Name: Hétérotopique auxiliaire Rat Liver Transplantation avec un débit régulé veine porte artérialisation dans linsuffisance hépatique aiguë (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-09-13T14:00:00.000+00:00
Duration: 16 min 19 s
Description: Découvrez la transplantation hétérotopique auxiliaire du foie chez le rat avec artérialisation régulée de la veine porte pour l'insuffisance hépatique aiguë. Cette technique innovante permet d'étudier la régénération hépatique.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Cette étude a été financée par la «Deutsche Forschungsgemeinschaft» (DFG). K. Schleimer a été soutenue par la Lise Meitner bourse du Ministère de la Science et de la Recherche de NRW. Nous tenons à remercier Mme Marie-Jeanne Blümich pour son excellent aide à l&#39;édition. Dr Maria Kokozidou a été financée par Fresenius 2011_A61.

1. animaux d&#39;expérimentation <ol><li> Obtenir une approbation du comité d&#39;éthique local pour toutes les expériences qui seront effectuées, conformément aux directives de protection des animaux de FELASA (K 40, 17/99). </li><li> Utilisez rats Lewis mâles disponibles à l&#39;achat de n&#39;importe quel éleveur commercial (par exemple, Charles River Wiga GmbH, Sulzfeld, Allemagne). Ici, 224 animaux (112 donateurs, 112 bénéficiaires) ont été utilisés pour effectuer 112 transplantations. Les bénéficiaires ont été sacrifiés à 6 semaines après l&#39;opération. Au moment de l&#39;opération, les animaux doivent peser 250-350 g. </li><li> Gardez les animaux dans les chambres à température contrôlée avec un accès libre à la nourriture et de l&#39;eau. </li></ol> 2. anesthésie et la préparation opérationnelle <ol><li> Placer le rat dans une boîte en plexiglas connecté à l&#39;appareil d&#39;anesthésie avec un débit d&#39;oxygène de 1 L / min, et un vaporisateur isofluorane avec 5% de gaz anesthésiant pour induire une anesthésie. Maintenir l&#39;anesthésie à 1,5% isofluorane. </li><li> Placez les ratsdécubitus dorsal sur une plaque chauffante. </li><li> Retirez la fourrure de l&#39;abdomen avec une crème d&#39;épilation. </li><li> Préparer un champ opératoire stérile comme suit: Utilisez un désinfectant pour nettoyer la surface de travail. Pour la désinfection de l&#39;utilisation du site de l&#39;incision de chlorhexidine premier, second alcool et, enfin, une solution de lavage (par exemple, 70% de chlorhexidine et de l&#39;alcool isopropylique). Porter une blouse chirurgicale jetable et des gants chirurgicaux. </li><li> Utiliser des instruments de microchirurgie stériles. </li><li> Utiliser un microscope d&#39;opération en 12-20 fois grossissement. </li></ol> 3. procédure chirurgicale <ol><li> fonctionnement des bailleurs de fonds Préparation <ol><li> Effectuez une laparotomie médiane et une résection du lobe latéral gauche et le lobe médian de la greffe comme décrit par Higgins. 14 </li><li> Puis préparer le pédicule hépatique. Tout d&#39;abord ligaturer le canal biliaire afin d&#39;induire la congestion et la dilatation de la petite voie biliaire. Puis ligaturer et transect le gastroduodenal veine et de l&#39;artère. Ensuite, isoler le tronc cœliaque et l&#39;artère hépatique commune et transect l&#39;artère gastrique gauche et l&#39;artère splénique. Inciser la voie biliaire congestionné, et introduire un stent G-20 dedans. Le positionnement du stent doit assurer le drainage de l&#39;ensemble du système de la voie biliaire hilaire. Transect de la voie biliaire distale de l&#39;endoprothèse. </li><li> Isoler le segment-hépatique de la veine cave juste au-dessus de la veine rénale droite. Perfusion </li><li> Après la ligature de l&#39;aorte au-dessus du tronc coeliaque, serrer la veine porte et inciser. Introduire le cathéter de perfusion (14 G) dans la veine porte, et effectuer la perfusion avec 30 ml d&#39;histidine-tryptophane-cétoglutarate (HTK) -solution (12 cm H2O, 4 ° C). </li><li> Couper le diaphragme et la veine cave sus-hépatique pour permettre le perfusat de s&#39;écouler. </li><li> Exciser le tronc cœliaque avec un correctif de l&#39;aorte et le rincer avec une solution