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DOI: 10.3791/50861-v
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L'activité des neurones isolés à partir de souris adultes, âgées peut être étudiée en dissociant les neurones à partir de régions spécifiques du cerveau et en utilisant l'imagerie de colorant potentiel de membrane fluorescent. Par les réponses de test à des changements dans le glucose, cette technique peut être utilisée pour étudier la sensibilité au glucose des neurones hypothalamiques ventromédians adultes.
L’objectif global de cette procédure est d’évaluer la détection du glucose dans les neurones hypothalamiques médiaux ventraux ou VMH de souris plus âgées, en utilisant un colorant sensible au potentiel membranaire comme indice de l’activité neuronale. Ceci est accompli en effectuant d’abord une perfusion cardiaque pour évacuer le sang du cerveau d’une souris anesthésiée avant de retirer le cerveau. La deuxième étape consiste à créer des tranches de cerveau coronaires et à disséquer le VMH.
Ensuite, les neurones VMH sont dissociés et cultivés sur des lamelles. La dernière étape consiste à mesurer la fluorescence des neurones lorsque le glucose diminue en présence d’un colorant à potentiel membranaire. En fin de compte, chaque changement de fluorescence des neurones est utilisé pour quantifier la réponse de ce neurone inhibé par le glucose aux changements de glucose.
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