Système optimisé pour la surveillance de la perfusion cérébrale chez le rat des maladies du intraluminale occlusion de l'artère cérébrale moyenne

La surveillance de la perfusion cérébrale est très importante pour augmenter la précision et réduire la variabilité dans les modèles expérimentaux d’AVC. La technologie laser Doppler peut facilement détecter la perfusion microvasculaire cérébrale à travers le crâne intact des souris et des rats, en particulier si vous utilisez une sonde à pénétration profonde. Le problème clé ici est de trouver un système fiable pour fixer la sonde laser Doppler aux coordonnées crâniennes pendant l’intervention chirurgicale.

Dans cette vidéo, nous allons vous montrer notre système développé en interne. Nous pouvons être utilisés pour le suivi hémodynamique cérébral monosite et multi-sites. Le modèle de course à crémaillère montré dans cette vidéo est obtenu en insérant un filament interluminal dans l’artère carotide externe.

Le filament est ensuite avancé à travers l’artère carotide interne afin d’occlure l’origine de l’artère cétale moyenne, produisant une ischémie cérébrale focale transitoire. Pour plus de détails sur la procédure, veuillez consulter le lien ci-dessous. Les coordonnées crâniennes pour la surveillance multisite unique ont été choisies après des expériences préliminaires avec la perfusion d’encre de gélatine, qui ont clairement délimité la zone hyper perfusée lors de l’occlusion de l’artère à cellules moyennes pour la surveillance monosite.

La sonde laser Doppler est placée dans le territoire central alimenté par l’artère cérébrale moyenne pour un suivi multi-sites. La sonde laser Doppler deux est placée dans les limites périphériques sur le territoire entre l’artère centrale et l’artère cérébrale antérieure. Pour étudier le flux collatéral intercrânien, le positionnement des sondes laser Doppler peut être modifié en fonction des besoins expérimentaux de chaque chercheur.

Les matériaux nécessaires sont le caoutchouc naturel, les petits tubes en plastique et le stylet métallique. Le support de prope peut être personnalisé en fonction de la taille de l’animal, du nombre et de la taille des sondes laser Doppler et du territoire vasculaire de la zibeline, qui doit être surveillé. Marquez les positions des sondes et du monticule de frein.

Le caoutchouc naturel selon les coordonnées stéréotaxiques souhaitées pour l’occlusion de l’artère cérébrale moyenne, les coordonnées typiques pour le noyau ischémique sont attendues à Bgma moins un millimètre, cinq millimètres latéralement à la ligne médiane. Pour le territoire d’une zone de bordure ischémique périphérique, les coordonnées attendues peuvent être définies à bgma plus deux millimètres, deux millimètres latéraux à la ligne médiane. Marquez très clairement la position du bgma avec un X.C’est le point de repère pour fixer le support d’accessoire au crâne.

Insérez le stylet dans un petit tube en plastique. Sa taille doit correspondre à la taille de la sonde. Insérez le stylet dans le caoutchouc naturel à l’endroit où la sonde doit être positionnée.

Poussez le style dans le caoutchouc jusqu’à ce que le tube en plastique ait également été inséré dans le caoutchouc. Retirez le style si plusieurs sondes sont nécessaires. Répétez les mêmes étapes pour les autres positions de sonde afin de vous assurer que les sondes restent stables.

Ruban adhésif rapide autour des tubes en plastique, les supports à prope unique sont obtenus en suivant la même procédure avec un seul tube. La stérilisation chimique de plusieurs supports de prope pourrait être effectuée pour une utilisation future. Rasez doucement la tête du rat, appliquez du bêta dime sur un tampon de gaze et désinfectez la peau.

Le rat doit être placé en position de bal sur la table d’opération sous anesthésie au chlore ISO, administrer de la lidocaïne à 2 % cinq milligrammes par kilo par voie sous-cutanée dans la région crânienne. Faites une incision cutanée paramédiane droite pour l’occlusion de l’artère cérébrale droite et disséquez le tissu sous-cutané pour atteindre le fascia crânien. Faites une incision paramédiane droite dans le fascia crânien et effectuez une dissection contondante.