histidine-tryptophane-cétoglutarate. Explantation </li><li> Transect la veine cave-hépatique droite au-dessus de la veine rénale droite. </li><li> Ensuite, placer un stent avec un diamètre de 0,3 mm dans la veine porte et le fixer avec une ligature. Au cours de l&#39;opération suivante, la veine porte est artérialisée via l&#39;artère rénale droite. Transect de la veine porte distale de l&#39;endoprothèse. </li><li> Après la ligature de la veine cave sus-hépatique, transect ensemble avec un brassard de la membrane. </li><li> Explanter la greffe et le stocker dans histidine-tryptophane-cétoglutarate (HTK) -solution à 4 ° C dans un sac en plastique sur la glace. Sutures Lieu de coin (8-0) de Ethilon dans la veine cave-hépatique. </li></ol></li><li> opération de bénéficiaire <ol><li> Effectuez une laparotomie médiane et préparer la veine cave-hépatique. Puis isoler l&#39;artère rénale droite et l&#39;uretère, ligaturer l&#39;uretère et transect il. Fixer l&#39;artère rénale droite à son origine, puis ligaturer la veine rénale droite. Puis, après sectionnement des deux renavires nales, effectuer la néphrectomie. Par la suite, de réduire l&#39;artère rénale droite, rincer avec une solution saline héparine (40 UI d&#39;héparine / ml de solution saline). </li><li> Transect la veine rénale droite proximale de la ligature après serrage proximale et distale de la veine cave-hépatique pour créer un ovale lumière dans la veine cave-hépatique. Rincer la veine cave avec une solution saline héparine. Implanter le greffon dans la région rénale droite de l&#39;abdomen du destinataire. </li><li> Anastomoser-hépatique fin à côté de veine cave du donateur à la recipient`s veine cave par un surjet 8-0 Ethilon. </li><li> Après rinçage avec une solution d&#39;héparine / solution saline, introduire le stent dans la veine porte dans l&#39;artère rénale droite (figure 3). Connectez la veine porte et l&#39;artère rénale avec 2 points (8-0) Ethilon. Fixer le stent reliant dans l&#39;artère rénale avec une ligature (soie noire tressée 7-0). </li><li> Pour permettre la reperfusion, retirez d&#39;abord la pince artérielle, alors à la foispinces veineux (figure 4). </li><li> Préparer l&#39;aorte, puis placez une extrémité proximale et distale microCLAMP et inciser l&#39;aorte à droite entre les deux pinces. Effectuer une anastomose bout à l&#39;autre entre l&#39;aorte et le tronc cœliaque du donateur, en utilisant une pièce de l&#39;aorte, par un surjet 10-0 de Ethilon. </li><li> Insérez la voie biliaire dans le duodénum: Appliquer une suture pursestring dans la paroi duodénale, faire une petite incision dans la paroi duodénale en plein milieu de la pursestring. Introduire la voie biliaire stent dans le duodénum, ​​et serrer la suture pursestring. Enfin, maintenez le duodénum et le canal biliaire étroitement avec deux points (8-0) Ethilon (figure 5). </li><li> Puis effectuer une résection subtotale du foie natif, d&#39;abord décrit par Emond et al. pour imiter une insuffisance hépatique aiguë. 7 </li><li> Fixer la veine cave sus-hépatique du greffon, avec un brassard de diaphragme, de la paroi abdominale latérale de la recipient 4-0 Vicryl suture. Rincer l&#39;abdomen avec une solution saline (figure 6). </li><li> Pour la couche musculaire utiliser un surjet 4-0 Vicryl et pour cutanés un surjet 3-0 Vicryl. </li></ol></li></ol> 4. rétablissement et de gestion post-opératoire <ol><li> Laissez les animaux se remettre de l&#39;anesthésie sous une lampe chauffante infrarouge. </li><li> Injecter la buprénorphine à la dose de 0,03-0,05 mg / kg de poids corporel sc tous les 8-12 heures pendant 2 jours. </li><li> Examiner les animaux concernant l&#39;état général et des signes de maladie ou d&#39;infection. </li></ol> 5 Calcul de la maternelle initiale poids du foie Calculer le poids du foie natif initial de la manière suivante: soustraire le poids des lobes du foie réséqués à partir de la masse du foie intégral (2,66% du poids du corps (cette valeur avec un écart-type de +/- 0,49% a été déterminée dans des expériences précédentes avec n = 80 animaux de même souche et unge)) 15.

