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DOI: 10.3791/50117-v
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Procédé pour mesurer la longueur de persistance ou la rigidité en flexion de biopolymères est décrit. La méthode utilise une kinésine axée sur les microtubules glisse test pour déterminer expérimentalement la longueur de persistance des microtubules individuels et est adaptable à l'actine des essais à base de glisse.
L’objectif global de cette procédure est d’utiliser un test de glissement pour mesurer la rigidité UAL des microtubules. Ceci est accompli en fixant d’abord spécifiquement la protéine motrice kinésine à une lame de microscope avec des domaines moteurs libres de lier les microtubules. La deuxième étape consiste à ajouter à l’échantillon des microtubules marqués par fluorescence, qui sont traduits par la kinésine.
Les vidéos suivantes de microtubules planants sont collectées à l’aide de la microscopie à fluorescence. La dernière étape consiste à analyser les vidéos de test de glissement pour calculer la rigidité en flexion des micro-tubules. En fin de compte, les tests de glissement sont utilisés pour déterminer la rigidité en flexion des microtubules uniques.
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