisation de petits animaux.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3793">Radiochirurgie stéréotaxique pour le cancer gynécologique </a></h2>
Charles Kunos1, James M. Brindle1, Robert Debernardo2 1Département de radio-oncologie, Centre médical Case des hôpitaux universitaires et École de médecine de l’Université Case Western Reserve, 2Département d’obstétrique et de gynécologie, Division d’oncologie gynécologique, Centre médical Case des hôpitaux universitaires et École de médecine de l’Université Case Western Reserve
La radiothérapie stéréotaxique corporelle (SBRT) implique un rayonnement ablatif guidé par l’image délivré à des cibles cancéreuses réfractaires à la chimiothérapie ou à la radiothérapie conventionnelle. Le système robotisé Cyberknife SBRT, utilisant une localisation sophistiquée des cibles, délivre des doses de rayonnement hypofractionnées capables de stériliser les cibles cancéreuses. Cet article examinera les nouveaux rôles thérapeutiques de la SBRT pour les cancers gynécologiques.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3992">Établissement de cultures d’enrichissement eucaryote microbien à partir d’un lac antarctique chimiquement stratifié et évaluation du potentiel de fixation du carbone</a></h2>
Jenna M. Dolhi, Nicholas Ketchum, Rachael M. Morgan-Kiss Département de microbiologie, Université de Miami 
Les eucaryotes microbiens sont à la fois une source de carbone dérivé de la photosynthèse et des espèces prédatrices supérieures dans les lacs antarctiques recouverts de glace en permanence. Ce rapport décrit une approche de culture d’enrichissement pour isoler des eucaryotes microbiens métaboliquement polyvalents du lac Antarctique, le lac Bonney, et évalue le potentiel de fixation du carbone inorganique à l’aide d’un test radio-isotopique pour l’activité de la ribulose-1,5-bisphophate carboxylase oxygénase (RubisCO).
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/4008">Charge rétrograde des nerfs, des voies et des racines vertébrales à l’aide de colorants fluorescents</a></h2>
Dvir Blivis, Michael J. O'Donovan Developmental Neurobiology Section, Institut national des troubles neurologiques et des accidents vasculaires cérébraux, Instituts nationaux de la santé
Nous décrivons une technique simple et peu coûteuse permettant d’introduire une forte concentration de colorants fluorescents et sensibles au calcium dans les neurones ou dans n’importe quel tractus neuronal à l’aide d’une pipette d’aspiration en polyéthylène.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3823">Un système de culture de neurones primaires pour l’étude de la latence et de la réactivation du virus de l’herpès simplex</a></h2>
Mariko Kobayashi1, Ju-Youn Kim1, Vladimir Camarena2, Pamela C. Roehm3, Moses V. Chao4, 2, 5, 6, 7, Angus C. Wilson1, Ian Mohr1 1Département de microbiologie, École de médecine de l’Université de New York, 2Programme de neurobiologie moléculaire, Institut Skirball de médecine biomoléculaire, École de médecine de l’Université de New York, 3Département d’oto-rhino-laryngologie, École de médecine de l’Université de New York, 4Département de biologie cellulaire, École de médecine de l’Université de New York, 5Département de physiologie et de neurosciences, École de médecine de l’Université de New York, 6Département de psychiatrie, École de médecine de l’Université de New York, 7Center for Neural Science, École de médecine de l’Université de New York
Le protocole décrit un système modèle efficace et reproductible pour étudier la latence et la réactivation du virus de l’herpès simplex de type 1 (HSV-1). Le test utilise des cultures homogènes de neurones sympathiques et permet la dissection moléculaire des interactions virus-neurones à l’aide d’une variété d’outils, y compris l’interférence de l’ARN et l’expression de protéines recombinantes.

Pas de conflits d&#39;intérêt déclarés.

