Name: Un appareil simple pour Stimulatory Evoquant point comme stimuli tactiles: un projecteur pour LFP à Spike Transitions (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-03-25T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 34 s
Description: Découvrez un dispositif de stimulation sensorielle personnalisé pour stimulations mécaniques précises. Cette méthode permet d'étudier les réponses neuronales dans le cortex somatosensoriel et la transition entre potentiels de champ local et décharges.

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Déclaration éthique Pour étudier comment les stimuli sensoriels sont représentés par l&#39;activité neuronale, il n&#39;existe pas d&#39;alternative à l&#39;utilisation des animaux et l&#39;utilisation d&#39;une approche in vivo. Tous les animaux ont été traités selon les lois italiennes et européennes sur le traitement des animaux dans la recherche scientifique (Comité de bioéthique italien, le décret-loi sur le traitement des animaux dans la recherche 27 Jan 1992, n ° 116). Le Conseil national de recherches, où les expériences ont été réalisées, adhère au Comité international sur la science des animaux (ICLAS) au nom de la organismes culturels des Nations Unies pour l&#39;éducation, la science et la culture (UNESCO), le Conseil des organisations internationales des sciences médicales (CIOMS ) et l&#39;Union internationale des sciences biologiques (UISB). Par conséquent, aucune approbation spécifique au protocole a été nécessaire. L&#39;approbation du Ministère de la Santé est classé comme &quot;Biella 1, 3/2011&quot; dans les fichiers de la Commission d&#39;éthique de laUniversité de Milan. Une. Préparation des animaux expérimentaux <ol><li> Sélectionnez les rats mâles d&#39;environ 300-400 g en taille. </li><li> Anesthésier les rats pour la préparation expérimentale. <ol><li> Injecter par voie intrapéritonéale d&#39;une solution barbiturique (pentobarbital, 50 mg / kg pour l&#39;induction, 10 mg / kg pour la maintenance). </li><li> Vérifiez le niveau d&#39;anesthésie par seuil bas et seuil haut stimuli mécaniques sur une patte veiller à ce qu&#39;aucun retrait réflexe se produit. </li><li> Préparer la peau du crâne par le rasage de la voûte crânienne précision et ensuite faire une incision pour exposer la surface du crâne. </li><li> Cathétériser la trachée, en une canule trachéale (de diamètre intérieur de 2 mm et de diamètre extérieur de 2,5 mm) le fixant par ligature chirurgicale autour de la trachée-artère elle-même. </li><li> Latéralement au segment d&#39;exposer la trachée et la veine jugulaire cathétériser elle l&#39;insertion d&#39;une canule (PE10) reliée à une seringue de fixation par ligature chirurgicale autour de la cuve. </li></ol></li><li> Montez le rat sur un appareil stéréotaxique. <ol><li> Fixer le corps de rat et le placer dans une position couchée. </li><li> Fixez la tête par des barres de l&#39;oreille et de bloquer le museau. Mettre une ou deux gouttes d&#39;anesthésique local (lidocaïne) dans l&#39;oreille du rat avant de placer les barres de l&#39;oreille. </li></ol></li><li> Réguler la température de la plaquette stéréotaxique par un coussin chauffant commandé électroniquement, en maintenant la température à 37,5 ° C. </li><li> Connectez le tube trachéal à l&#39;appareil d&#39;anesthésie respiratoire. <ol><li> Réglez l&#39;appareil d&#39;anesthésie respiratoire à 1 coup / s fournissant isoflurane (2,5% 0,4-0,8 L / min) et O 2 (0,15-0,2 L / min). </li></ol></li><li> Nettoyez soigneusement la voûte crânienne par un antiseptique topique de povidone-iode. </li><li> Prenez un scalpel stérile et couper longitudinalement sur la ligne médiane de la base du museau à l&#39;angle de l&#39;os occipital. <ol><li> Diverger les frontières de la plaie par un écarteur et les fixer par deux petites pinces cocker appliqué to les frontières de la plaie. </li><li> Identifier le périoste en pointant une lumière sur une voûte crânienne observant la surface translucide. Grattez soigneusement la voûte osseuse enlever le périoste et l&#39;exposition de la surface de l&#39;os. </li><li> Fournir l&#39;hémostase avec un coton-tige ou d&#39;une éponge chirurgicale sur la surface de l&#39;os si hémorragies focales apparaissent sur l&#39;os. </li></ol></li><li> Avec un stylo à pointe fine, identifier le point bregma stéréotaxique au point des suturas sagittal et coronal croix. <ol><li> Sous la commande du microscope chirurgical, identifier la zone stéréotaxique (S1HL) recouvrant le cortex somatosensoriel controlatérale à la patte postérieure utilisé pour l&#39;expérience (bregma, AP -0,5 à 1,2 mm, LL -2,3 à 2,5 mm). </li></ol></li><li> Avec un stylo à pointe fine dessiner le périmètre carré délimitant le trou à percer. <ol><li> Percez un trou de 9 mm 2 sur le carré bleu précédemment identifié enlever des carreaux d&#39;os. </li><li> Nettoyez et absorber saignements osseux potentiels. </li&gt; <li> Retirez délicatement la dure-mère et couvrir la surface corticale avec une éponge imbibée chirurgicale dans le liquide céphalorachidien artificiel maintenu à 37,5 ° C. </li></ol></li><li> Fixer la matrice d&#39;électrodes à un support relié à un micromanipulateur électronique. <ol><li> Connectez la tête de la matrice au préamplificateur par un microconnecteur. </li><li> Conduire manuellement la matrice d&#39;électrodes (sous le contrôle du microscope chirurgical) jusqu&#39;à la surface corticale (sans le toucher). </li><li> Allumez les amplificateurs avec signal sonore. </li><li> Conduire, par la commande électronique, la matrice d&#39;électrodes de toucher la surface corticale jusqu&#39;à ce que le contact est atteint, signalée par un bruit changement son clair. </li><li> Tirer vers le bas la matrice d&#39;électrodes par des étapes de contrôle électronique (2 um / étape) jusqu&#39;à une profondeur de 350 à 400 um est atteint (couche corticale IV). </li><li> Vérifiez la réactivité des neurones par touches légères sur la patte postérieure controlatérale. </li><li>Ajustez la profondeur de quelques autres mesures jusqu&#39;à ce qu&#39;une réponse claire de dopage est observée. </li><li> Paralyser le rat par thriethiodide de Gallamine intraveineuse (20 mg / kg / h). Utilisez doses réfractées à travers l&#39;expérience de maintenir des niveaux de curarisation (0,2 ml / 1 hr). </li></ol></li></ol> 2. Traitement du signal <ol><li> Régler le filtre passe-bande de logiciel à [0,1 6000] Hz. <ol><li> Enregistrer les signaux neuronaux de la 8 canaux matrice de microélectrodes échantillonné à 32 kHz. </li></ol></li><li> Après la fin de l&#39;acquisition, exporter les signaux enregistrés dans un format binaire approprié pour le post-traitement. <ol><li> Effectuez la procédure de pic de tri à l&#39;aide de la boîte à outils Wave_clus 11. </li></ol></li></ol> 3. Fabrication et configuration de l&#39;appareil de stimulation <ol><li> Monter une tige de cactus (avec la pointe émoussée) perpendiculairement à la surface d&#39;un milieu de gamme haut-parleur collage la base de la tige au bouchon. </li><li> Programme uneun microcontrôleur pour fournir des impulsions de tension à un circuit d&#39;attaque pour le haut-parleur. <ol><li> Programmer le microcontrôleur pour fournir deux impulsions paires de courant à chaque seconde (voir figure 1C). </li></ol></li><li> Assemblez le haut-parleur et le micro à l&#39;aide d&#39;un L293D h-pont avec des composants passifs de base (voir la figure 1A). </li><li> Connectez le microcontrôleur à une batterie de 12 V rechargeable. </li></ol> 4. Protocole de stimulation <ol><li> Collez la face dorsale de l&#39;arrière-patte à un cadre solide, exposant la surface palmaire et d&#39;éviter les torsions articulaires. </li><li> Placez l&#39;extrémité du dispositif de stimulation sur la position des membres / patte souhaitée. </li><li> Allumez l&#39;appareil de stimulation. </li></ol> Étapes hors ligne: 5. Évaluation des réponses transitoire <ol><li> Pour chaque neurone enregistré, calculer l&#39;information mutuelle de Shannon (MI) du stimulus évoqué l&#39;activité de dopage (stimulus catégorie est soit 1, stimulus, ou 0, aucun stimulus). <ol><li> Estimer la probabilité de réponse conditionnelle p (r | s) où s représente la catégorie de stimulus et r représente le nombre de pics émis à l&#39;intérieur d&#39;une fenêtre de temps fixe. </li><li> Corriger l&#39;estimation MI en utilisant la procédure de brassage décrit 9. </li></ol></li></ol> 6. Évaluation des réponses LFP <ol><li> Filtrage du signal enregistré dans la plage de fréquences [0,1 100] Hz afin d&#39;obtenir le signal LFP </li><li> Calculer LFPSNR, une mesure de la LFP réactivité, comme expliqué dans la référence 10. </li></ol> 7. Estimation du modèle <ol><li> Générer un modèle de la forme <img alt="" fo:content-width="2in" height="24" src="/files/ftp_upload/50941/50941eq1.jpg" width="155" /> où les arguments x représentent les trois caractéristiques différentes LFP (x 1 la LFP se, &lt;<html> em&gt; x 2 et x son dérivé 3 la phase de Hilbert de son dérivé) et F est exprimée comme suit <img alt="" fo:content-width="2in" height="57" src="/files/ftp_upload/50941/50941eq2.jpg" width="187" /> les coefficients g sont des poids d&#39;une combinaison linéaire et f est un opérateur qui prend soit la valeur absolue, de la puissance ou de la valeur d&#39;origine de chaque x i. </li><li> Utilisez l&#39;algorithme NSGAII pour estimer les paramètres du modèle et les opérateurs en utilisant les trois objets suivants: i) un local, base essai à essai, mesure de l&#39;ajustement <img alt="" fo:content-width="2in" height="40" src="/files/ftp_upload/50941/50941eq3.jpg" width="149" /> , Où N et N sp r représentent respectivement les pointes ensemble comptent et la longueur du vecteur de réponse, ii) une mesure globale de l&#39;ajustement sur ​​la base de la moyenne des réponsesad/50941/50941eq4.jpg &quot;width =&quot; 205 &quot;/&gt; où N resp représente la longueur de la réponse moyenne; iii) une mesure de la complexité du modèle (voir aussi) 10 <img alt="" fo:content-width="2in" height="23" src="/files/ftp_upload/50941/50941eq5.jpg" width="161" /> . </li></ol> 8. Confirmation histologique <ol><li> Sacrifiez le rat. <ol><li> A la fin des enregistrements expérimentaux, mettre l&#39;animal sous anesthésie profonde gazeuse (isoflurane 2%, 4 L / min) et injecter par voie intraveineuse une surdose de barbituriques (&gt; 50 mg / kg, le pentobarbital). </li><li> Attendez l&#39;arrêt cardiaque. </li><li> Démontez le rat de l&#39;appareil de stéréotaxie </li></ol></li><li> Perfusion. <ol><li> Placer le rat s&#39;étendant au-dessus d&#39;une grille sur un bassin pour collecter le sang et les fluides à partir de la perfusion. </li><li> Ouvrez le thorax en disséquant le sternum séparant des insertions des côtes. </li><li> Bloquer le processus xiphoïde du sternum avec une pince de cocker et cr renversementanially le sternum et les côtes divaricate sur le cœur. </li><li> Identifier le ventricule gauche et l&#39;oreillette droite, placer une aiguille à pointe neuf de calibre émoussé (relié à la canule de perfusion) dans le ventricule et ouvrir avec des ciseaux fins chirurgicales de l&#39;oreillette droite. </li><li> Commencer la perfusion de froid (4 ° C) une solution physiologique hépariné (250 ml), suivi par la perfusion d&#39;une solution de formaline à 4% (250 ml). </li></ol></li><li> Extraire le cerveau du crâne par l&#39;ouverture de la voûte du crâne avec une pince appropriés et placer le cerveau dans une solution de formol à 10%. </li><li> Après une semaine, la préparation des coupes histologiques par un microtome (10 um d&#39;épaisseur d&#39;). </li><li> Colorer les sections cerveau frontal et sagittal avec une solution de crésyl violet. </li></ol>