<ol><li>Boudjema, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Auxiliary+liver+transplantation+for+fulminant+and+subfulminant+hepatic+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Auxiliary liver transplantation for fulminant and subfulminant hepatic failure.</a> Transplantation. 59, 218-223 (1995).</li>
<li>Boudjema, K., Jaeck, D., Siméoni, U., Bientz, J., Chenard, M. P., Brunot, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temporary+auxiliary+liver+transplantation+for+subacute+liver+failure+in+a+child%5BTitle%5D)+AND+%22The+Lancet%22%5BJournal%5D)">Temporary auxiliary liver transplantation for subacute liver failure in a child.</a> The Lancet. 342, 778-779 (1993).</li>
<li>Chenard-Neu, M. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Auxiliary+liver+transplantation%3A+Regeneration+of+the+native+liver+and+outcome+in+30+patients+with+fulminant+hepatic+failure+-+a+multicenter+European+study%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">Auxiliary liver transplantation: Regeneration of the native liver and outcome in 30 patients with fulminant hepatic failure - a multicenter European study.</a> Hepatology. 23, 1119-1127 (1996).</li>
<li>Gubernatis, G., Pichlmayr, R., Kemnitz, J., Gratz, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Auxiliary+partial+orthotopic+liver%E2%80%93transplantation+%28APOLT%29+for+fulminant+hepatic+failure%3A+first+successful+case+report%5BTitle%5D)+AND+%22World+J+Surg%22%5BJournal%5D)">Auxiliary partial orthotopic liver–transplantation (APOLT) for fulminant hepatic failure: first successful case report.</a> World J Surg. 15, 660-666 (1991).</li>
<li>Erhard, J., Lange, R., Giebler, R., Rauen, U., de Groot, H., Eigler, F. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Arterialization+of+the+portal+vein+in+orthotopic+and+auxiliary+liver+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Arterialization of the portal vein in orthotopic and auxiliary liver transplantation.</a> Transplantation. 60, 877-879 (1995).</li>
<li>Erhard, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Auxiliary+liver+transplantation+with+arterialization+of+the+portal+vein+for+acute+hepatic+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Transpl+Int%22%5BJournal%5D)">Auxiliary liver transplantation with arterialization of the portal vein for acute hepatic failure.</a> Transpl Int. 11, 266-271 (1998).</li>
<li>Emond, J., Capron-Laudereau, M., Meriggi, F., Bernuau, J., Reynes, M., Houssin, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extent+of+Hepatectomy+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Surg+Res%22%5BJournal%5D)">Extent of Hepatectomy in the rat.</a> Eur Surg Res. 21, 251-259 (1989).</li>
<li>Mas, A., Rode`s, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fulminant+hepatic+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Fulminant hepatic failure.</a> Lancet. 349, 1081-1085 (1997).</li>
<li>Terpstra, O. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Auxiliary+liver+grafting%3A+a+new+concept+in+liver+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22The+Lancet%22%5BJournal%5D)">Auxiliary liver grafting: a new concept in liver transplantation.</a> The Lancet. 342, 758(1993).</li>
<li>Terpstra, O. T., Reuvers, C. B., Schalm, S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Auxiliary+heterotopic+liver+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Auxiliary heterotopic liver transplantation.</a> Transplantation. 45, 1003-1007 (1988).</li>
<li>Schleimer, K., Lange, R., Rauen, U., Erhard, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Auxiliary+liver+transplantation+in+acute+liver+failure+in+the+rat+-+an+illustrated+description+of+a+new+surgical+approach%5BTitle%5D)+AND+%22Langenbecks+Arch+Surg%22%5BJournal%5D)">Auxiliary liver transplantation in acute liver failure in the rat - an illustrated description of a new surgical approach.</a> Langenbecks Arch Surg. 384 (2), 204-208 (1999).</li>
