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Analyse des défauts musculaires squelettiques chez les larves de poisson-zèbre par biréfringence ...
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Analysis of Skeletal Muscle Defects in Larval Zebrafish by Birefringence and Touch-evoke Escape Response Assays

Analyse des défauts musculaires squelettiques chez les larves de poisson-zèbre par biréfringence et tests de réponse d’échappement par évocation tactile

Full Text
8,459 Views
08:01 min
December 13, 2013

DOI: 10.3791/50925-v

Laura L. Smith1, Alan H. Beggs1, Vandana A. Gupta1

1Division of Genetics and Genomics, Manton Center for Orphan Disease Research,Boston Children's Hospital, Harvard Medical School

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Le poisson-zèbre est maintenant un outil établi et puissant pour modéliser les dystrophies musculaires, les myopathies congénitales et les maladies neuromusculaires associées. La biréfringence et le comportement d’évasion évoqué par le toucher sont deux tests non invasifs courants utilisés pour déterminer le degré de désorganisation musculaire et de déficience locomotrice des embryons de poisson-zèbre au cours du développement précoce.

L’objectif général de cette procédure est d’évaluer l’étendue de l’organisation myofibrillaire chez les larves de poisson-zèbre translucides et de quantifier leur distance de nage en réponse à la stimulation tactile pour les deux méthodes. Ceci est accompli d’abord en accouplant le poisson zèbre, puis en collectant des œufs viables dans la deuxième étape du test d’évaluation de la structure musculaire. Un embryon de poisson-zèbre anesthésié enrobé est positionné directement entre deux lentilles polarisées sur une platine de stéréomicroscope de sorte que le poisson soit orienté le long de l’axe latéral de son corps et soit dans une orientation aussi plate que possible.

La biréfringence est alors visualisée et l’intégrité musculaire est quantifiée. Dans la deuxième étape de l’essai d’évasion par le toucher, une seule larve enrobée est placée dans une boîte de Pétri profonde, puis centrée dans le champ de vision du stéréomicroscope. Un stimulus ménosensoriel est délivré aux larves en touchant la queue avec une épingle à insecte, et la réaction de l’animal est immagée jusqu’à ce que l’embryon cesse de nager ou nage hors du champ de vision.

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Mots-clés : Biréfringence réponse d’évasion par le toucher anomalies musculaires squelettiques poisson zèbre dystrophie musculaire myopathie congénitale assemblage sarcomérique dégénérescence des myofibres régénération myopathique in vivo modèle de vertébré

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