<ol><li>Pesaran, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Uncovering+the+Mysterious+Origins+of+Local+Field+Potentials%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Uncovering the Mysterious Origins of Local Field Potentials.</a> Neuron. 61 (1-2), (2009).</li>
<li>Delmas, P., Hao, J., Rodat-Despoix, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+Mechanisms+of+Mechanotrasduction+in+Mammalian+Sensory+Neurons%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Rev.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Molecular Mechanisms of Mechanotrasduction in Mammalian Sensory Neurons.</a> Nat. Rev. Neurosci. 12, 139-153 (2011).</li>
<li>Rasch, M. J., Gretton, A., Murayama, Y., Maass, W., Logothetis, N. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inferring+spike+trains+from+local+field+potentials%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurophys%22%5BJournal%5D)">Inferring spike trains from local field potentials.</a> J. Neurophys. 99 (3), 1461-1476 (2008).</li>
<li>Galindo-Leon, E. E., Liu, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Predicting+stimulus-locked+single+unit+spiking+from+cortical+local+field+potentials%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Comput.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Predicting stimulus-locked single unit spiking from cortical local field potentials.</a> J. Comput. Neurosci. 29 (3), 581-597 (2010).</li>
<li>Theunissen, F. E., David, S. V., Singh, N. C., Hsu, A., Vinje, W. E., Gallant, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Estimating+spatio-temporal+receptive+fields+of+auditory+and+visual+neurons+from+their+responses+to+natural+stimuli%5BTitle%5D)+AND+%22Network%22%5BJournal%5D)">Estimating spatio-temporal receptive fields of auditory and visual neurons from their responses to natural stimuli.</a> Network. 12 (3), 289 (2001).</li>
<li>Victor, J. D., Purpura, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metric-space+analysis+of+spike+trains%3A+theory%2C+algorithms%2C+and+application%5BTitle%5D)+AND+%22Network%22%5BJournal%5D)">Metric-space analysis of spike trains: theory, algorithms, and application.</a> Network. 8, 127-164 (1997).</li>
<li>Foffani, G., Chapin, J. K., Moxon, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Computational+Role+of+Large+Receptive+Fields+in+the+Primary+Somatosensory+Cortex%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurophysiol%22%5BJournal%5D)">Computational Role of Large Receptive Fields in the Primary Somatosensory Cortex.</a> J. Neurophysiol. 100 (1), 268-280 (2008).</li>
<li>Microcontroller website. , Duemilanove, Italy. Available: 
 
