Name: Fabrication microfluidique de fibres polymères et biohybrides avec une taille et une forme redessinées (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-01-08T13:45:00.000+00:00
Duration: 7 min 38 s
Description: Découvrez la fabrication de microfibres polymères et biohybrides par microfluidique avec contrôle précis de la taille et de la forme. Cette méthode utilise la photopolymérisation UV pour créer des fibres creuses de 200 micromètres en 45 minutes.

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Darryl A. Boyd et Michael A. Daniele sont boursiers postdoctoraux du Conseil national de recherches du Pays. Les travaux ont été appuyés par les unités de travail 4286 et 9899 de l’ONR et de la LNR. Les opinions sont celles des auteurs et ne représentent pas l’opinion ou la politique de l’US Navy ou du département de la Défense.

Ce protocole décrit la fabrication d’une fibre creuse utilisant la chimie photoinitiated de clic de thiol-yne. Le microcanal a des rainures en chevron ou des « rayures » comme caractéristiques de mise en forme dans le bas et le haut du canal(Figure 1). Trois fluides sont introduits et dirigés dans des cours d’eau concentriques; des flux de fluide intérieurs aux flux de fluides externes, ceux-ci sont appelés le fluide de noyau, de revêtement et de gaine. Seul le flux de revêtement est polymérisé pour former la fibre creuse. Les matériaux sélectionnés sont les suivants :
<ol type="a"><li>Fluide de base: PEG (M.W. = 400), ~ 100 mPa. sec (20 ºC)</li>
	<li>Fluide de revêtement : Polymère thiol-yne (PETMP + ODY), Initiateur (DMPA)</li>
	<li>Fluide de gaine: PEG (M.W. = 400), ~ 100 mPa. sec (20 ºC)</li>
</ol>Le dispositif à microcanaux a été assemblé à partir de pièces en aluminium et en plastique fabriquées par fraisage CNC et moulage PDMS. L’écoulement à travers le microcanal a été commandé par trois pompes de seringue.
1. Conception et simulation de microcanaux
Lors du calcul de la vitesse du fluide et de la convection/diffusion dans le microcanal, il est essentiel d’attribuer la viscosité appropriée à chaque fluide entrant.
<ol><li>Créez un modèle informatique du microcanal souhaité à importer dans le logiciel de dynamique des fluides numérique (COMSOL). L’exemple de la figure 1 a été généré avec le logiciel de CAO Autodesk Inventor. Les étapes suivantes sont en référence à l’utilisation de COMSOL Multiphysics pour le calcul de l’écoulement du fluide dans un microcanal.</li>
	<li>Après l’importation du microcanal conçu dans COMSOL, les débits itératifs des fluides peuvent être introduits dans le solveur Navier-Stokes.<ol>
<li>Initialisez le réglage du programme et choisissez Flux laminaire 3D + Équations de convection / diffusion. Les faibles nombres de Reynolds générés dans les microcanaux permettent un flux laminaire complet dans l’appareil.</li>
		<li>Concevez un maillage d’éléments finis sur lequel effectuer les calculs numériques. Le maillage doit être plus raffiné (avoir de petites divisions) dans les zones où les propriétés changent rapidement. Il est suggéré d’affiner le maillage à la fois à la fonction de mise en forme et de quitter à <1 μm de longueur latérale. Cela permet une visualisation « nette » de l’interface fluide noyau-gaine.</li>
		<li>Propriétés du matériau d’entrée pour l’écoulement du fluide, c’est-à-dire viscosité, constante de diffusion et concentration. À ce stade, définissez également les conditions aux limites du flux de sortie. Nous suggérons zéro contrainte visqueuse pour simuler une sortie ouverte.</li>
		<li>Calculer les études de vitesse d’écoulement du fluide en parcourant de manière itérative une série de débits d’entrée. Par exemple, fluide de base = 7,5 μl/min, fluide de gaine = 30 μl/min.</li>
		<li>Importez les solutions de champ de vitesse en tant que valeurs initiales pour résoudre les propriétés de convection/diffusion du flux de microcanaux. La solution aux problèmes de convection/diffusion illustrera l’interface noyau-gaine fluide et aidera à prédire la forme de l’écoulement final de fluide et de la fibre produite.</li>
	</ol>
</li>
</ol>À partir des résultats de calcul, le nombre et le type requis d’entités de mise en forme peuvent être prédits pour atteindre la forme de fibre souhaitée. Les entrées de débit de fluide seront également corrélées aux débits requis pour générer les fibres. Avec ces prédictions, un dispositif à microcanaux peut être fabriqué pour l’extrusion de fibres polymères.
2. Fabrication des composants de l’appareil d’écoulement de gaine
Une combinaison de micromillage direct, de gaufrage à chaud et/ou de moulage de polymères peut être utilisée pour créer les composants du dispositif d’écoulement de gaine. En fonction des ressources, choisissez la stratégie en conséquence. L’exemple présenté est un procédé de fraisage direct qui utilise un code numérique par ordinateur (CNC). Il y a cinq couches à faire (de haut en bas), qui sont représentées dans la figure 2:1. Mandrin d’entrée (aluminium), 2. Plaque de fixation (aluminium), 3. Couche supérieure microcanal (copolymère d’oléfines cycliques, COC ou PDMS), 4. Couche inférieure microcanal (COC ou polyéther éther éther cétone, PEEK), 5. Plaque de fixation (aluminium). (Des exemples de fichiers pour le fraisage direct sont disponibles au format *.stl dans les renseignements à l’appui.)
<ol><li>En utilisant une conception compatible avec les simulations COMSOL, développer un modèle 3D du système via le dessin assisté par ordinateur (CAO). Créez un fichier DAO distinct pour chaque couche de l’unité.</li>
	<li>Lorsqu’une couche doit être fabriquée via un micromillage direct, importez les modèles CAO dans une application d’usinage assistée par ordinateur pour générer un code numérique (NC) qui sera interprété par un broyeur à commande numérique par ordinateur (CNC) pour produire l’appareil.</li>
	<li>Acquérir 5 feuilles de 30,5 cm × 30,5 cm de matériaux de couche sacrificielle d’au moins 3,2 mm d’épaisseur.</li>
	<li>Acquérir 1 feuille de COC, PEEK, aluminium et poly(méthylméthacrylate) de 30,5 cm × 30,5 cm et 3,2 mm d’épaisseur.</li>
	<li>Acquérir 1 feuille d’aluminium de 30,5 cm × de 30,5 cm et 9,5 mm d’épaisseur.</li>
	<li>Fixer chacune des feuilles aux étapes 2.4 à 2.5 sur une feuille de stock sacrificiel de l’étape 2.3 avec adhésif double face. S’assurer qu’il existe au maximum une bordure extérieure non enregistrée de 2,5 cm. Le ruban sert à maintenir le matériau de travail en place pendant le fraisage et à le protéger une fois que la pièce fraisée est coupée du matériau d’origine à la fin du cycle du broyeur.</li>
	<li>Fixez le COC + stock sacrificiel à la table du broyeur CNC, chargez les outils cités dans le code numérique (NC) et étalonnez les outils et les matériaux de stock (travail) en x, y et z.</li>
	<li>Chargez le code CN et fraisez la couche COC.</li>
