Isolement et enregistrements Chaîne Kv en cardiomyocytes murins auriculaire et ventriculaire

L’objectif global de cette procédure est d’extraire des cardiomyocytes auriculaires et ventriculaires vivants de souris génétiquement modifiées pour les utiliser dans l’enregistrement de patchs de cellules entières et d’autres expériences. Ceci est accompli en excisant d’abord soigneusement, mais rapidement, le cœur d’un animal anesthésié. La deuxième étape consiste à connecter le cœur excisé et canulé à l’appareil LOR.

Ensuite, le cœur est rétro fortement perfusé avec une solution de collagénase Pour desserrer le tissu de connexion, la dernière étape consiste à dissocier le tissu en le séparant doucement avec une pince fine et à suspendre les cellules avec une pointe de pipette en plastique poli au feu agrandie. Après cela, les cellules sont remises en suspension par étapes avec une solution riche en calcium. En fin de compte, la technique du patch clamp de cellule entière est utilisée pour montrer les différences de courants de canaux potassiques voltage-dépendants.