 <a target="_blank" href="http://arduino.cc">http://arduino.cc</a> (2014).</li>
<li>Panzeri, S., Senatore, R., Montemurro, M. A., Petersen, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Correcting+for+the+sampling+bias+problem+in+spike+train+information+measures%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurophysiol%22%5BJournal%5D)">Correcting for the sampling bias problem in spike train information measures.</a> J. Neurophysiol. 98, 1064-1072 (2007).</li>
<li>Storchi, R., Zippo, A. G., Caramenti, G. C., Valente, M., Biella, G. E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Predicting+Spike+Occurrence+and+Neuronal+Responsiveness+from+LFPs+in+Primary+Somatosensory+Cortex%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Predicting Spike Occurrence and Neuronal Responsiveness from LFPs in Primary Somatosensory Cortex.</a> PLoS ONE. 7 (5), (2012).</li>
<li>Quiroga, R. Q., Nadasdy, Z., Ben-Shaul, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Unsupervised+Spike+Detection+and+Sorting+with+Wavelets+and+Superparamagnetic+Clustering%5BTitle%5D)+AND+%22Neural+Comput%22%5BJournal%5D)">Unsupervised Spike Detection and Sorting with Wavelets and Superparamagnetic Clustering.</a> Neural Comput. 16, 1661-1687 (2004).</li>
<li>Deb, K., Agrawal, A., Pratab, A., Meyarivan, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+fast+elitist+non-dominated+sorting+genetic+algorithm+for+multi-objective+optimization%3A+NSGA-II+IEEE%5BTitle%5D)+AND+%22Trans.+Evol.+Comput%22%5BJournal%5D)">A fast elitist non-dominated sorting genetic algorithm for multi-objective optimization: NSGA-II IEEE.</a> Trans. Evol. Comput. 6 (2), 181-197 (2000).</li>
</ol>

Les auteurs déclarent aucun intérêt financier concurrents.