	<li>Retirez la feuille de matériau du broyeur et retirez soigneusement la pièce usinée du substrat. Au cours de ce processus, le liquide de refroidissement du moulin va saturer la pièce et le stock. Rincer abondamment avant d’enlever doucement la pièce. Laver avec un détergent doux, puis laver avec un alcool isopropylique à 70%. Le détergent doux éliminera les résidus huileux et l’alcool éliminera l’adhésif résiduel. Si les bavures sont piégées dans les microarchitectures, la sonication peut être nécessaire pour les déloger.</li>
	<li>Répétez les étapes 2.7 et 2.9 pour chacune des autres couches qui seront utilisées pour créer le dispositif d’écoulement de gaine.</li>
	<li>À l’exception de la couche PMMA, chacune des couches qui ont été préparées à ce stade sera utilisée directement dans l’appareil. Le PMMA sera utilisé pour préparer une couche PDMS en combinant 10 parties de base Sylgard 184 avec 1 agent de durcissement partiel et en mélangeant soigneusement par agitation. Ces informations sont fournies au cas où l’on préférerait remplacer l’une des couches COC par le matériau PDMS de type joint.</li>
	<li>Versez le Sylgard 184 dans la cavité de moule PMMA préparée plus tôt, en veillant à ce que les bulles d’air soient éliminées. Si nécessaire, les bulles peuvent être enlevées dans le vide. Le PDMS peut être durci à température ambiante pendant 48 h, 45 min à 100 °C, 20 min à 125 °C ou 10 min à 150 °C.</li>
</ol>3. Ensemble d’appareils d’écoulement de gaine
<ol><li>Assemblez le dispositif d’écoulement de la gaine de bas en haut en plaçant une plaque de fixation en bas, puis la couche COC suivie de l’autre couche COC et la plaque de fixation restante(Figure 2). Assurez-vous que les rainures de mise en forme s’alignent les unes avec les autres le long des bords du canal et que les géométries de mise en forme des fluides dans les couches COC se chevauchent parfaitement. Un microscope de dissection peut être utilisé pour aider à l’alignement.</li>
	<li>Insérez des boulons au centre de l’appareil et serrez à la main les écrous et les boulons pour serrer l’appareil ensemble.</li>
	<li>En alternant de gauche à droite du centre, répétez l’étape 3.2 à partir du centre pour verrouiller l’alignement et éviter les fuites. Ajoutez le mandrin d’entrée lorsque ses trous de montage sont atteints et continuez à monter les vis en alternance.</li>
	<li>Utilisez des raccords HPLC standard pour interfacer le dispositif d’écoulement de gaine avec le tube et les seringues qui contiennent du liquide de gaine et une solution de prépolymère. Le serrage de la main est suffisant pour toutes les connexions.</li>
	<li>Montez l’appareil verticalement à l’aide d’un support d’anneau et d’une pince. Assurez-vous que l’appareil est vertical à l’aide d’un niveau sur la partie supérieure. Si le dispositif d’écoulement de gaine n’est pas vertical, la fibre peut toucher la paroi du microcanal et provoquer un colmatage.</li>
	<li>Positionner la source UV perpendiculairement à environ 1 cm de la face COC du dispositif d’écoulement de la gaine de manière à ce que les 3 à 5 derniers cm du microcanal soient irradiés. La source UV doit être étalonnée pour fournir ~ 200 mW / cm2.</li>
</ol>4. Préparation de la solution
Comme indiqué précédemment, de nombreux matériaux peuvent être utilisés pour créer des microfibres en utilisant des protocoles et des systèmes d’écoulement de gaine analogues, mais la chimie thiol-yne est utilisée ici. Préparez la solution de prépolymère immédiatement avant de commencer le processus d’extrusion de fibres pour éviter l’augmentation de la viscosité qui peut se produire au fil du temps dans le stockage.
<ol><li>Préparer une partie aliquote de polyéthylène glycol 400 (PEG 400) pour servir de liquide de gaine.</li>
	<li>Remplissez une seringue à pointe Luer de 1 ml avec du PEG 400 pour servir de liquide de base nonpolymérisable, et remplissez une seringue à pointe Luer de 30 ml avec du PEG 400 pour servir de liquide de gaine.</li>
	<li>Préparer une solution de prépolymère contenant 0,01 mol de pentaérythritol tétrakis 3-mercaptopropionate (PETMP) et 0,01 mol de 1,7-octadiyne (ODY). Assurez-vous que les deux composants sont bien mélangés tout au long de l’expérience, minimisez l’exposition de tous les réactifs prépolymères aux sources de lumière UV, y compris la lumière ambiante(par exemple, enveloppez les seringues avec du papier d’aluminium).</li>
	<li>Compléter la solution PETMP/ODY avec 4 x10-4 mol 2,2-diméthoxy-2-phénylacétophénone (DMPA) photoinitiateur. Continuez de vous assurer que les solutions sont bien mélangées et qu’elles ne sont pas exposées à la lumière UV en recouvrant les contenants de papier d’aluminium.</li>
	<li>Chargez une seringue à pointe Luer enveloppée de papier d’aluminium de 5 ml avec la solution de prépolymère.</li>
</ol>5. Production de microfibres (focus de la vidéo)
<ol><li>S’assurer que la sortie du canal microfluidique est en contact avec une solution dans le bain de collecte(figure 3). Pour les structures complexes, la solution dans le bain de collecte doit être adaptée aux fluides du noyau et de la gaine, mais pour les fibres creuses simples, l’eau est suffisante.</li>
	<li>Réglez les pompes à noyau, à revêtement et à seringue à liquide de gaine pour qu’ils infuser à 1, 30 et 120 μl/min, respectivement. Assurez-vous que les diamètres respectifs des seringues ont été correctement entrés dans les pompes à seringues.</li>
	<li>Montez les seringues dans leurs pompes à seringues correspondantes et connectez-les au dispositif d’écoulement de gaine avec un tube Tygon protecteur contre les UV.</li>
	<li>Démarrez le fluide de gaine pour amorcer le dispositif d’écoulement de gaine et éliminer l’air du système. Inspectez visuellement le microcanal, en vous assurant qu’il ne reste aucune bulle d’air dans le microcanal avant de passer à l’étape suivante. Portez une attention particulière aux rayures. Un microscope de dissection peut être employé pour faciliter l’inspection de microcanal. Si des bulles d’air sont présentes, agiter l’appareil en tournant et/ou en tapotant doucement sous le flux pour rincer les bulles d’air hors de l’appareil.</li>
	<li>Démarrez le fluide de revêtement, permettant également au flux de se stabiliser. Assurez-vous qu’il ne reste aucune bulle d’air dans le microcanal avant de passer à l’étape suivante. Portez une attention particulière aux rainures de mise en forme. S’il existe des bulles d’air, agitez l’appareil sous flux pour rincer les bulles d’air hors de l’appareil.</li>
	<li>Enfin, démarrez le fluide de base; encore une fois, assurez-vous que les bulles ne sont pas présentes dans le système.</li>
	<li>Allumez la source UV et observez le bain de collecte pour une production continue de la microfibre creuse (Figure 4A) lorsqu’elle est éjectée avec le liquide de gaine. Récupérez la fibre du bain de collecte à l’aide d’une spatule modifiée ou d’une boucle d’inoculation, et permettez de collecter la fibre continue sur une bobine motorisée(figure 3).</li>
</ol>

