Enregistrement électrophysiologique simultané et imagerie calcique des neurones du noyau suprachiasmatique

L’objectif général de l’expérience suivante est d’examiner l’interaction entre les changements de tension ou de courant, tels que les changements d’action, la fréquence de décharge potentielle et la concentration intracellulaire de calcium dans les neurones du noyau supra-matique. Ceci est réalisé en préparant la tranche de cerveau pour l’enregistrement des neurones du noyau SMA à l’aide d’une micro-électrode remplie de la sonde sensible au calcium. Dans un deuxième temps, la micro-électrode est scellée avec la membrane neuronale.

Ensuite, la membrane neuronale scellée avec la micro-électrode est rompue pour introduire la sonde fluorescente calcique dans les neurones individuels et pour enregistrer avec la membrane les résultats de l’activité électrique sont obtenus qui montrent des mesures de tension ou de courant et des images de la fluorescence de la sonde calcique à deux longueurs d’onde L’altération du rapport de fluorescence à ces longueurs d’onde reflète le changement de calcium intracellulaire dans le neurone. Une analyse ultérieure peut être effectuée pour déterminer la concentration en calcium de la cellule. Le principal avantage de cette technique est que les changements dans l’activité électrique membranaire et le calcium intracellulaire produit par l’activation synaptique peuvent être mesurés simultanément dans les neurones individuels du noyau supra-cosmétique.