Membrane-SPINE: un outil biochimique pour identifier les interactions protéine-protéine de protéines membranaires In Vivo

L’objectif global de cette procédure est d’identifier in vivo les interactions protéiques et protéiques des protéines membranaires par le biais d’une expérience d’interaction de protéines streptococciques membranaires ou d’une colonne vertébrale membranaire. Ceci est accompli par réticulation in vivo à l’aide de l’agent de réticulation réversible pour le formaldéhyde. La deuxième étape consiste à purifier la protéine d’appât membranaire marquée au streptoque avec les protéines de proie réticulées.

Ensuite, la réticulation est inversée par ébullition. La dernière étape est la séparation de la protéine d’appât membranaire et des protéines de proie co-purifiées par le sulfate de désalch, l’électrophorèse sur gel de poly acrylamide ou la page SDS. En fin de compte, l’analyse par immunotransfert et spectrométrie de masse est utilisée pour identifier les protéines de proie, ce qui permet d’analyser les interactions entre les protéines membranaires.