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</ol>

Les brevets énumérés dans les références sont disponibles pour licence auprès du ministère de la Marine<a href="http://www.nrl.navy.mil/doing-business/tech-transfer/">(http://www.nrl.navy.mil/doing-business/tech-transfer/).</a>

La fabrication de fibres polymères à l’aide de l’approche d’écoulement de gaine présente de multiples avantages par rapport à d’autres techniques de fabrication de fibres. L’un de ces avantages est la possibilité de fabriquer des fibres en utilisant diverses combinaisons de réactifs. Bien qu’une combinaison thiol-yne spécifique ait été présentée ici, plusieurs autres combinaisons de chimie de clic de thiol (y compris thiol-ene) fonctionnent aussi bien. Une grande variété d’autres combinaisons peuvent être utilisées pour produire des fibres tant que la solution de gaine est miscible avec le matériau de base à polymériser. Des inclusions telles que des nanofibres, des particules et des cellules sont également possibles tant que les contributions de ces additifs à la viscosité de la solution de prépolymère sont prises en compte.
La chimie du clic thiol est un sous-ensemble de la famille de la chimie du clic dans lequel un complexe avec un groupe thiol peut être attaché de manière covalente à un complexe avec un groupe fonctionnel alcène (double liaison) ou alcyne (triple liaison) par photopolymérisation de la lumière UV. Les réactions impliquant des alcènes sont appelées réactions thiol-ène, et les réactions impliquant des alcynes sont appelées réactions thiol-yne. Une liaison pi (d’un alcène ou d’un alcyne) se fixera à un groupe thiol lors de l’irradiation de la lumière UV. Le processus s’intègre bien dans la famille des réactions de clic et a été utilisé efficacement dans notre canal microfluidique pour produire des fibres de différentes formes(par exemple, rondes, en forme de ruban, double ancre) à partir de nombreux composants de départ de clic thiol.
Un avantage spécifique de la méthode décrite ici par rapport à la plupart des autres procédés similaires est la capacité de contrôler à la fois la forme et la taille des fibres produites(figures 4A-H). En concevant un canal pour avoir des rayures, des chevrons ou des chevrons, la fibre produite aura une forme de section différente. En général, les rayures sont utiles pour produire des formes rondes ou pour l’introduction de flux de gaine supplémentaires afin d’encercler complètement les cours d’eau précédemment formés et de les éloigner des parois des canaux avant la polymérisation. Les chevrons réduisent la dimension verticale au centre du flux en forme, en maintenant la symétrie horizontale. Les chevrons réduisent la dimension verticale d’un côté du flux en forme, produisant une asymétrie. Ces outils de mise en forme peuvent être mélangés dans d’innombrables combinaisons. Le nombre de caractéristiques équivalentes(c’est-à-dire 7 chevrons contre 10 chevrons) peut également être utilisé pour produire des fibres avec différents profils de section transversale.
En plus de la capacité de contrôler la forme des fibres, la méthodologie de fabrication des fibres présentée permet également de contrôler la taille des fibres fabriquées, même en utilisant un seul ensemble d’écoulement de gaine(par exemple, figure 1). L’ajustement du rapport gaine/débit du noyau est un moyen de fabriquer des fibres avec différentes sections transversales. Il est également possible de contrôler la taille de la fibre en ajustant la conception du canal pour avoir des étages de gainage supplémentaires. Que la mise en forme se produise dans une ou plusieurs étapes, une étape finale simple peut être utilisée pour réduire la taille du noyau sans modifier la forme.
La facilité avec laquelle une multitude de combinaisons de réactifs peuvent être utilisées pour produire des fibres de différentes formes et tailles en utilisant cette conception de canal microfluidique s’avérera utile dans un large éventail d’applications, de l’ingénierie tissulaire aux communications optiques en passant par les textiles intelligents.

