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DOI: 10.3791/50081-v
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Le protocole suivant fournit des techniques d'encapsulation du pancréas β-cellules à l'étape de croissance PEG-peptide hydrogels formés par thiol-ène photo-cliquez réactions. Cette plate-forme matérielle offre non seulement un micro-cytocompatible pour l'encapsulation de cellules, mais permet également contrôlé par l'utilisateur récupération rapide des structures cellulaires formés dans les hydrogels.
L’objectif général de cette procédure est de démontrer des techniques d’encapsulation de cellules dans des hydrogels photopolymérisés, ainsi que la récupération ultérieure du pH des cellules bêta naturellement formées à partir des hydrogels sensibles aux enzymes à partir de la caractérisation biologique. Ceci est accompli en mélangeant d’abord les six cellules bêta mins avec une cheville d’avant-bras, un macer de norbertine et un réticulant peptidique sensible aux enzymes. Les cellules sont ensuite encapsulées à l’aide de photopolymérisations médiées par les radicaux libres pour former un hydrogel.
La deuxième étape consiste à cultiver des cellules encapsulées dans des hydrogels dans un incubateur de dioxyde de carbone à 37 degrés Celsius. Une fois que les cellules ont proliféré pour former des agrégats, les hydrogels chargés de cellules sont rincés avec une solution tampon, puis incubés dans une solution de trypsine de. Sous une légère agitation pour l’érosion sur gel, les agrégats récupérés sont soigneusement lavés pour éliminer la solution enzymatique et le polymère érodé.
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