Reproductible paraplégie par l'aorte thoracique occlusion dans un modèle murin de la moelle épinière ischémie-reperfusion

L'objectif général de l'expérience suivante est d'étudier les effets de l'ischémie de la moelle épinière dans un modèle murin. Cela est réalisé en insérant d'abord une sonde laser Doppler sur l'artère fémorale. Ensuite, la sternotomie est réalisée pour accéder à l'arc aortique et à l'artère sous-clavière gauche.

Ensuite, une dissection soigneuse de l'aorte et des artères sous-clavières est effectuée afin de réduire adéquatement le flux sanguin artériel vers la moelle épinière. Des résultats sont obtenus. Le cho, un déficit neurologique postopératoire, qui est basé sur le score de la souris Baso.

Le principal avantage de cette technique par rapport à d'autres méthodes existantes, telles que la thoracotomie latérale, est que l'espace pleural n'est pas violé. Cette méthode peut aider à répondre aux questions sur la physiopathologie ou la perfusion lésionnelle de la moelle épinière et fournir des potentiels pour des interventions pharmacologiques. L'implication de cette technique s'étend aux thérapies visant à prévenir la paraplégie suite à une ischémie de la moelle épinière.

Bien que cette méthode puisse fournir un aperçu de la paraplégie, qui complique la chirurgie thoracique, elle peut également être appliquée à d'autres processus pathologiques causant une ischémie aiguë de la moelle épinière, tels que l'hypotension ou la pathologie vasculaire. En général, les personnes novices dans cette technique auront du mal avec la dissection de l'arc aortique car un soin extrême est nécessaire pour éviter la mort, l'hémorragie ou le pneumothorax. Nous avons donc d'abord pensé à cette technique après avoir rencontré plusieurs difficultés avec l'approche de thoracotomie latérale, largement publiée dans la littérature, mais associée à une mortalité plus élevée chez nos animaux.

La démonstration visuelle de cette méthode est cruciale car une prudence extrême est nécessaire pendant la dissection médiastinale pour prévenir la mortalité peropératoire. Après avoir anesthésié une souris selon le protocole du texte, en s'assurant qu'elle est suffisamment sédée et en enlevant les poils de la ligne médiane du thorax et de la surface ventrale de l'extrémité inférieure gauche, insérez une sonde rectale lubrifiée dans le rectum de la souris et fixez-la en place sur le plateau opératoire. Ajustez le plateau chauffant pour atteindre une température rectale cible de 36,5 degrés Celsius.

Ensuite, faites une petite incision sur l'artère fémorale et disséquez la peau du tissu sous-cutané. Insérez ensuite une sonde laser Doppler sur l'artère fémorale. Ajustez les positions de la sonde jusqu'à ce que le moniteur de perfusion enregistre plus de 800 unités de perfusion pour effectuer la dissection de l'arc aortique et de l'artère sous-clavière.

Faites une incision cutanée de deux centimètres au-dessus de l'incisure sternale et disséquez doucement la peau du tissu sous-cutané. Disséquez la glande sous-maxillaire si un saignement se produit. Utilisez un tampon de coton pour appliquer une pression douce dans le plan avasculaire.

Divisez la glande sous-maxillaire par le milieu à l'aide d'une pince. Soulevez doucement le sternum et avec des ciseaux, faites soigneusement une sternotomie médiane d'un centimètre au milieu du sternum. Placez cinq sutures de rétraction de chaque côté au bord du sternum et rétractez le sternum latéralement en fixant les sutures au plateau opératoire.

Ensuite, en utilisant une dissection en douceur, libérez les muscles squelettiques le long de la trachée. Utilisez ensuite des ciseaux pour diviser le muscle squelettique gauche pour améliorer l'exposition. Disséquez le thymus du tissu environnant.

Continuez la dissection en douceur jusqu'à ce que les grands vaisseaux soient visualisés. En faisant très attention à ne pas entrer dans l'espace pleural, placez ensuite des pinces vasculaires sur l'arc aortique et l'artère sous-clavière gauche. Vérifiez que le flux distal a été correctement interrompu, ce qui se manifestera par une réduction de plus de 90% des unités de perfusion.

Continuez l'occlusion pendant quatre à huit minutes. Lorsque le temps est écoulé, retirez la pince vasculaire et vérifiez l'hémostase pour fermer la sternotomie et la peau. Commencez par retirer la suture de rétraction sur le côté gauche de la souris.

Utilisez la suture de rétraction droite pour fermer la sternotomie et utilisez une couture courante de cinq oh pour fermer la peau. Laissez la souris récupérer dans une cage placée sur un coussin chauffant avant de la remettre dans une cage normale avec accès à la nourriture et à l'eau. Surveillez-la pour détecter des signes de détresse respiratoire et, si nécessaire, pratiquez l'euthanasie conformément au protocole du texte.

Enfin, utilisez l'échelle de souris Baso pour la locomotion afin de surveiller l'animal. À des intervalles de 12 heures, les souris ont subi une chirurgie simulée ou une occlusion aortique pendant quatre à huit minutes. Et postopératoirement, les animaux ont été évalués selon le système de notation de la souris Baso présenté ici.

Ce graphique illustre que les souris ayant subi une chirurgie simulée n'ont présenté aucun déficit fonctionnel observable à aucun moment. Postopératoirement. Les souris soumises à une ischémie modérée présentaient une fonction des membres postérieurs quasi normale à 12 heures avec une diminution fonctionnelle progressive jusqu'à une paralysie complète à 48 heures. Et les souris du groupe à ischémie prolongée présentaient une paralysie complète après la chirurgie sans aucune fonction récupérable.

Après avoir regardé cette vidéo, vous devriez avoir une bonne compréhension de la façon de disséquer en toute sécurité l'arc aortique et de réduire adéquatement le flux sanguin artériel de la moelle épinière.