avril 2012: ce mois-ci dans jove

April 2012: This Month in JoVE

Le numéro d’avril du Journal of Visualized Experiments (JoVE) comprend un article qui suit un laboratoire de l’Université de Miami de l’Ohio au lac Bonney - un lac salin recouvert de glace en permanence en Antarctique. Peu d’organismes peuvent survivre aux conditions difficiles sous la glace, où la lumière, la chaleur et les sources de carbone sont très rares. Les micro-organismes unicellulaires appelés protistes sont la principale classe de microbes vivant sous le lac Bonney et sont capables d’apporter du carbone, via la photosynthèse, dans le cercle de la vie.
Après avoir déterminé le site d’échantillonnage approprié, nos auteurs forent et fondent à travers la glace afin de pouvoir prélever des échantillons à différentes profondeurs dans la colonne d’eau chimiquement stratifiée du lac. Une fois prélevés, les échantillons sont acheminés vers un laboratoire de terrain pour filtration et stabilisation. Après le traitement, les microbes présents dans l’échantillon d’eau sont cultivés pour une expérimentation ultérieure. Par exemple, nos auteurs montrent que leurs cultures d’enrichissement conservent une activité photosynthétique, et les expériences futures devraient aider à mieux comprendre la physiologie des protistes, ainsi que la façon dont ces organismes peuvent affecter le cycle géochimique mondial.
En médecine clinique et translationnelle, JoVE s’intéresse à la radiothérapie stéréotaxique corporelle, ou SBRT, pour le traitement des tumeurs gynécologiques. La SBRT est une forme peu invasive de traitement du cancer qui repose sur le rayonnement, délivré par un accélérateur linéaire monté sur un bras robotique, pour inactiver biologiquement les tumeurs.
Nos auteurs, du Case Medical Center, expliquent comment les marqueurs repères des tissus mous en or sont placés autour de la cible cancéreuse à différentes profondeurs sur la base de l’imagerie par tomodensitométrie. Au cours d’une séance de planification de traitement, des images de TDM et de TEP sont prises, puis co-enregistrées. Guidés par ces images, les oncologues radiologiques et gynécologiques désignent les volumes de cancer qui seront ciblés pendant le traitement ainsi que le contour entourant les structures normales qui doivent être laissées intactes. Au début du traitement, un système de localisation de cible détecte les marqueurs repères via l’imagerie radiographique cross-plan et la localisation des marqueurs est comparée aux données d’imagerie obtenues précédemment.
Pendant le traitement, des diodes électroluminescentes suivent le mouvement d’un patient, afin de corréler son schéma respiratoire à l’emplacement des marqueurs repères, afin que le rayonnement puisse être délivré avec précision. Surmontant les complications associées à l’immobilisation du patient, nos auteurs montrent que leur procédure de radiothérapie corporelle stéréotaxique peut délivrer avec précision le rayonnement au volume cible tout en limitant le dosage aux structures voisines.
Dans notre section Bio-ingénierie, JoVE présente un article qui consiste à fabriquer des substrats biocompatibles à partir de cocons de vers à soie. Tout d’abord, les cocons sont examinés pour détecter toute contamination et traités de manière à produire de l’extrait de soie. L’extrait est placé sur un moule PDMS, qui a été conçu pour créer un motif dans le film de soie séchant à sa surface. Une fois séché, le film de soie est soumis à un processus appelé recuit à l’eau, ce qui rend le film transparent et parfait pour la microscopie. Après l’ensemencement cellulaire sur les films, nos auteurs montrent que le suivi de la migration cellulaire sur le substrat de soie à micro-motifs est tout aussi facile que sur des surfaces de culture tissulaire plus conventionnelles. La biocompatibilité des films de soie ainsi que leur potentiel de modification chimique et structurelle en font des matériaux candidats attrayants pour des applications in vivo, comme la conception de dispositifs médicaux.
Étonnamment, la culture neuronale primaire fait son chemin dans notre section Immunologie et infection, car en avril, JoVE documente un système innovant de culture de neurones sympathiques primaires utilisé pour étudier la latence et l’activation du virus de l’herpès simplex.
Les neurones périphériques agissent comme des réservoirs pour le virus de l’herpès qui sont à l’origine des événements de réactivation. Pour établir une culture de neurones périphériques, les ganglions cervicaux supérieurs sont isolés de souris embryonnaires et, après la digestion et la dissociation, ils sont plaqués dans des plaques à 96 puits. Vers le 6e jour in vitro, des virus de l’herpès codant pour une protéine de fusion virus-GFP sont ajoutés aux cellules avec un inhibiteur de la réplication lytique. Lors du retrait de l’inhibiteur, le virus latent se réactive et l’expression de la GFP est observable par microscopie fluorescente. En comptant le nombre de puits présentant une fluorescence GFP, la capacité de petites molécules ou d’oligonucléotides de silençage génique à supprimer ou à induire la réactivation virale peut être testée, ce qui fait de ce test un outil potentiel pour découvrir de nouvelles thérapies pour aider à gérer l’infection par le HSV-1.
Ce bref résumé ne décrit que quatre des cinquante articles que JoVE publiera en avril. Parmi les autres publications notables, citons les méthodes de quantification de l’obésité chez les rats à l’aide de la tomographie à rayons X, l’induction d’un infarctus du myocarde dans le cœur du poisson zèbre et le marquage rétrograde de la moelle épinière excisée. Restez à l’écoute.

Avril 2012: Ce mois-ci dans JoVE

The April issue of the Journal of Visualized Experiments (JoVE) includes an article that follows a lab from the University of Miami of Ohio to Lake Bonney ...

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Découvrez les techniques expérimentales innovantes en neurosciences et biologie présentées dans ce numéro de JoVE. Ces méthodes visualisées facilitent la reproduction et l'application des protocoles scientifiques.

Avril 2012: Ce mois-ci dans JoVE (Vidéo) | JoVE Journal

Aaron Kolski-Andreaco

Avril 2012: Ce mois-ci dans JoVE

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