Les échafaudages tissulaires1,les matériaux composites2,les communications optiques3et les matériaux hybrides conducteurs4 sont des domaines de recherche utilisant des fibres polymères spécialisées. Les méthodes conventionnelles de fabrication de fibres comprennent l’extrusion par fusion, la filature, l’étirage, la coulée et l’électrofilage. La plupart des fibres polymères produites par ces méthodes présentent des sections transversales rondes engendrées par la tension superficielle entre le polymère et l’air lors de la fabrication. Cependant, les fibres à sections transversales non ferrantes peuvent améliorer les propriétés mécaniques des matériaux composites5,6,augmenter les rapports surface/volume, contrôler le mouillage ou la mèche7,et être utilisées comme guides d’ondes8 ou polariseurs9.
La production de fibres polymères spécialisées par des systèmes microfluidiques utilisant un flux (écoulement de gaine) pour entourer et façonner un autre flux (écoulement de noyau) est attrayante en raison des conditions douces et de la capacité de production continue de fibres hautement reproductibles. Les premières expériences ont produit des fibres rondes dont les tailles dépendent des débits relatifs des fluides prépolymères et gaines10-12. La découverte que les rainures dans le haut et le bas du canal microfluidique pourraient dévier la gaine pour produire une forme prédéterminée pour le flux de noyau13,14 a conduit à la technologie pour générer des formes de fibres plus complexes10-12,15-17.
Les enquêteurs de la LNR ont démontré les caractéristiques techniques critiquessuivantes 13-21:
<ol><li>Une variété de caractéristiques de mise en forme peuvent être utilisées pour diriger le fluide de gaine pour façonner le flux central: les rainures ou les crêtes peuvent être configurées comme rayures, chevrons ou chevrons.</li>
	<li>Une boîte à outils de ces fonctionnalités peut être mappée au résultat de flux souhaité.</li>
	<li>Les microcanaux peuvent être créés à l’aide de techniques de lithographie, de moulage, de fraisage ou d’impression. Les matériaux du substrat ne doivent pas se dissoudre ou s’éroder dans les solutions de prépolymère ou de gaine, et pour les polymérisations photoinitiées, les couches externes doivent être transparentes à la lumière ultraviolette.</li>
	<li>La forme créée par un seul ensemble d’entités de mise en forme peut être modifiée en modifiant les débits dans le canal. COMSOL Les simulations multiphysiques de l’écoulement du fluide dans les microcanaux sont capables de prédire les formes de fluide et de fibre résultantes.</li>
	<li>L’appariement de la viscosité et de la phase (hydrophilie) des fluides de gaine et de noyau est essentiel pour éviter l’instabilité du type de flambage, résultant de la variation de la déformation de cisaillement à travers l’interface du fluide. S’il y a une grande viscosité ou une discordance de phase, un flambage visqueux peut se produire, déformant éventuellement la forme finale de la fibre ou même obstruant le microcanal.</li>
	<li>Les fibres peuvent être formées par coulée ou polymérisation, mais la polymérisation offre plus de contrôle sur la forme.</li>
	<li>La polymérisation (solidification du fluide central) doit avoir lieu avant la sortie du microcanal. Cependant, une polymérisation plus lente dans le canal peut entraîner une augmentation de la viscosité, affectant la forme de la fibre ou même obstruant le canal. L’heure et le lieu des événements de polymérisation doivent être soigneusement contrôlés.</li>
	<li>En raison de leur cinétique de réaction rapide, les polymérisations de radicaux libres photo-induites, en particulier les chimies de clic à base de thiol, sont particulièrement bien adaptées à la production de fibres.</li>
	<li>Les débits relatifs peuvent être modifiés pendant la fabrication pour créer des diamètres de fibres non uniformes.</li>
	<li>Plusieurs groupes de fonctionnalités de mise en forme peuvent être intégrés dans un seul canal pour les raisons suivantes :<ol type="a">
<li>Pour séparer les fonctions de mise en forme et de dimensionnement</li>
		<li>Pour créer des fibres multicouches ou creuses</li>
		<li>Pour produire plusieurs fibres à partir d’un seul canal microfluidique</li>
	</ol>
</li>
	<li>Les mésogènes à cristaux liquides incorporés dans le polymère à de très faibles concentrations présentent une biréfringence sous la lumière polarisée, ce qui suggère que les molécules de polymère peuvent être alignées le long de l’axe des fibres.</li>
	<li>Les cellules peuvent être incorporées dans des prépolymères d’hydrogel biocompatibles et survivre au processus de fabrication avec une viabilité élevée22.</li>
</ol>Lors de la fabrication de fibres polymères en utilisant la focalisation hydrodynamique par un flux de gaine pour façonner un flux de prépolymère, la sélection de matériaux polymères est une première étape pratique. Les polymères appropriés, les produits chimiques initiateurs correspondants et les fluides de gaine devraient être identifiés dans les lignes directrices suivantes :
<ol><li>Les fluides polymères et gaines sont miscibles et ont une viscosité similaire. Par exemple, une solution aqueuse de monomère pourrait utiliser l’eau comme fluide de gaine viable, mais ne pourrait pas utiliser l’hexane comme fluide de gaine.</li>
	<li>Le mécanisme de polymérisation doit avoir une cinétique de vitesse suffisamment rapide pour solidifier le fluide central après la mise en forme et immédiatement avant que la fibre ne quitte le canal.</li>
</ol>Une fois les matériaux sélectionnés, un microcanal pour générer la forme et la taille de la fibre souhaitées doit être conçu. Pour déterminer les caractéristiques de mise en forme requises (rayures, chevrons, chevrons), un logiciel de dynamique des fluides numérique peut être utilisé pour prédire les modèles d’écoulement des fluides. Les caractéristiques de mise en forme transportent le fluide de gaine autour du fluide de base. En général, les rayures déplacent le fluide de gaine à travers le haut et le bas du canal d’un côté à l’autre, tandis que les chevrons et les chevrons déplacent le fluide loin des côtés vers le haut et / ou le bas du canal, puis vers le centre du canal directement sous le point de la structure. Le nombre de rainures répétitives dans le haut et le bas du canal a une incidence sur le degré de direction du liquide de gaine. Le rapport des débits du fluide noyau et gaine négocie également l’effet. Les simulations utilisant le logiciel COMSOL Multiphysics se sont avérées fiables dans l’évaluation des interactions des caractéristiques de mise en forme et des rapports de débit pour prédire la forme transversale. Ces simulations fournissent également un aperçu utile de la diffusion des solutés entre le noyau et la gaine avec la taille du canal, la viscosité et les débits proposés.
Si une forme complexe est souhaitée, telle que la « double ancre » décrite dans Boyd et al. 23, il est utile de séparer les fonctions de mise en forme et de dimensionnement. Une forme complexe peut être créée avec un ensemble de caractéristiques, puis une structure à rainure unique stratégiquement placée à l’entrée d’un deuxième flux de gainage peut être utilisée pour diminuer la section transversale du flux polymérisable sans modifier de manière significative sa forme.
Un autre exemple de conception de microcanaux complexes peut générer des fibres multicouches. Dans cette conception, des ensembles séquentiels de caractéristiques de mise en forme et des fluides de revêtement supplémentaires sont introduits. Ces écoulements concentriques peuvent être solidifiés en fibres de revêtement à âme solide ou en tubes creux. Un exemple de cet appareil sera présenté ci-dessous.
Une fois que la conception du dispositif microfluidique a été choisie, le processus de fabrication du microcanal peut commencer. Les outils de fabrication qui peuvent être utilisés comprennent la lithographie douce, le fraisage CNC, le gaufrage à chaud et l’impression 3D. Quels que soient les outils utilisés, il est important de réaliser que les caractéristiques introduites accidentellement dans la paroi du canal microfluidique dirigeront également l’écoulement de la gaine et peuvent entraîner des déviations hautement reproductibles dans la forme transversale de toutes les fibres fabriquées à l’aide de ce dispositif. Les matériaux de substrat à microcanaux doivent également être soigneusement sélectionnés pour être physiquement robustes, chimiquement inertes et résistants aux dommages causés par les UV. Par exemple, le polydiméthylsiloxane (PDMS) peut être facilement coulé, fournit des joints en forme de joint et est transparent uv; PDMS est utile pour le haut transparent du canal, mais pas les côtés et le bas du canal, qui ont besoin de plus de rigidité.
En fin de compte, en introduisant les fluides de noyau et de gaine correctement sélectionnés aux débits prédits par les simulations de dynamique des fluides, les caractéristiques de mise en forme généreront le profil de fluide approprié et la lampe de durcissement UV en aval solidifiera les fibres polymères conçues. L’extrusion continue des fibres polymérisées à partir du canal peut fournir des fibres reproductibles dans des longueurs limitées uniquement par le volume des réservoirs de fluide.