<li>Schleimer, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Physiologic+microcirculation+of+the+heterotopically+transplanted+rat+liver+with+portal+vein+arterialization+depending+on+optimal+stent+diameter%5BTitle%5D)+AND+%22Med+Sci+Monit%22%5BJournal%5D)">Physiologic microcirculation of the heterotopically transplanted rat liver with portal vein arterialization depending on optimal stent diameter.</a> Med Sci Monit. 28 (BR140-145), (2006).</li>
<li>Hong, H. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Study+of+portal+arterialization+with+auxiliary+liver+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Hiroshima+J.+Med.+Sci%22%5BJournal%5D)">Study of portal arterialization with auxiliary liver in rats.</a> Hiroshima J. Med. Sci. 40, 29-33 (1991).</li>
<li>Higgins, G. M., Anderson, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+pathology+of+the+liver.+I--Restoration+of+the+liver+of+the+white+rat+following+partial+surgical+removal%5BTitle%5D)+AND+%22Arch.+Path%22%5BJournal%5D)">Experimental pathology of the liver. I--Restoration of the liver of the white rat following partial surgical removal.</a> Arch. Path. 12, 186-202 (1931).</li>
<li>Schleimer, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Auxiliary+liver+transplantation+with+flow-regulated+portal+vein+arterialization+offers+a+successful+therapeutic+option+in+acute+hepatic+failure--investigations+in+heterotopic+auxiliary+rat+liver+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Transpl+Int%22%5BJournal%5D)">Auxiliary liver transplantation with flow-regulated portal vein arterialization offers a successful therapeutic option in acute hepatic failure--investigations in heterotopic auxiliary rat liver transplantation.</a> Transpl Int. 19 (7), 581-588 (2006).</li>
<li>Lee, S., Edgington, T. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Liver+transplantation+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Surg.+Forum%22%5BJournal%5D)">Liver transplantation in the rat.</a> Surg. Forum. 17, 220-222 (1966).</li>
<li>Hess, F., Willemen, A., Jerusalem, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Auxiliary+liver+transplantation+in+the+rat%2C+influence+of+the+condition+of+the+recipient%27s+liver+on+the+fate+of+the+graft%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+Surg.+Res%22%5BJournal%5D)">Auxiliary liver transplantation in the rat, influence of the condition of the recipient's liver on the fate of the graft.</a> Eur. Surg. Res. 9, 270-279 (1977).</li>
<li>Aguirrezabalaga, J., Arnal, F., Marini, M., Centeno, A., Fernandez-Selles, C., Rey, I., Gomez, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Auxiliary+liver+transplantation+with+portal+arterialization+in+the+rat%3A+description+of+a+new+model%5BTitle%5D)+AND+%22Microsurgery%22%5BJournal%5D)">Auxiliary liver transplantation with portal arterialization in the rat: description of a new model.</a> Microsurgery. 22, 21-26 (2002).</li>
<li>Palmes, D., Dietl, K. H., Drews, G., Holzen, J. P., Spiegel, H. U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Auxiliary+partial+orthotopic+liver+transplantation%3A+treatment+of+acute+liver+failure+in+a+new+rat+model%5BTitle%5D)+AND+%22Langenbecks+Arch+Surg%22%5BJournal%5D)">Auxiliary partial orthotopic liver transplantation: treatment of acute liver failure in a new rat model.</a> Langenbecks Arch Surg. (386), 534-541 (2002).</li>
<li>Schleimer, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+microcirculation+of+a+liver+graft+by+controlled+portal+vein+arterialization%5BTitle%5D)+AND+%22J+Surg+Res%22%5BJournal%5D)">Improved microcirculation of a liver graft by controlled portal vein arterialization.</a> J Surg Res. 116 (2), 202-210 (2004).</li>
<li>Schleimer, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Portal+hyperperfusion+causes+disturbance+of+microcirculation+and+increased+rate+of+hepatocellular+apoptosis%3A+investigations+in+heterotopic+rat+liver+transplantation+with+portal+vein+arterialization%5BTitle%5D)+AND+%22Transplant+Proc%22%5BJournal%5D)">Portal hyperperfusion causes disturbance of microcirculation and increased rate of hepatocellular apoptosis: investigations in heterotopic rat liver transplantation with portal vein arterialization.</a> Transplant Proc. 38 (3), 725-729 (2006).</li>
</ol>

