La réponse optocinétique comme une mesure quantitative de l'acuité visuelle chez le poisson zèbre

L’objectif global de cette procédure est de mesurer l’acuité visuelle chez les poissons-zèbres adultes à l’aide de la réponse optocinétique ou OKR. Ceci est accompli en construisant d’abord le dispositif OKR qui se compose d’un tambour rotatif et d’un appareil de capture de données. Ensuite, le poisson est immobilisé à l’intérieur de l’appareil et un OKR est déclenché.

Ensuite, les seuils d’acuité spatiale binoculaires et monoculaires sont déterminés à l’aide de gradations de différentes tailles et d’une approche d’escalier modifiée. Enfin, l’acuité visuelle est calculée pour le poisson. En fin de compte, on peut obtenir des résultats qui montrent des changements d’acuité visuelle au sein d’une population de poissons à mesure qu’ils vieillissent ou chez des poissons traités malades par le biais de la réponse optocinétique.

Le principal avantage de cette technique par rapport aux méthodes existantes, telles que la réponse automobile ou OMR, est que la mesure de l’acuité visuelle à l’aide de l’OKR est plus pertinente et plus fiable sur le plan clinique. Les études optocinétiques sont réalisées à l’aide d’un appareil d’enregistrement sur mesure à l’aide d’un tambour rotatif de 14,5 centimètres de diamètre, d’un stéréomicroscope avec des réglages d’intensité lumineuse réglables, d’un ordinateur et d’une caméra pour la capture d’images et l’enregistrement. Un microcontrôleur commandé par ordinateur est utilisé pour ajuster la vitesse de rotation du tambour et les directions de rotation à l’aide de poissons maintenus dans des conditions standard.

Commencez une analyse en anesthésiant un poisson dans 0,016 % trica pendant deux à trois minutes, puis en le plaçant sur une petite plate-forme avec les yeux et les branchies suspendus sur le bord pour maintenir le poisson immobilisé tout en évitant de blesser. Placez une éponge fine ou une serviette sur le corps du poisson et épinglez deux à trois morceaux de mousse sur le poisson en veillant à ce que le mouvement de la queue soit limité. Placez le poisson dans un réservoir cylindrique rempli d’eau qui s’insère dans le tambour rotatif de l’appareil d’enregistrement OKR.

Utilisez des aimants sur la plate-forme pour positionner le poisson à la verticale avec les yeux à environ 7,3 centimètres du bord du tambour. Une fois que le poisson se ranime de l’anesthésie et qu’une respiration normale et des mouvements oculaires aléatoires sont observés, placez une évaluation de base de 0,07 cycle par degré ou CPD dans le tambour rotatif et engagez les commandes de l’ordinateur pour commencer la rotation et la capture vidéo. Une fois qu’un OKR initial est provoqué par la notation de base, interrompez brièvement la rotation et remplacez la notation par une notation plus petite avec une fréquence spatiale plus élevée.

Répétez ce processus avec des notes séquentiellement plus petites jusqu’à ce qu’il ne soit plus possible d’obtenir un OKR. Pour vérifier la perte d’OKR suite à une approche en escalier modifiée, retestez avec la plus petite notation qui a provoqué un OKR, puis avec la notation qui n’a pas suscité de réponse. Vérifier la perte de l’OKR pour obtenir des mesures d’acuité monoculaire.

Placez un occlus en plastique noir sur les bandes adjacentes à l’œil opposé et répétez le processus de collecte de données. Passez ensuite à l’autre œil en repositionnant la mamelle et en prenant des mesures. Utilisez la bande de mesure de référence sous l’aquarium pour noter la distance de chaque œil par rapport à la bande afin de mesurer avec précision l’acuité visuelle et déterminer l’acuité visuelle.

Calculez la CPD à l’aide de la formule suivante où A est la distance entre le centre de la lentille et la classification, et H est la durée d’un cycle de la plus petite classification à laquelle l’OKR a été observé. Pour les mesures combinées de l’acuité visuelle, utilisez une valeur moyenne calculée à partir de l’œil gauche et de l’œil droit. La procédure démontrée dans cette vidéo peut déterminer l’acuité visuelle des poissons-zèbres de plusieurs âges.

La meilleure acuité spatiale binoculaire enregistrée était de 0,74 CPD, comme le montre ici. L’acuité binoculaire augmente généralement avec l’âge, mais se stabilise après l’âge de 12 mois environ, lorsque l’acuité visuelle a été mesurée chez des poissons sauvages de cinq mois par rapport à des poissons de type lrp appariés selon l’âge. Deux poissons bugeye celui du développement oculaire asymétrique.

Nous avons constaté que l’acuité du poisson deux bugeye LRP avait une acuité significativement réduite par rapport à l’acuité binoculaire. La sommation binoculaire est observée de la même manière que la vision humaine, comme le montre ce graphique. L’acuité binoculaire était généralement de 5 à 10 % supérieure à celle de la droite ou de la gauche, mesurée indépendamment pour certains poissons.

La différence était une amélioration de 25 %. Après avoir regardé cette vidéo, vous devriez avoir une bonne compréhension de la façon de déterminer l’acuité visuelle chez le poisson-zèbre adulte à l’aide de l’OKR.