Ce travail d&#39;abord présenté une nouvelle, simple et à faible coût dispositif permettant de fournir des stimuli sensoriels ponctuelles rapides et dans l&#39;espace. Ensuite, une impulsion appariée protocole de stimulation aléatoire et un ensemble d&#39;analyses informatiques ont été validés. L&#39;objectif général était d&#39;établir un cadre pour l&#39;estimation des relations LFP-pic dans les enregistrements électrophysiologiques pendant la stimulation tactile. Le dispositif, le protoco...

Dans le contexte du traitement de signal de la réponse impulsionnelle fournit une caractérisation fondamentale du comportement d&#39;un système dynamique. Bien que le stimulus impulsion idéale n&#39;est pratiquement pas réalisable, il est possible d&#39;obtenir une approximation raisonnable de celle-ci à l&#39;aide d&#39;un élément d&#39;actionnement qui génère des déplacements à haute fréquence. Ce type de stimulation tactile vibratoire lumière est connu pour cibler à la fois la peau en profondeur (par exemple, de répondre rapidement, l&#39;adaptation rapide corpuscules de Pacini) 2 et les récepteurs superficiels (par exemple bas-seuil adaptation lente structures discoïdes Merkel) 2. Dispositifs de stimulation actuels, les actionneurs piézoélectriques, principalement sont facturés avec un certain nombre d&#39;inconvénients, pas moins de résonances et de petits déplacements. Pour remédier à ces défauts, une alternative mise en œuvre de la stimulation par impulsions, est proposé en utilisant une pointe émoussée (une pointe de cactus lissée dans notre cas) à la verticalemonté sur le centre de la membrane d&#39;un haut-parleur conique de milieu de gamme. Ceci offre l&#39;avantage de déplacements plus grands et plus large spectre de fréquences. Une application efficace d&#39;un tel dispositif était l&#39;étude du problème neurophysiologique pertinente de la LFP à pointes dépendance. En raison de l&#39;association temporelle subtil entre ces événements électriques d&#39;un dispositif finement régulé est nécessaire pour fournir des stimuli périphériques. Les stimuli ont dû être aussi rapide et spatialement sélective que possible afin de réduire le &quot;bruit de fond&quot; et aiguiser les signaux d&#39;intérêt. A cette fin, le dispositif de stimulation et le protocole de livraison de stimulation ont été optimisées conjointement pour la tâche. Dans cet article, nous décrivons la technique et présentons quelques résultats représentatifs. Un protocole de stimulation sur la base des impulsions appariées randomisés a été conçu et optimisé pour éviter l&#39;accoutumance. Ce protocole offre l&#39;avantage de paire classiqueed impulsions et réduit la possibilité de blocage parasite entre les stimuli et des éclats périodiques spontanées de l&#39;activité neuronale. En utilisant cette étude randomisée impulsion jumelé il a été possible d&#39;obtenir des réponses de la LFP et pointes rapides et fiables et à capturer la particularité de ces réponses liées à la dépendance des deux LFP et des pointes sur l&#39;histoire de la stimulation. En effet, à partir des réponses premières LFP, un ensemble de trois LFP dispose (la LFP elle-même, la LFP dérivée première et la phase de la première dérivée) fortement en corrélation avec la réponse moyenne de pointe, a également été extrait. Peu de méthodes ont été proposées pour s&#39;adapter à des modèles qui permettent de prévoir les pics de 3,4 LFP. En général, un point critique du processus d&#39;ajustement de modèle, commune également à la prévision de l&#39;événement de pointe à partir du signal de relance, est constitué par le choix approprié de la fonction objectif à maximiser / minimiser. Alors que toute une gamme de fonctions objectif a été de proposerd (par exemple, la corrélation et la cohérence) 5 aucune de ces capture conjointement toute la complexité des réponses à pointes. Par conséquent, un cadre roman basé sur l&#39;optimisation multi-objectif est en place. Nous montrons que l&#39;utilisation de la proposition élaborée et ce cadre de calcul, il est possible d&#39;estimer un ensemble de modèles de prévision basé sur une forte LFP à pic relations.

