Un modèle murin d'implantation d'une endoprothèse dans l'artère carotide pour l'étude de la resténose

L’objectif global de cette procédure est d’implanter un stent dans l’artère carotide de la souris qui permet d’étudier le remodelage des vaisseaux ou les effets de différents revêtements médicamenteux. Tout d’abord, le stent est préparé pour l’implantation en le transférant dans un tube en silicone. Ensuite, l’artère commune est isolée et des sutures sont mises en place pour interrompre la circulation sanguine.

L’endoprothèse est ensuite introduite par une petite incision sur l’artère carotide externe. Une fois en place, le tube de silicone et le fil de guidage sont retirés, laissant le stent dans l’artère carotide commune. En fin de compte, les échantillons sont colorés avec de la gemsa pour l’analyse de la formation de la plaque.

Modèle existant pour la resténose instantanée dans la misa difficile, ils nécessitent des compétences chirurgicales précises et des complications courantes et des divisions ou des paralysies. Le risque est de minimiser notre modèle en gardant le stent en vue tout au long de la procédure d’implantation démontrée. Une partie de cette procédure sera le Dr Simsek Imas postdoc de notre père de laboratoire.

Je démontrerai l’implantation de l’endoprothèse dans l’artère cartouche. Commencez par utiliser une pince pour transférer l’endoprothèse dans un tube en silicone de deux centimètres. En s’arrêtant à deux millimètres de l’extrémité avant, l’extrémité exposée du tube doit être coupée en diagonale pour faciliter l’implantation, humidifier le stent avant l’implantation pour faciliter l’insertion.

Ensuite, confirmez la profondeur appropriée de l’anesthésie chez une souris mâle adulte. Après avoir appliqué une pommade protectrice sur les yeux, rasez la région ventrale du cou. Ensuite, nettoyez le site avec des frottements répétés de bétadine et d’alcool au microscope stéréoscopique.

Utilisez des ciseaux pour faire une petite incision médiane sur la zone. Séparez la graisse et le tissu jusqu’à ce que l’artère carotide commune gauche soit isolée. Une fois visualisé, attachez une suture autour de l’artère commune, à environ un centimètre de la bifurcation.

Attachez deux sutures autour de l’artère carotide externe, en laissant le nœud distal lâche pour vieillir lors de l’implantation de l’endoprothèse. Ensuite, attachez une suture autour de l’artère carotide interne. Une fois les sutures fixées, faites une petite incision dans l’artère externe près du nœud proximal.

À l’aide d’un fil guide, introduisez le tube en silicone contenant le stent. Une fois en place, retirez le tube en silicone pour permettre à l’endoprothèse de se dilater. Ensuite, resserrez le nœud distal sur l’artère carotide externe et retirez les sutures sur l’artère carotide interne et commune pour rétablir la circulation sanguine.

Fermez l’incision avec des pinces de suture et placez l’animal sous une lampe chauffante. Jusqu’à ce qu’il soit complètement rétabli. La formation de la plaque motrice est examinée à différents moments après l’implantation de l’endoprothèse.

Tout d’abord, après l’euthanasie et la perfusion transcardique, isolez l’artère carotide gauche et retirez la partie contenant l’endoprothèse. Placez l’échantillon dans une solution à 4 % de PFA. Au moins 16 heures plus tard, intégrez l’échantillon dans du plastique comme indiqué ici.

Après avoir coupé des sections de 50 micromètres d’épaisseur avec un diamant, la scie à ruban a effectué le maintien de la gemme pour évaluer la formation de la plaque. L’imagerie par tomodensitométrie par micro-ordinateur effectuée une semaine après l’implantation de l’endoprothèse a montré que l’endoprothèse n’était pas disloquée par le flux sanguin. Aucune lésion vasculaire ou endothéliale n’a été observée dans les zones non tentées du vaisseau, comme le montre le bleu d’Odin et la coloration histologique CD 31 spécifique à l’endothélium est utilisée pour étudier l’étendue de la formation de plaques.

Ici, le stent est visible sous la forme de la fibrine tachée de noir à l’intérieur du néointima. Dans certains cas, une occlusion complète du vaisseau est observée. La réendothélialisation des entretoises de l’endoprothèse est représentée à gauche par la double flèche, tandis que la réendothélialisation luminale incomplète est indiquée à droite par une seule flèche.

Lors de cette procédure, il est important de se rappeler que la zone d’opération doit être constamment arrosée pour éviter le dessèchement et faciliter la manipulation de l’endoprothèse.