L'administration intranasale d'Therapeutics SNC à des souris éveillées

L’objectif global de cette procédure est de cibler les médicaments sur le système nerveux central en utilisant l’administration intranasale chez des souris sans anesthésie. Ceci est accompli en acclimatant d’abord la souris à la manipulation. La deuxième étape consiste à utiliser une poignée modifiée pour immobiliser la tête de l’animal.

Ensuite, des gouttelettes de médicament sont administrées par voie intranasale à l’aide d’une pipette. Dans la dernière étape, la souris est renvoyée dans sa cage avec une récompense. Les principaux avantages de cette technique sont que l’administration intranasale cible les médicaments vers le système nerveux central sans exposition systémique, et que l’administration intranasale éveillée de médicaments permet un traitement chronique chez les souris sans anesthésie.

Cette méthode peut être utilisée pour aider à répondre à des questions clés dans le développement de médicaments pour le traitement des maladies neurologiques. Généralement, les personnes novices dans cette méthode auront du mal car il est difficile de tenir la bouche en toute sécurité pour empêcher le mouvement de la tête. La démonstration visuelle de cette méthode est essentielle car le placement des doigts pour une bonne prise est essentiel et difficile à expliquer par texte et photographies Deux à quatre semaines avant l’administration intranasale, acclimatez les souris à la manipulation en effectuant les étapes suivantes pendant deux à trois jours, chacune confirmant que la souris ne présente aucun signe de stress avant de passer à l’étape suivante.

Pour la première étape d’acclamation, placez la souris dans la paume de la main pendant une période de deux à trois minutes. Pas plus d’un pied au-dessus de la cage. Ensuite, placez la souris dans la paume de la main pendant trois minutes et caressez doucement l’animal de la tête à la queue, en lui permettant de se déplacer librement.

Une fois que l’animal tolère les caresses, placez la souris dans la paume de la main pendant trois minutes, puis utilisez le pouce et l’index pour pincer légèrement la peau à l’arrière du cou de l’animal. Pour l’étape d’acclimatation suivante, soulevez la souris par la peau du cou pendant 30 secondes. Laissez ensuite l’animal reposer sur le dessus de la cage pendant encore 30 secondes avant de répéter la prise.

Maintenant, pratiquez la prise intranasale en utilisant d’abord le pouce et l’index de la main dominante pour tenir la souris par la queue. Ensuite, utilisez le majeur, l’annulaire et l’auriculaire pour épingler légèrement la partie inférieure du corps de l’animal à la cage. Laissez la souris s’agripper aux barreaux en étirant légèrement l’animal pour mieux saisir la peau.

À l’aide du pouce et du majeur de la main non dominante, pincez fermement la souris au niveau de la peau derrière le cou et les épaules, en tirant vers le haut sur la peau lâche du haut du dos pour former une tente sur les omoplates. Placez ensuite rapidement l’index de la main non dominante sur la tête de la souris aussi près que possible du nez et tirez sur la peau. En même temps, faites glisser le pouce et le majeur vers la tête pour un positionnement optimal.

Idéalement, la souris ne doit pas être capable de bouger la tête verticalement ou horizontalement. Lors de la séance suivante, effectuez la prise intranasale comme nous venons de le démontrer. Cette fois, inversez l’animal de sorte que sa face ventrale soit face au plafond et que son cou soit parallèle au sol.

Une fois que la souris est à l’aise avec la prise intranasale inversée, entraînez-vous à placer brièvement une micro-pipette avec une pointe vide près de chaque narine. Enfin, administrez six microlitres de solution saline, d’abord à un seul nare, puis lors de la séance suivante aux deux en utilisant la procédure d’administration intranasale de médicament démontrée plus en détail dans la section suivante avant de commencer l’administration intranasale. Tout d’abord, disposez les cages et les instruments de dosage pour un accès facile.

Retirez ensuite la première souris de sa cage et utilisez la prise intranasale qui vient d’être démontrée pour ramasser l’animal. Ensuite, à l’aide de la main dominante, chargez la micropipette avec six microlitres de médicament. Placez l’extrémité de la pipette remplie près de la narine gauche de la souris à un angle de 45 degrés.

Ensuite, éjectez lentement le médicament pour former une petite gouttelette avec environ la moitié du volume dans la pointe, placez la gouttelette suffisamment près de la narine de la souris pour que la souris puisse l’inhaler immédiatement après que la souris ait inhalé la goutte, éjectez le reste du médicament dans la pointe de la pipette pour former une autre petite gouttelette que la souris peut inhaler par la même narine environ deux à trois secondes plus tard, Maintenez la souris dans cette position pendant 15 secondes, puis administrez le médicament à la narine droite de la même manière. Maintenant, replacez la souris sur le dessus de la cage pendant deux minutes, puis administrez à nouveau le médicament dans les deux narines, comme cela vient d’être démontré, exactement deux minutes après l’administration à la première narine pour administrer une ou deux souris à la fois. Ce schéma d’échantillonnage peut être suivi après que la souris a reçu la dose complète de médicament.

Remettez l’animal dans sa cage. Après chaque acclimatation ou séance de dosage intranasal, les souris doivent recevoir une friandise telle qu’un cheerio comme renforcement positif pour réduire le stress, toujours restaurer les nids à leur état d’origine avant de remettre les animaux dans leurs cages, changer de gants entre les cages lors du dosage des animaux hébergés par le groupe afin de ne pas transférer l’odeur d’une colonie de cage à l’autre, ce qui induirait un comportement agressif des partenaires en cage. Une fois maîtrisé, une personne peut administrer par voie intranasale du médicament à 15 à 20 souris en une heure tout en tentant cette procédure avec plus d’une souris à la fois.

Il est important de prendre des précautions pour éviter que les souris ne changent accidentellement de cage. Après avoir regardé cette vidéo, vous devriez avoir une bonne compréhension de la façon d’utiliser l’administration intranasale chez les souris sans anesthésie. Pour cibler les médicaments sur le système nerveux central.

N’oubliez pas de toujours prendre des précautions lorsque vous travaillez avec des souris, comme porter un masque N95 et des gants pour éviter l’exposition aux allergènes.