<table><tbody><tr><td>Microstepper</td><td>AB Transvertex (Stockholm, Suède)</td><td></td><td>Le microstepper utilisé pour abaisser la matrice d’électrodes</td></tr><tr><td>32 canaux Cheetah System</td><td>Neuralynx (MT, USA)</td><td></td><td>Le système d’enregistrement électrophysiologique</td></tr><tr><td>L293D h-bridge</td><td>RS Components (Cinisello Balsamo, Italie)</td><td></td><td>Le pont utilisé pour connecter le microcontrôleur au haut-parleur</td></tr><tr><td>H21A3 Optical Interrupter Switch</td><td>Fairchild Semiconductor Corporation (San Jose, Californie)</td><td></td><td>Le phototransistor utilisé pour établir le déplacement de la pointe</td></tr><tr><td>Arduino Uno</td><td>Arduino (Duemilanove, Italie)</td><td></td><td>Le microcontrôleur utilisé pour fournir une impulsion de courant au haut-parleur</td></tr><tr><td>Matrices de microélectrodes GB1</td><td>FHC</td><td></td><td>&nbsp ;</td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Rhodia Organique Fine Ltd.</td><td></td><td>L’anesthésique utilisé pour préparer les animaux</td></tr><tr><td>Appareil stéréotaxique</td><td>Narishighe (Tokyo, Japon)</td><td></td><td>&nbsp ;</td></tr><tr><td>Rats mâles Sprague-Dawley</td><td>Charles River (Calco, LC, Italie)</td><td></td><td>&nbsp ;</td></tr><tr><td>Thriéthiodide de galamine</td><td>Sigma-Aldrich</td><td></td><td>Le composé utilisé pour curariser les animaux</td></tr><tr><td>Violet de crésyle</td><td>Sigma-Aldrich</td><td></td><td>&nbsp ;</td></tr><tr><td>Antiseptiques topiques (Bétadine 10 %)</td><td>Meda Pharma (Milanm, Italie)</td><td></td><td>&nbsp ;</td></tr><tr><td>Héparine</td><td>Sigma-Aldrich</td><td></td><td>&nbsp ;</td></tr><tr><td>Réactifs de formaldéhyde</td><td>Carlo Erba (Pomigliano Milanese, Milan, Italie)</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

un appareil simple pour stimulatory evoquant point comme stimuli tactiles: un projecteur pour lfp à spike transitions

A Simple Stimulatory Device for Evoking Point-like Tactile Stimuli: A Searchlight for LFP to Spike Transitions

La recherche neurophysiologique actuelle a pour but de développer des méthodes pour étudier la voie de signal entre les neurones, notamment dans les transitions de pointes au champ potentiels locaux (LFP) et de LFPs à pointes. LFP ont une dépendance complexe sur l&#39;activité de pointe et leur relation est encore mal compris 1. L&#39;élucidation de ces relations de signal serait utile à la fois pour le diagnostic clinique (par exemple, les paradigmes de stimulation pour la stimulation cérébrale profonde) et pour une compréhension plus profonde des stratégies de codage neural dans des conditions normales et pathologiques (par exemple, l&#39;épilepsie, la maladie de Parkinson, la douleur chronique). Dans ce but, il faut résoudre les problèmes techniques liés aux dispositifs de stimulation, les paradigmes de stimulation et des analyses informatiques. Par conséquent, un dispositif de stimulation sur mesure a été développé afin de fournir des stimuli bien réglementés dans l&#39;espace et le temps qui ne subissent pas de résonance mécanique. Par la suite,comme un exemple, un ensemble de relations LFP-pointes fiables a été extrait. La performance de l&#39;appareil a été étudié par des enregistrements extracellulaires, pointes conjointement et réponses LFP aux stimuli appliqués, de la rat cortex somatosensoriel primaire. Ensuite, au moyen d&#39;une stratégie d&#39;optimisation multi-objectif, un modèle prédictif de survenue transitoire basée sur LFP a été estimé. L&#39;application de ce modèle montre que le dispositif est adapté de manière adéquate pour fournir une stimulation tactile de haute fréquence, supérieure actionneurs piézo-électriques communs. Comme une preuve de l&#39;efficacité de l&#39;appareil, les résultats suivants ont été présentés: 1) le calendrier et la fiabilité des réponses LFP correspondent bien les réponses à pointes, 2) LFP sont sensibles à l&#39;histoire de la stimulation et de capturer non seulement la réponse moyenne, mais aussi la procès-à-la-montre des fluctuations de l&#39;activité de pointe et, enfin, 3) à l&#39;aide de la LFP signal, il est possible d&#39;estimer une fourchette of modèles de prévision qui capturent les différents aspects de l&#39;activité de pointe.