Tous les auteurs déclarent aucun conflit d&#39;intérêts.

La première transplantation hétérotopique auxiliaire de foie de rat a été décrite par Lee et al., 16 en 1966, suivi par Hess. 17 La veine porte du greffon a été anastomosée avec la veine porte du destinataire. Au cours de cette procédure, l&#39;alimentation en sang de la veine porte vers le foie natif est compromise. En 1991, Hong effectuée HALT avec le PVA par l&#39;artère iliaque du destinataire. 13 Sans régulation du débit sanguin portal massive e...

Insuffisance hépatique aiguë pose un grave problème dans la médecine clinique conduisant à un taux de mortalité de 60-80%. 8 En cas d&#39;insuffisance hépatique aiguë, la transplantation hépatique auxiliaire est une thérapie alternative prometteuse pour combler la phase aiguë. Le foie natif est laissée à régénérer et à la suite de la régénération, les médicaments immunosuppresseurs peuvent être interrompues. En conséquence, la greffe devient atrophique. Cependant la technique opératoire de transplantation hépatique auxiliaire est encore discutée. 1-3 Dans ce contexte, Terpstra a signalé le manque d&#39;espace pour la greffe, le sang portail voler phénomène et le problème de la congestion veineuse et le drainage 9-10 la veine porte du donneur. a été anastomosée fin à côté de la veine porte du destinataire. Cela a abouti à la concurrence de flux portail entre le greffon et le foie natif et dans la thrombose de la veine porte. La plupart de ces problèmes techniques peuvent être évitées par l&#39;utilisation de la méthode APOLT (orthotopic implantation des segments auxiliaires). 4 Cependant, cette méthode nécessite des résections extensives à la fois du foie natif et le greffon. 4 En 1998, Erhard et son équipe ont développé la transplantation hétérotopique auxiliaire du foie (HALT) utilisant artérialisation de la veine porte (PVA) (Figure 1 ). Le hile et de la veine porte du foie natif sont respectées avec l&#39;utilisation de cette méthode. Qui n&#39;épargne le destinataire de effets secondaires indésirables tels que la thrombose de la veine porte et de sang portail voler phénomène, qui pourrait perturber la reprise de foie natif. En outre, aucun des résections extensives du foie du foie natif et greffe sont nécessaires pour cette méthode, avec pour conséquence moins de saignements et plus reste la masse totale du parenchyme hépatique pour combler (greffe) et de régénération (de foie natif). Cette technique a montré des résultats prometteurs cliniques initiaux. 5-6 Le but de ce travail expérimental a été le développement d&#39;une technique de HALT avec artérialisation de la veine porte enle rat à des fins de recherche (figure 2). Dans les expériences préliminaires que nous n&#39;avons pas pris en considération la réglementation de la circulation sanguine du portail artérialisé veine, ce qui a entraîné de la congestion de la greffe transplanté après reperfusion et une hémorragie massive de la capsule du foie. 11 Depuis lors, le flux sanguin dans la veine porte artérialisé a été régulée par un stent ayant un diamètre intérieur de 0,3 mm et une longueur de 8 mm. Des expériences pilotes ont montré que le diamètre du stent de 0,3 mm donne un flux de sang en moyenne dans la veine artérialisé qui est dans la fourchette haute physiologique (1,7 +/- 0,4 ml / min / g du poids du foie). 12 Nos résultats sans régulation de la circulation sanguine corrélation avec les résultats de Hong, qui a effectué HALT avec le PVA par l&#39;artère iliaque du destinataire. 13 Dans ses expériences sans régulation du débit sanguin portal massive et congestions sinusoïde s&#39;est produite. Le but de notre vidéo est de dl&#39;étape de emonstrate par cette étape de la technique chirurgicale ne.w expérimental chez le rat. À long terme, la technique proposée peut être utilisée dans les études sur la régénération du foie et de la concurrence inter-foie et portail artérialisation de veine, portail hyperperfusion de la veine et la régulation du débit sanguin portal.

<table><tbody><tr><td>Tressé Soie noir 7-0&nbsp ;</td><td>Ethicon Products</td><td>892100</td><td></td></tr><tr><td>Vicryl 3-0</td><td>Ethicon Products</td><td>J285G</td><td></td></tr><tr><td>Vicryl 4-0</td><td>Ethicon Products</td><td>J284G</td><td></td></tr><tr><td>Ethilon 8-0</td><td>Ethicon Products</td><td>1714G</td><td></td></tr><tr><td>Ethilon 10-0</td><td>Ethicon Products</td><td>7770G</td><td></td></tr><tr><td>Vasofix safety 14G</td><td>B Braun</td><td>2758853</td><td></td></tr><tr><td>Vasofix safety 20G</td><td>B</td><td></td> Cathéter en polyuréthane français 2758818 <td></td></tr><tr><td>2 (0,012"/0,3 mm ID x 0,025"/0,6 mm OD) x 24"/60 cm</td> Technologies <td>d’accès, une division de Norfolk Medical, Inc., Illinois,</td><td>États-Unis Solution CNC-2P</td><td></td></tr><tr><td>HTK, Custodiol</td><td>Dr. Franz K&ouml ; hler Chemie GmbH, Alsbach-H&auml ; hnlein, Allemagne</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Isofluorane 5 %</td><td></td><td></td> <td>Tout générique</td></tr><tr><td>Héparine</td><td></td><td></td><td>Tout générique</td></tr><tr><td>0,9 % sérum physiologique</td><td></td><td></td><td>Tout générique</td></tr><tr><td>Buprénorphine</td><td></td><td></td><td>Tout générique</td></tr></tbody></table>

hétérotopique auxiliaire rat liver transplantation avec un débit régulé veine porte artérialisation dans l&#39;insuffisance hépatique aiguë

Heterotopic Auxiliary Rat Liver Transplantation With Flow-regulated Portal Vein Arterialization in Acute Hepatic Failure

