Reproductible paraplégie par l'aorte thoracique occlusion dans un modèle murin de la moelle épinière ischémie-reperfusion

L'objectif général de l'expérience suivante est d'étudier les effets de l'ischémie de la moelle épinière chez un modèle murin. Cela est réalisé en insérant d'abord une sonde de doppler laser au-dessus de l'artère fémorale. Ensuite, une sternotomie est pratiquée pour accéder à l'arc aortique et à l'artère subclavière gauche.

Ensuite, une dissection minutieuse de l'aorte et des artères sous-clavières est réalisée afin de réduire adéquatement le flux sanguin artériel vers la moelle épinière. Les résultats sont obtenus. Le cho, un déficit neurologique postopératoire, est évalué selon le score neurologique Baso chez la souris.

Le principal avantage de cette technique par rapport aux autres méthodes existantes, telles que la thoracotomie latérale, est que l'espace pleural n'est pas violé. Cette méthode peut aider à répondre à des questions concernant la physiopathologie de la moelle épinière, les lésions par ischémie-perfusion, et offrir des perspectives pour des interventions pharmacologiques. L'application de cette technique s'étend aux thérapies visant à prévenir la paraplégie suite à une ischémie de la moelle épinière.

Bien que cette méthode puisse fournir des informations sur la paraplégie, qui complique la chirurgie thoracique, elle peut également être appliquée à d'autres processus pathologiques provoquant une ischémie aiguë de la moelle épinière, tels qu'une hypotension ou une pathologie vasculaire. Généralement, les personnes novices dans cette technique éprouvent des difficultés lors de la dissection de l'arc aortique, car une extrême prudence est nécessaire pour éviter le décès, une hémorragie ou un pneumothorax. Nous avons donc d'abord envisagé cette technique après avoir rencontré plusieurs difficultés avec l'abord par thoracotomie latérale, largement décrit dans la littérature, mais associé à une mortalité plus élevée chez nos animaux.

La démonstration visuelle de cette méthode est essentielle, car une extrême prudence est nécessaire lors de la dissection médiastinale afin d'éviter une mortalité peropératoire. Après avoir anesthésié une souris conformément au protocole décrit, s'assurer qu'elle est suffisamment sédée et raser les poils situés au niveau du thorax médian et de la surface ventrale de l'extrémité inférieure gauche. Insérer ensuite une sonde rectale lubrifiée dans le rectum de la souris et la fixer en place sur le plateau de l'animal. Régler le lit chauffant afin d'obtenir une température rectale cible de 36,5 degrés Celsius.

Ensuite, réalisez une petite incision au-dessus de l'artère fémorale et disséquez la peau en la séparant du tissu sous-cutané. Puis, insérez une sonde laser Doppler au-dessus de l'artère fémorale. Ajustez la position de la sonde jusqu'à ce que le moniteur de perfusion enregistre une valeur supérieure à 800 unités de perfusion afin de procéder à la dissection de l'arc aortique et de l'artère subclavière.

Effectuez une incision cutanée de deux centimètres au-dessus de l'incisure sternale et disséquez délicatement la peau du tissu sous-cutané. Libérez la glande sous-maxillaire si un saignement survient. Utilisez un coton-tige pour appliquer une pression douce dans le plan avasculaire.

Séparez la glande sous-maxillaire par la ligne médiane à l'aide de forceps. Soulevez doucement le sternum et, avec des ciseaux, pratiquez soigneusement une sternotomie médiane d'un centimètre de longueur à travers la ligne médiane du sternum. Placez cinq sutures de rétraction de chaque côté au bord du sternum et écartez latéralement le sternum en fixant les sutures au plateau opératoire.

Ensuite, à l’aide d’une dissection émoussée, libérez les muscles sterno-thyroïdiens le long de la trachée. Puis utilisez des ciseaux pour diviser le muscle sterno-thyroïdien gauche afin d’améliorer l’exposition. Disséquez le thymus des tissus environnants.

Poursuivre la dissection émoussée jusqu'à la visualisation des gros vaisseaux. En prenant un soin extrême pour éviter d'entrer dans l'espace pleural, placer ensuite des pinces vasculaires sur l'arc aortique et sur l'artère subclavière gauche. Vérifier que le flux distal a été correctement interrompu, ce qui se manifestera par une réduction de plus de 90 % des unités de perfusion.

Poursuivre l’occlusion pendant quatre à huit minutes. Une fois le temps écoulé, retirer la pince vasculaire et vérifier l’hémostase avant de fermer la sternotomie et la peau. Commencer par retirer le point de rétraction situé du côté gauche de la souris.

Utilisez le bon point de suture de rétraction pour fermer la sternotomie et un point continu de cinq zéro pour fermer la peau. Laissez la souris se remettre dans une cage placée sur un tapis chauffant avant de la ramener dans une cage normale avec accès à de la nourriture et de l'eau. Surveillez-la pour détecter des signes de détresse respiratoire et, si nécessaire, euthanasiez-la conformément au protocole indiqué.

Enfin, utilisez l'échelle Baso pour la locomotion chez la souris afin de surveiller l'animal. Toutes les 12 heures, les souris ont subi une intervention factice ou une occlusion aortique pendant quatre à huit minutes. Après l'intervention, les animaux ont été évalués à l'aide du système de notation Baso pour la souris présenté ici.

Ce graphique montre que les souris ayant subi une chirurgie placebo n'ont présenté aucun déficit fonctionnel observable à aucun moment après l'opération. Les souris soumises à une ischémie modérée présentaient une fonction quasi normale des membres postérieurs à 12 heures, suivie d'une détérioration fonctionnelle progressive menant à une paralysie complète à 48 heures. Les souris du groupe ischémie prolongée ont quant à elles présenté une paralysie complète juste après la chirurgie, sans aucune récupération fonctionnelle.

Après avoir visionné cette vidéo, vous devriez bien comprendre comment disséquer en toute sécurité l'arc aortique et réduire de manière adéquate le débit sanguin artériel de la moelle épinière.