Pour atteindre l’os de compétence, préparez une zone de compétence suffisamment grande pour l’application du support de sonde. Veuillez noter qu’il n’est pas nécessaire de percer ou d’amincir les os, en appliquant du broman pour désinfecter et sécher la surface du crâne. Utilisez un sèche-cheveux réglé pour l’air froid afin d’accélérer le séchage de la surface du crâne.

À ce stade, les sutures crâniennes et le bgma sont clairement visibles. Personnalisez le support de sonde en coupant les bords avec des ciseaux stériles. Appliquez une petite quantité de colle chirurgicale cyanoacrylate approuvée par les vétérinaires sur la surface sous le porte-sonde, en évitant soigneusement l’ouverture inférieure des tubes en plastique.

Veuillez noter que s’il reste une quantité importante de colle entre la surface optique de la sonde et la compétence, cela peut produire un signal faible et endommager la sonde. Avec de multiples utilisations. Appliquez le support de sonde sur la surface de l’habileté en faisant soigneusement correspondre le BMA avec la mine terrestre S.

Appliquez une légère pression sur le support d’hélice. Utilisez un sèche-cheveux pour l’air froid afin d’accélérer le séchage de la colle chirurgicale. Fixez le support d’hélice en attachant un fil chirurgical autour du support d’hélice et de la tête de l’animal.

Attention à bien positionner le fil chirurgical sur la mandibule, en évitant la région sous-mandibulaire et le cou. Remplissez les tubes en plastique du support de sonde avec un gel optique. Par exemple, un gel à ultrasons courant.

Cela augmentera la qualité du signal laser Doppler. Placez les accessoires dans le support de sonde et vérifiez la lecture réelle du débitmètre laser Doppler. Fixez les sondes en les attachant autour de la tête de l’animal.

Attention à bien positionner le fil chirurgical sur la mandibule, en évitant la région sous-mandibulaire et le système multi-sites pour la perfusion CBR Le suivi est maintenant terminé Placez les rats en position d’alimentation en évitant soigneusement les forces de traction sur les sondes ou le support d’hélice. Commencer la surveillance de la profusion pendant l’intervention chirurgicale pour l’occlusion de l’artère cétale moyenne lorsque le filament endovasculaire atteint l’origine de l’artère cétale moyenne. Une baisse de la perfusion cérébrale est visible lors de la surveillance laser Doppler.

Si des sondes multifonctions sont utilisées, des changements différents dans la profusion cérébrale peuvent être observés en fonction de leur territoire artériel. Ces tracés de perfusion représentatifs montrent comment l’hémodynamique célébrale peut être étudiée à l’aide de sondes laser Doppler multisites. Un déficit de perfusion modeste se produit dans la sonde à deux canaux par rapport à la sonde à un canal lors de l’occlusion de l’artère carotide commune et de l’occlusion de l’artère cérébrale moyenne.

Ce modèle hémodynamique suggère des collatéraux intercrâniens fonctionnellement actifs dans des conditions ischémiques. Le volume de l’infarctus est calculé sur 19 sections coronales consécutives fixées en perfor, MAGA et colorées avec du pré-violet oh 0,1 % corrigées des asymétries interhémisphériques dues à l’œdème cérébral et exprimées en millimètres cubes. L’immuno-coloration des marqueurs moléculaires de la perte neuronale et de la pénombre ischémique tels que la protéine associée aux micro-tubaires deux et la protéine de choc thermique 70 peut être étudiée en relation avec le suivi hémodynamique multi-sites de la circulation intercrânienne.

Le système optimisé de surveillance de la perfusion vendable présenté dans cette vidéo pourrait fournir un moyen facile et efficace d’étudier les changements hémodynamiques vendables dans le domaine expérimental de l’AVC, conduisant au développement d’une nouvelle génération de thérapies collatérales célèbres. Merci de votre attention et bonne chance dans vos expériences.