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DOI: 10.3791/50981-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This article presents techniques for isolating cellular lipid droplets from yeast cells and human placentas using density gradient centrifugation. The resulting floating layer containing the droplets is easily visualized, extracted, and quantified through Western Blot analysis for purity.
Deux techniques pour isoler des gouttelettes lipidiques cellulaires à partir de 1) cellules de levure et 2) placentas humains sont présentés. L'élément central de ces deux procédés est centrifugation en gradient de densité, où la couche flottante résultant contenant les gouttelettes peuvent être facilement visualisés à l'oeil nu, on extrait et quantifié par analyse par transfert de Western pour la pureté.
L’objectif global de cette procédure est d’isoler les gouttelettes lipidiques des tissus. Ceci est accompli en disséquant et en séparant d’abord le tissu placentaire. Ensuite, les cellules de l’oléine sont homogénéisées.
Ensuite, les organites sont séparés par plusieurs étapes de centrifugation. Enfin, la couche flottante contenant les gouttelettes lipidiques est collectée et les gouttes lipidiques sont caractérisées. En fin de compte, la microscopie à fluorescence et l’analyse sanguine occidentale sont utilisées pour montrer la pureté de la fraction des gouttelettes lipidiques.
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