Dans aiguë insuffisance hépatique auxiliaire transplantation hépatique est une approche alternative intéressante. L&#39;objectif est de fournir un soutien temporaire jusqu&#39;à ce que le foie natif ne s&#39;est régénéré. 1-3 Le APOLT méthode, l&#39;implantation orthotopique de segments- auxiliaire évite la plupart des problèmes techniques. Cependant, cette méthode nécessite des résections extensives à la fois du foie natif et le greffon. 4 En 1998, Erhard a développé la transplantation hétérotopique auxiliaire du foie (HALT) utilisant artérialisation de la veine porte (PVA) (figure 1). Cette technique a montré des résultats prometteurs cliniques initiaux. 5-6 Nous avons développé un HALT-technique avec débit régulé PVA chez le rat pour examiner l&#39;influence de PVA de débit régulé sur la morphologie et la fonction du greffon (figure 2). Une greffe du foie réduit à 30% de sa taille originale, a été hétérotopique implanté dans la région rénale droite du destinataire après explantation du rein droit.60; La veine cave infra-hépatique de la greffe a été anastomosée à la veine cave-hépatique du destinataire. Le portail artérialisation de la veine du donneur a été réalisée via l&#39;artère rénale droite du destinataire avec la technique du stent. La régulation du flux sanguin de la veine porte artérialisé a été réalisé avec l&#39;utilisation d&#39;un stent ayant un diamètre intérieur de 0,3 mm. Le tronc coeliaque du greffon était de bout en face anastomosée avec l&#39;aorte du receveur et de la voie biliaire a été implantée dans le duodénum. Une résection subtotale du foie natif a été effectuée pour induire une insuffisance hépatique aiguë. 7 De cette manière, 112 transplantations ont été réalisées. Le taux de survie était de 90% périopératoire et le taux de survie à six semaines était de 80%. Six semaines après l&#39;opération, le foie natif régénéré, montrant une augmentation de poids de 2,3 ± 0,8 g à 9,8 ± 1 g. A cette époque, le poids de la greffe a diminué de 3,3 ± 0,8 g à 2,3 ± 0,8 g. </p&gt; Nous avons pu obtenir des résultats prometteurs à long terme en termes de morphologie et la fonction du greffon. HALT avec débit régulé PVA comble fiable insuffisance hépatique aiguë jusqu&#39;à ce que le foie natif régénère.

La durée moyenne de la transplantation est d&#39;environ 150 min. La durée d&#39;ischémie froide était de 64 +/- 7 min, le temps d&#39;ischémie chaude est inférieure à 25 min. Le taux de survie était de 90% périopératoire et le taux de survie à six semaines était de 80%. La perte de 20% est due à une péritonite en raison de stent dislocation et la fuite biliaire (quatre animaux) au cours de la première semaine post-opératoire et en raison de la pneumonie, abcès intra-abdominal et iléus (sept...

Transplantation hépatique auxiliaire fournit un support temporaire en insuffisance hépatique aiguë, jusqu&#39;à la régénération du foie défaillant. La transplantation hétérotopique auxiliaire du foie (HALT) avec artérialisation de la veine porte (PVA) rend une fonction hépatique suffisante. Nous avons développé une technique analogue chez le rat afin d&#39;examiner l&#39;influence de l&#39;artérialisation de la veine sur la morphologie et la fonction de la greffe.

Hétérotopique auxiliaire Rat Liver Transplantation avec un débit régulé veine porte artérialisation dans l&#39;insuffisance hépatique aiguë

In acute hepatic failure auxiliary liver transplantation is an interesting alternative approach. The aim is to provide a temporary support until the ...