<table><tbody><tr><td>Pentaerythritol tetrakis 3-mercaptopropionate</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>381462</td><td>Voir les références</td></tr><tr><td>1.7-Octadiyne</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>161292</td><td>Voir les références</td></tr><tr><td>2,2-Diméthoxy-2-phénylacétophénone</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>196118</td><td>Voir les références</td></tr><tr><td>Polyéthylène glycol 400</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>202398</td><td>Polyéthylène glycol 200 ou 600, dextrose, ou glycérol peut être substitué</td></tr><tr><td>Sylgard 184&nbsp ;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>761036</td><td>QSIL 216, OptiTec 7020 ou GS RTV 615 peut être substitué</td></tr><tr><td>Table of Specific Equipment</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>MiniMill</td><td>Haas</td><td>MINIMILL Tout</td><td>broyeur à 2,5 axes (ou supérieur) interprétant le code NC peut être substitué Pompes</td></tr> à <tr><td>seringue (3)</td><td>Appareil de Harvard</td><td>702212</td><td>Les pousse-seringues qui peuvent être programmés pour fournir les débits volumiques souhaités peuvent être remplacés</td></tr><tr><td>Tube Tygon (3 m)</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-169-13A</td><td>NA</td></tr><tr><td>Tube PEEK</td><td>Upchurch Scientific</td><td>1435</td><td>NA</td></tr><tr><td>Raccords HPLC</td><td>Upchurch Scientific</td><td>1457</td><td>NA</td></tr><tr><td>BlueWave 200 Lampe UV avec support et guides de lumière</td><td>Dymax</td><td>38905 ; 38477 ; 39700</td><td>Toute source UV guidée qui délivre 300-450 nm, >200 mW/cm2 peut être substituée</td></tr><tr><td>Bécher de 500 ml</td><td>Fisher Scientific</td><td>FB-100-600</td><td>Tout récipient de taille et de forme approximativement identiques peut être substitué</td></tr><tr><td>Support annulaire</td><td>Fisher Scientific</td><td>S47807</td><td>Tout support annulaire capable de monter un appareil d’écoulement à gaine serrée au-dessus du niveau des pousse-seringues peut être substitué</td></tr><tr><td>Support de pince à anneau (2)</td><td>Fisher</td><td>Scientific S02625</td><td>Tout support de pince à anneau capable de maintenir les pinces peut être remplacé Pinces</td></tr> à <tr><td>anneau (2)</td><td>Fisher Scientific</td><td>02-216-352</td><td>Tout support à anneau capable de maintenir l’appareil d’écoulement de la gaine serrée et les guides de lumière peuvent être remplacés</td></tr><tr><td>Seringues de 1, 5 et 60 ml</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-823-16H ; 14-823-16D ; 14-820-11</td><td>Toute seringue dont le diamètre intérieur est connu et dont le volume est suffisant peut être substituée Poly</td></tr><tr><td>(méthacrylate de méthyle) (3,2 mm)</td><td>McMaster-Carr</td><td>8560K239</td><td>Le polycarbonate et le copolymère d’oléfines cycliques peuvent être substitués</td></tr><tr><td>Polyéther cétone (3,2 mm)</td><td>McMaster-Carr</td><td>8504K25</td><td>Des matériaux usinables résistants aux solvants peuvent être substitués</td></tr><tr><td>Aluminium (3,2, 9,5 mm)</td><td>McMaster-Carr</td><td>1651T41 ; 9246K23</td><td>Remplacez d’autres matériaux au besoin</td></tr></tbody></table>