Astuce caractéristiques d&#39;excursion Afin de caractériser les propriétés dynamiques du dispositif de stimulation proposée, une série d&#39;expériences a été mis en place. Un dispositif spécifique qui est constitué d&#39;un arséniure de gallium diode infrarouge couplé à un phototransistor en silicium électroluminescent a été utilisé pour évaluer le déplacement de la pointe, la durée de déplacement et les retards de déplacements possibles. Au moyen de ce commutateur de coupure optique, nous av...

Pour élucider la transition complexe de champs potentiels locaux (LFP) à pointes un stimulateur adapté à des stimuli périphériques mécaniques légères a été construit. Comme application, les activités de dopage enregistrés à partir de cortex somatosensoriel ont été analysés par une stratégie d&#39;optimisation multi-objectif. Les résultats ont démontré que le stimulateur a été proposé en mesure de fournir des stimuli tactiles avec milliseconde et millimétrique précisions.

Un appareil simple pour Stimulatory Evoquant point comme stimuli tactiles: un projecteur pour LFP à Spike Transitions

Current neurophysiological research has the aim to develop methodologies to investigate the signal route from neuron to neuron, namely in the transitions ...

L'objectif général de cette procédure est de proposer un dispositif sensoriel stimulateur personnalisé, efficace et peu coûteux, permettant des stimulations ponctuelles rapides. Cela est réalisé en premier lieu en configurant le dispositif de stimulation. La deuxième étape consiste à préparer l'animal pour les enregistrements électrophysiologiques en ouvrant une fenêtre osseuse au-dessus de la zone somesthésique primaire afin de permettre le positionnement de la matrice multielectrode.La troisième étape de la procédure consiste à placer le dispositif de stimulation sur les régions de la patte précédemment identifiées comme réactives. La dernière étape consiste à trouver les meilleures réponses de potentiel local field (LFP) et de décharge neuronale spontanées et stimulées. En fin de compte, les réponses de décharge neuronale et de LFP seront évaluées par des algorithmes spécifiques.L'avantage principal de notre technique par rapport aux techniques existantes, telles que les stimulateurs bioélectriques, est que notre dispositif est capable de produire des stimulations très rapides et ponctuelles sur les zones ciblées. Cette méthode peut aider à répondre à des questions essentielles

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Cet article présente une approche consistant à combiner photostimulation à balayage laser avec des enregistrements de cellules entières dans des souris transgéniques exprimant la GFP dans les populations limitées neurone inhibiteur. La technique permet de cartographie étendue et l'analyse quantitative des locaux des circuits synaptiques inhibitrices spécifiques des neurones corticaux.

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Adulte-né neurones exprimant CHR2 peuvent être manipulés dans des préparations tranche électrophysiologiques afin d'examiner leur contribution à la fonction de olfactive circuits neuronaux.

L&#39;utilisation abordable tableaux LED pour photo-stimulation des neurones

Une procédure est décrite pour la manipulation de l'activité du cortex cérébral neurones pyramidaux optogenetically tandis que l'électroencéphalogramme, électromyogramme, et la concentration de lactate cérébral sont surveillés. Enregistrements expérimentaux sont effectués sur les câbles attachés-souris tandis qu'ils subissent spontanément veille / sommeil cycles. Optogenetic matériel est assemblé dans notre laboratoire, le matériel d'enregistrement est disponible dans le commerce.