L'insuffisance hépatique aiguë constitue un problème grave en médecine clinique, entraînant un taux de mortalité de 60 à 80 % dans les cas d'insuffisance hépatique aiguë. La transplantation hépatique auxiliaire représente une thérapie alternative prometteuse. Après la régénération du foie natif, la suppression immunitaire peut être interrompue et la greffe hépatique peut être retirée ou laissée en voie d'atrophie.Cependant, la technique opératoire de la transplantation hépatique auxiliaire est controversée. La méthode APOL, qui consiste en l'implantation orthotopique de segments auxiliaires, évite la plupart des problèmes techniques pouvant survenir. Toutefois, cette méthode nécessite des résections étendues à la fois du foie natif et du greffon.En 1998, Erhart et son équipe ont initié la transplantation hétérotopique du foie auxiliaire appelée HALT. En utilisant une artérialisation de la veine porte appelée PVA, cette technique a montré des résultats cliniques initiaux prometteurs. Nous avons mis au point une technique HALT avec artérialisation régulée du flux de la veine porte chez le rat à des fins de recherche. Cette vidéo illustre en détail cette nouvelle technique expérimentale. Vingt-deux rats mâles syngéniques de souche Louis, pesant de 250 à 350 grammes, ont été opérés.Les interventions sur le donneur et le receveur ont été réalisées sous anesthésie inhalatoire. L'anesthésie générale des animaux a été induite par du fluorure d'oph dans une boîte en plexiglas reliée au matériel d'anesthésie, avec un débitmètre d'oxygène réglé à un litre par minute. Le vaporisateur était réglé à une concentration de 5 % de fluorure.L'anesthésie a été maintenue à 1,5 %. L'approbation du comité d'éthique local a été obtenue pour toutes les expériences, qui ont été réalisées conformément aux lignes directrices sur la protection des animaux. Pendant l'opération suivante, la veine porte est artérialisée par l'artère rénale droite.Le débit sanguin dans la veine porte artérialisée est régulé par un stent ayant un diamètre interne de 0,3 millimètre et une longueur de huit millimètres. Des expériences préliminaires avaient montré qu'un diamètre de stent de 0,3 millimètre produit un débit sanguin moyen dans la veine porte artérialisée qui se situe dans la plage supérieure de la gamme physiologique.La microcirculation hépatique est visualisée par imagerie OPS, une technique de spectroscopie de réflexion qui permet l'observation en temps réel de la microcirculation hépatique in vivo. Sans utiliser d'agents de contraste et sous immersion au sérum physiologique, la sonde est positionnée délicatement sur la surface du lobe hépatique droit. Il est important ici de ne pas comprimer le parenchyme hépatique.L'opération du donneur est démontrée d'abord après laparotomie médiane. Le lobe latéral gauche et le lobe médian de la greffe sont résectés comme décrit par Higgins. Ici, vous voyez la préparation du ligament hépato-duodénal.Le canal biliaire est d'abord ligaturé afin d'induire une congestion et une dilatation du canal biliaire fin. La veine et l'artère gastroduodénales sont ligaturées et sectionnées. Ensuite, le tronc CIC, l'artère hépatique commune, l'artère gastrique gauche et l'artère splénique sont isolés par la suite.L'artère gastrique gauche et l'artère splénique sont sectionnées. Ici, vous voyez le tronc CIC et ici l'artère hépatique commune. Le canal biliaire congestionné est incisé et un stent de calibre 20 est introduit à l'intérieur.Le positionnement du stent doit assurer le drainage de tout le système des canaux biliaires de la veine cave. Le canal biliaire est sectionné en aval du stent. Le segment infra-hépatique de la veine cave est isolé juste au-dessus de la veine rénale droite.Ici, vous voyez le foie après la préparation, après la ligature de l'aorte au-dessus du tronc coeliaque. La veine porte est clampée et incisée. Le cathéter de perfusion est maintenant introduit et la perfusion est réalisée avec 30 millilitres de solution d'histidine-tryptophane-kéto-glutarate.Le diaphragme et la veine cave sus-hépatique sont sectionnés pour permettre l'écoulement du sang. Le tronc CIC ainsi qu'un patch aortique sont excisés et rincés avec une solution d'histidine, de tryptophane et de kéto-glutarate. La veine cave infrahépatique est sectionnée juste au-dessus de la veine rénale droite.Ensuite, un stent de 0,3 millimètre de diamètre est placé dans la veine porte et fixé à l’aide du ligature. La veine porte est sectionnée en aval du stent. Ici, vous voyez le canal biliaire, la veine porte, le tronc cœliaque et la veine cave infra-hépatique.Après la ligature de la veine cave sus-hépatique, celle-ci est sectionnée avec une manchette de diaphragme. Le greffon est explanté et conservé dans une solution d'histidine-tryptophane-cétoglutarate à quatre degrés Celsius, dans un sac en plastique placé sur de la glace. Des points de suture sont placés dans la veine cave infra-hépatique. L'opération du receveur est ensuite démontrée.Après la laparotomie et la préparation, la veine cave infra-hépatique et l'artère rénale droite sont d'abord isolées. Ensuite, l'uretère est ligaturé et sectionné. Une fois l'artère rénale droite clampée à son origine, la veine rénale droite est ligaturée.Ensuite, après la section des deux vaisseaux rénaux, une néphrectomie est réalisée. Par la suite, l'artère rénale droite est raccourcie et rincée avec une solution saline héparinée après la ligature proximale et distale de la veine cave infrahépatique. La veine rénale droite est sectionnée en amont de la ligature.De cette manière, un lumen ovalaire est créé dans la veine cave infra-hépatique. La greffe est placée sous le foie natif. La veine cave infra-hépatique du donneur est anastomosée bout à côté à la veine