fabrication microfluidique de fibres polymères et biohybrides avec une taille et une forme redessinées

Microfluidic Fabrication of Polymeric and Biohybrid Fibers with Predesigned Size and Shape

Un fluide « gaine » passant par un canal microfluidique à faible nombre de Reynolds peut être dirigé autour d’un autre flux « noyau » et utilisé pour dicter la forme ainsi que le diamètre d’un flux de noyau. Les rainures dans le haut et le bas d’un canal microfluidique ont été conçues pour diriger le fluide de gaine et façonner le fluide de noyau. En faisant correspondre la viscosité et l’hydrophilie des fluides de gaine et de noyau, les effets interfacial sont minimisés et des formes complexes de fluide peuvent être formées. Le contrôle des débits relatifs des fluides de gaine et de noyau détermine la section transversale du fluide central. Les fibres ont été produites avec des tailles allant de 300 nm à ~ 1 mm, et les sections transversales des fibres peuvent être rondes, plates, carrées ou complexes comme dans le cas des fibres à double ancrage. La polymérisation du fluide central en aval de la région de mise en forme solidifie les fibres. Les chimies de clic photoinitiées sont bien adaptées à la polymérisation rapide du fluide central par irradiation avec la lumière ultraviolette. Des fibres avec une grande variété de formes ont été produites à partir d’une liste de polymères, y compris des cristaux liquides, des résines poly (méthylméthacrylate), thiol-ène et thiol-yne, du polyéthylène glycol et des dérivés d’hydrogel. Un cisaillement minimal pendant le processus de mise en forme et des conditions de polymérisation douces rendent également le processus de fabrication bien adapté à l’encapsulation de cellules et d’autres composants biologiques.

Une conception simple en 2 étapes, utilisant des rainures de mise en forme et trois entrées de solution, a été utilisée pour créer des fibres creuses(Figure 1). Des simulations COMSOL ont été utilisées pour déterminer les rapports débit-débit appropriés afin d’obtenir la taille de section transversale souhaitée(Figure 1,ESI Video). Une combinaison de fraisage et de moulage a produit les composants pour l’ensemble d’écoulement de gaine pour fabriquer les fibres(Figure 2). L’ensemble complet comprenait le dispositif d’écoulement de gaine, un laser UV couplé à fibre optique, trois pompes à seringues, un bain de collecte (bécher) et une bobine de collecte de fibres(Figure 3).
La polymérisation du matériau de revêtement a été initiée par la source de lumière UV, et des fibres creuses ont été extrudées du microcanal dans le bain de collecte. La fibre s’est formée et a été recueillie en continu jusqu’à ce que la lumière UV soit éteinte. La production de fibres s’est poursuivie pendant des minutes et a généré une seule fibre de plus d’un mètre de longueur. Les fibres fabriquées dans ces conditions avaient un diamètre d’environ 200 μm. La structure des fibres a été visualisée utilisant la microscopie optique et électronique. Les fibres avaient une forme ovale avec un noyau creux. L’action capillaire a été utilisée pour introduire du liquide et des bulles à l’intérieur de la fibre et a confirmé que la structure creuse était continue sur toute la longueur de la fibre(figure 4A).
<img alt="Figure 1" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/50958/50958fig1highres.jpg" src="/files/ftp_upload/50958/50958fig1.jpg"> Figure 1. Conception du dispositif de flux de gaine et données COMSOL. Le dispositif de fabrication à deux sections avec des rainures droites a été choisi pour produire une fibre creuse (tournée autour de l’axe x de 45°). Les simulations COMSOL à gauche montrent comment les rapports noyau:revêtement:débit de gaine (nombres inférieurs à chaque simulation) ont un impact sur la taille finale des fibres creuses. La section transversale du microcanal est de 1 mm x 0,75 mm, et les rayures ont une largeur de 0,38 mm et une profondeur de 250 μm. Les rayures sont à un ∠45° par rapport au canal.
<img alt="Figure 2" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/50958/50958fig2highres.jpg" width="500"> Figure 2. Vue éclatée de l’ensemble d’écoulement de gaine. De haut en bas, (A) mandrin d’entrée, (B) plaque de fixation, (C) couvercle de microcanal, (D) base de microcanal, (E) plaque de fixation. Les composants sont fabriqués à partir d’aluminium, d’aluminium, de COC (ou PDMS), de COC (ou PEEK) et d’aluminium, respectivement. Les trous régulièrement espacés accueillent des vis d’assemblage.
<img alt="Figure 3" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/50958/50958fig3highres.jpg" src="/files/ftp_upload/50958/50958fig3.jpg"> Figure 3. Photo de mise en page et vue d’ensemble schématique. La configuration comprend un ensemble d’écoulement de gaine fixé verticalement sur un bécher contenant un bain d’eau, un laser à fibre optique pour la photopolymérisation, trois pompes à seringue et une broche pour collecter des fibres polymères. L’encart montre l’assemblage de fabrication avec éclairage UV. (A) Gaine et entrées de noyau, (B) canal microfluidique, (C) lumière UV, (D) réservoir de collecte, (E) fibre polymérisée étant recueillie.
<img alt="Figure 4" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/50958/50958fig4highres.jpg" src="/files/ftp_upload/50958/50958fig4.jpg"> Figure 4. Images de micrographie électronique optiques et à balayage de fibres réalisées à l’aide de la mise au point hydrodynamique. Les fibres ont été fabriquées dans les formes suivantes en utilisant la mise au point hydrodynamique: (A) Tubes creux, (B) Rubans rectangulaires, (C) Rubans élastiques minces, (D) Triangles, (E) Haricots rouges, (F) Chaîne de perles, (G) Fibre ronde avec nanofibre de carbone incorporée, et (H) Double ancre en forme. Les fibres sont faites de divers matériaux dont des acrylates, des méthacrylates et des thiol-enes.
 <a href="/files/ftp_upload/50958/ESI_Video.mp4" target="_blank">Vidéo ESI.</a> Diagramme de tranches produit dans COMSOL Multiphysics représentant la moitié du microcanal avec des fluides de noyau, de revêtement et de gaine entrant dans le dispositif et traversant les rainures diagonales à deux étages modifiant l’écoulement. Les débits de carotte, de revêtement et de gaine simulés sont de 1, 28 et 256 μl/min, respectivement. La vidéo représente ~ 6 secondes en temps réel, ralenti 6 fois à des fins d’illustration.