Électroencéphalographie simultanée, en temps réel Mesure de la concentration de lactate et manipulation optogenetic de l&#39;activité neuronale dans le cortex cérébral des rongeurs

Source : Zhao, Z. et al. Une méthode invasive pour l’activation du gyrus denté de souris par stimulation à haute fréquence. J. Vis. Exp. (2018)Cette vidéo démontre le protocole permettant d’administrer une stimulation cérébrale profonde à haute fréquence à un gyrus denté de l’hippocampe de souris, en détaillant ses effets sur l’activation neuronale, la plasticité synaptique et la neurogenèse.

Stimulation à haute fréquence pour améliorer l’activation neuronale et la neurogenèse chez le gyrus denté de souris

Cette vidéo montre le fonctionnement de la stimulation en boucle fermée chez un rat avec un dispositif implanté chirurgicalement pour enregistrer l’activité neuronale. Les signaux neuronaux sont d’abord enregistrés et analysés. Les formes d’onde du modèle sont ensuite téléchargées et les paramètres sont définis pour déclencher une stimulation en boucle fermée.

Déclenchement d’une stimulation en boucle fermée par l’activité de pointe des neurones

Nous décrivons une méthode pour caractériser la topographie fonctionnelle et les propriétés synaptiques des circuits du cerveau antérieur en utilisant une approche optogénétique pour photostimuler les populations neuronales in vitro.

Photostimulation par balayage laser de circuits du cerveau antérieur ciblés optogénétiquement

Le laser femtoseconde étroitement focalisé peut fournir la stimulation précise aux cellules en étant couplé dans une microscopie confocale permettant l'observation et la photostimulation en temps réel. La photostimulation peut activer des événements moléculaires cellulaires, y compris la voie de signalisation ERK et les éclairs mitochondriaux des espèces réactives d'oxygène.

Photostimulation par Femtosecond Laser Actives Extracellular-signal-regulated Kinase (ERK) Signaling or Mitochondrial Events in Target Cells Photostimulation by Femtosecond Laser Activates Extracellular-signal-regulated Kinase (ERK) Signaling or Mitochondrial Events in Target Cells Photo

Nous présentons un protocole pour évaluer l’équilibre entre la libération de glutamate et le dégagement aux synapses glutamatergics corticostriatal simples dans des tranches aigues des souris adultes. Ce protocole utilise le capteur fluorescent iGluu pour la détection de glutamate, une caméra sCMOS pour l’acquisition du signal et un dispositif pour l’éclairage laser focal.

Indicateurs synapses uniques de la libération et de l’absorption des glutamates dans les tranches cérébrales aigues des souris normales et huntingtones

Nous présentons ici un protocole décrivant la transduction virale de régions cérébrales discrètes avec des constructions optogénétiques pour permettre une caractérisation électrophysiologique spécifique des synapses dans des tranches de cerveau de rongeurs aigus.

Ex Vivo Interrogation optogénétique de la transmission synaptique à longue distance et de la plasticité du cortex préfrontal médian au cortex entorhinal latéral

Nous présentons une méthode pour la stimulation chimique flexible et multimodale et l’enregistrement de l’activité neuronale simultanée de nombreux vers Caenorhabditis elegans . Cette méthode utilise la microfluidique, du matériel et des logiciels open source et une analyse automatisée supervisée des données pour permettre la mesure de phénomènes neuronaux tels que l’adaptation, l’inhibition temporelle et la diaphonie de stimulus.

Stimulation multimodale automatisée et enregistrement neuronal simultané à partir de plusieurs petits organismes

Découvrez un dispositif de stimulation sensorielle personnalisé pour stimulations mécaniques précises. Cette méthode permet d'étudier les réponses neuronales dans le cortex somatosensoriel et la transition entre potentiels de champ local et décharges.

Un appareil simple pour Stimulatory Evoquant point comme stimuli tactiles: un projecteur pour LFP à Spike Transitions

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