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DOI: 10.3791/50803-v
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Sérum utilisé dans les cultures d'embryons contient des composants inconnus qui peuvent affecter le résultat d'expériences en particulier dans les études portant sur les interactions de signalisation. Ici nous avons utilisé un système de culture oxygéné sans sérum et montrons que les embryons mi-gestation souris en culture pour 16-40 h présentent développement morphologique comparable à des embryons en développement in utero.
L’objectif global de cette procédure est d’utiliser un système de culture oxygénée sans sérum pour étudier et manipuler des aspects spécifiques du développement embryonnaire de souris. Ceci est accompli en isolant d’abord l’utérus avec des embryons de la souris mère. La deuxième étape consiste à séparer les embryons avec un sac vitellin intact de la décidue placentaire après dissection segmentaire de l’utérus.
Ensuite, les embryons doivent être doucement extériorisés du sac vitellin tout en maintenant l’intégrité du système vasculaire embryonnaire. La dernière étape consiste à cultiver les embryons dans un appareil de culture en bouteille roulante oxygénée sans sérum à 37 degrés Celsius pendant une durée déterminée. En fin de compte, l’ensemble de ce système de culture d’embryons, qui soutient le développement de différentes structures aux niveaux morphologique et moléculaire, peut être utilisé pour l’étude du développement d’embryons de souris à l’aide d’une variété de techniques.
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