Deux fluides adjacents passant par un canal microfluidique rainuré peuvent être dirigés pour former une gaine autour d’un noyau de prépolymère; déterminant ainsi à la fois la forme et la section transversale. La polymérisation photoinitiée, telle que la chimie du clic thiol, est bien adaptée à la solidification rapide du fluide central en une microfibre avec une taille et une forme prédéterminées.

Fabrication microfluidique de fibres polymères et biohybrides avec une taille et une forme redessinées

A &#8220;sheath&#8221; fluid passing through a microfluidic channel at low Reynolds number can be directed around another &#8220;core&#8221; stream and ...

L'objectif général de l'expérience suivante est de démontrer la mise en forme complexe de fluides, observée lors de la production de microfibres. Ceci est réalisé en assemblant un canal microfluidique doté de rainures spécifiques afin de produire un cœur polymère réalisable présentant une forme prédéterminée en coupe transversale. Dans un deuxième temps, une solution de prépolymère est préparée, qui sera mise en forme et polymérisée une fois qu'elle aura traversé le canal.Ensuite, la lumière UV est activée au fond du canal afin de polymériser le matériau polymère. Ces micrographies électroniques à balayage montrent plusieurs formes de microfibres qui ont été fabriquées. De même, les avantages de cette technique par rapport à d'autres méthodes existantes telles que le filage électrostatique et le filage à la fusion incluent le fait qu'elle peut être réalisée à température ambiante, et qu'elle peut être utilisée avec une variété de matériaux polymères raisonnablement adaptés.En outre, cette technique ne nécessite pas de hautes tensions. Elle ne nécessite pas non plus d'hautes températures suivies de temps de refroidissement rapides, et ne requiert pas davantage le contrôle de facteurs environnementaux tels que l'humidité. La démonstration visuelle de cette technique est essentielle, car la fabrication de fibres microfluidiques est moins courante que certaines autres méthodes, et il peut donc être difficile de se la représenter sans l'avoir vue.Visuellement, cette méthode a toutefois été utilisée pour la production de microfibres polymères. Les mêmes principes sont appliqués dans notre laboratoire pour le développement d'autres systèmes, tels que des microvaisseaux sanguins. Nous avons initialement eu cette idée en observant des systèmes de mélangeurs microfluidiques et de cytométrie de flux sur puces munies de microscopes confocaux.Comme nous avons observé le développement de sections transversales ornées durables, nous avons émis l'hypothèse que, en introduisant une solution polymère, les formes pourraient être figées de manière continue et relativement aisée par polymérisation photochimique. La procédure sera démontrée par Michael Danielle et Darrell Boyd, postdoctorants de mon laboratoire.Assemblez d'abord un dispositif d'écoulement en gaine préalablement conçu de bas en haut en plaçant une plaque de fixation au fond, suivie d'une couche de copolymère cyclique d'oléfine (COC), puis de la plaque de fixation restante. Veillez à ce que les rainures de forme s'alignent correctement les unes avec les autres le long des bords du canal, et que les géométries de mise en forme du fluide dans les couches COC se superposent parfaitement. Insérez des boulons au centre du dispositif et, à l'aide d'un tournevis électrique, serrez les écrous et les boulons pour fixer l'ensemble du dispositif, en alternant de gauche à droite par rapport au centre.Répétez l'étape précédente depuis le centre vers l'extérieur afin de fixer l'alignement et d'éviter les fuites. Ajoutez l'adaptateur d'entrée lorsque ses trous de fixation sont atteints, puis continuez à installer les vis de manière alternée. Ensuite, reliez le dispositif d'écoulement de gaine au tube en téflon.À l'aide de raccords HPLC standard, vissez manuellement toutes les connexions, fixez l'appareil verticalement à l'aide d'un support à anneaux et d'une pince, puis vérifiez que l'appareil est bien vertical à l'aide d'un niveau placé sur sa partie supérieure. Ensuite, positionnez la source UV perpendiculairement à environ un centimètre de la face COC du dispositif à écoulement en gaine, de sorte que les trois à cinq derniers centimètres du microcanal soient irradiés. Remplissez une seringue munie d'une embase de 1 millilitre avec du PEG 400 destiné à servir de fluide de cœur non polymère, et remplissez une seringue munie d'une embase de 30 millilitres avec du PEG 400 destiné à servir de fluide de gaine.Ensuite, complétez une solution fraîchement préparée de thiol avec quatre fois dix puissance moins quatre moles de l'initiateur photochimique DMPA dans un petit flacon. Après environ deux minutes d'agitation, chargez une seringue de cinq millilitres à embout inférieur enveloppé de papier d'aluminium avec une solution prépolymère. Ensuite, placez la sortie du canal microfluidique dans un bain de collecte contenant de l'eau.Régler les pompes à seringue des fluides de cœur, d’enveloppe et de gaine pour une perfusion respectivement à 30 et 120 microlitres par minute. Saisir ensuite les diamètres respectifs des seringues dans les pompes à seringue. Puis monter les seringues dans leurs pompes à seringue correspondantes et les raccorder au dispositif d'écoulement de la gaine.Avec un tube tigon protecteur contre les UV, faites circuler le liquide de gainage afin de amorcer le dispositif d'écoulement du liquide de gainage et d'éliminer l'air du système. Inspectez visuellement le microcanal et portez une attention particulière aux rainures de mise en forme pour vous assurer qu'aucune bulle d'air ne subsiste dans le microcanal avant de passer à l'étape suivante. S'il y a des bulles d'air, agitez délicatement le dispositif en le faisant tourner ou en le tapotant légèrement, tout en maintenant l'écoulement, afin de les expulser du dispositif.Démarrer le fluide d'enrobage, en laissant également le débit se stabiliser. Après avoir inspecté le microcanal et éliminé les bulles d'air, démarrer le fluide central et s'assurer qu'aucune bulle n'est présente dans le système, de la même manière qu'auparavant. Enfin, allumer la source UV et observer le bain de collecte pour vérifier la production continue de la microfibre creuse au fur et à mesure qu'elle est éjectée avec le fluide de gaine.Retirez la fibre du bain de collecte ; un dispositif à deux étages simples utilisant des rainures de formage et trois entrées de solution a été utilisé pour créer des fibres creuses. Des simulations Comsol ont permis de déterminer les rapports appropriés des débits pour obtenir la taille souhaitée de la section transversale. Une combinaison de fraisage et de moulage a permis de produire les composants de l'assemblage d'écoulement de gaine nécessaire à la fabrication des fibres.La polymérisation du matériau de gaine a été initiée par la source de lumière UV, et des fibres creuses ont été extrudées du microcanal vers le bain de collecte. La production de fibres s'est poursuivie pendant plusieurs minutes et a généré une fibre unique d'une longueur supérieure au mètre. Les fibres fabriquées dans ces conditions avaient un diamètre d'environ 200 micromètres.La structure des fibres a été visualisée à l’aide de microscopie optique et électronique. Les fibres présentaient une forme ovale avec un cœur creux. L’action capillaire a permis d’introduire un liquide et des bulles à l’intérieur de la fibre, confirmant ainsi que la structure creuse était continue sur toute la longueur de la fibre.Une fois maîtrisée, cette procédure peut prendre aussi peu que 45 minutes, y compris le temps de mise en place du canal, de préparation de la solution, de fabrication de la fibre, ainsi que de collecte des fibres. Après avoir visionné cette vidéo, vous devriez bien comprendre comment concevoir et assembler un canal microfluidique pour produire des microfibres creuses.N'oubliez pas que lors de travaux impliquant des produits chimiques dangereux et l'irradiation UV, vous devez toujours porter vos équipements de protection individuelle.

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Ici, nous présentons un protocole pour concevoir et fabriquer des dispositifs microfluidiques personnalisés avec un minimum d'investissement financier et de temps. L'objectif est de faciliter l'adoption de technologies microfluidiques dans les laboratoires de recherche biomédicale et les milieux éducatifs.

Fabrication rapide d'appareils microfluidiques personnalisés pour la recherche et les applications éducatives

Le présent protocole décrit la fabrication de microsphères poreuses hautement ouvertes (HOPM) à base de poly(acide lactique-co-glycolique) au moyen de la technologie microfluidique facile basée sur la formulation à émulsion unique. Ces microsphères ont des applications potentielles dans l’ingénierie tissulaire et le criblage de médicaments.

Fabrication de microsphères poreuses hautement ouvertes (HOPM) via la technologie microfluidique

Ce protocole décrit trois méthodes de scellement simples pour fabriquer un dispositif microfluidique hybride intégrant des composants en polycarbonate et en silicium. En mettant en œuvre des stratégies de liaison solvant, de compression thermique et de compression mécanique, nous permettons des techniques d’étanchéité fiables à basse température qui évitent les équipements spécialisés pour les dispositifs microfluidiques hybrides.

Méthodes de construction pour les dispositifs microfluidiques hybrides polycarbonate-silicium

Découvrez la fabrication de microfibres polymères et biohybrides par microfluidique avec contrôle précis de la taille et de la forme. Cette méthode utilise la photopolymérisation UV pour créer des fibres creuses de 200 micromètres en 45 minutes.

Fabrication microfluidique de fibres polymères et biohybrides avec une taille et une forme redessinées

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