cave du receveur à l’aide d’un point continu en polypropylène 8/0.Après rinçage avec une solution de sérum salé hépariné, le stent dans la veine porte est introduit dans l'artère rénale droite. La veine porte et l'artère rénale sont reliées par deux points de suture. L'utilisation d'un stent ayant un diamètre intérieur de 0,3 millimètres et une longueur de huit millimètres permet une anastomose artério-veineuse avec un débit normalisé et des débits d'entrée régulés.Le stent de liaison est fixé dans l'artère rénale à l'aide d'un ligature afin de permettre la reperfusion. On retire d'abord la pince artérielle, puis les deux pinces veineuses. Vous observez maintenant la microcirculation au moment de la reperfusion, qui débute au niveau des vaisseaux interlobulaires, progresse le long des sinusoides et atteint la veine centrale du lobule hépatique.Ici, vous voyez maintenant la greffe reperfusée, la veine porte artérialisée et le canal biliaire. L'aorte infrarénale est préparée, puis clampée et incisée. Une anastomose termino-latérale entre l'aorte et le tronc cœliaque à l'aide d'un patch aortique est réalisée par une suture continue en polyéthylène 10/0.Après l'application d'un point de suture en boutonnière, une petite incision est pratiquée dans la paroi duodénale. Le canal biliaire mis sous stent est ensuite introduit dans le duodénum et le point de suture en boutonnière est resserré. Enfin, le duodénum et le canal biliaire sont maintenus fermement ensemble à l’aide de deux points de suture.Ici, vous voyez la greffe reperfusée et le foie natif qui avait été partiellement résecté pour imiter une insuffisance hépatique aiguë. Les animaux ont reçu une injection postopératoire de buprénorphine par voie sous-cutanée toutes les huit à douze heures, pendant deux jours.Le taux de survie péri-opératoire était de 90 % et le taux de survie à six semaines était de 80 %. Au cours de la première semaine postopératoire, quatre rats sont décédés d'une péritonite due à un déplacement du stent et à une fuite biliaire. De plus, sept rats sont décédés d'une pneumonie, d'un abcès intra-abdominal ou d'un iléus. Les animaux survivants étaient en excellent état général.Six semaines après l'opération, les paramètres de synthèse hépatique étaient dans les limites normales. Voici les scientifiques six semaines après une transplantation hétérotopique de foie auxiliaire chez le rat avec artérialisation de la veine porte. Six semaines après l'opération, le foie natif s'est régénéré, montrant une augmentation de poids passant de 2,3 ± 0,8 gramme à 9,8 ± 1 gramme.À ce stade, le GRAT était atrophique et le poids du foie avait diminué, passant de 3,3 ± 0,8 gramme à 2,3 ± 0,8 gramme. Le poids total des deux foies se situait dans le rapport physiologique entre le poids du foie et le poids corporel, observé lors de la coloration histopathologique à l'éosine hématine six semaines après l'arrêt. Des hépatocytes normaux ont été observés, sans œdème ni dégénérescence graisseuse.Tous les graphiques ont montré une légère prolifération de la bile, du tissu ductal et de la cholangite en raison de la formation de limon. Seulement dans deux graphiques pouvait-on observer une nécrose hépatocytaire interstitielle de bas grade aux UTS. L'utilisation d'un stent ayant un diamètre intérieur de 0,3 millimètre et une longueur de huit millimètres donne un débit sanguin portel moyen après reperfusion de la veine porte artérialisée, qui se situe dans la plage supérieure de la gamme physiologique.Le drainage biliaire est le talon d'Achille de la transplantation hépatique. Dans la transplantation hépatique chez le rat, les receveurs meurent souvent durant les premiers jours postopératoires en raison de fuites biliaires et de péritonite. Nous réalisons une ostomie colo-dochoïde à l'aide d'un stent, d'une suture sur fil, et de deux points supplémentaires qui la fixent afin d'éviter les fuites et les déconnexions.Avec cette technique, les complications biliaires ont été réduites à 4 %. Dans la présente étude, une résection subtotale du foie natif a été réalisée. Nous utilisons cette méthode, initialement décrite par Amond, pour induire une insuffisance hépatique aiguë. Contrairement à l'administration d'agents hépatotoxiques, cette méthode est standardisée et ne présente aucun effet secondaire sur les autres systèmes organiques ou sur la greffe.Contrairement à la greffe hépatique orthotopique, il n’existe pas de phase hépatique terminale. Lors de la greffe hépatique hétérotopique, l’anastomose peut être réalisée sans pression temporelle. De plus, en position hétérotopique, il n’y a aucune interférence due au diaphragme en mouvement.De plus, la veine porte du receveur n'est pas clampée, évitant ainsi une congestion veineuse de l'intestin grêle, de la rate, du pancréas et de l'estomac. Grâce à cette technique, nous avons pu obtenir des résultats à long terme prometteurs en ce qui concerne le greffon, la morphologie et la fonction, dans le cadre d'une transplantation hétérotopique auxiliaire de foie de rat avec régulation du flux porte. La veine artérielle est une technique innovante qui présente peu d'écueils et est facile à apprendre.Cette technique convient pour étudier l'effet de l'hypertension portale, de l'hypertension artérielle hépatique et de la régulation du flux sanguin sur la fonction et la morphologie de la microcirculation hépatique. Ce modèle permet des études futures sur la régénération hépatique dans le cadre de la compétition entre foies.

heterotopic-auxiliary-rat-liver-transplantation-with-flow-regulated

Research

Recherche

JoVE Journal

Medicine

Médecine

Nous présentons une révision facile à mettre en place de la classique à deux revers technique pour la transplantation hépatique chez le rat.

Une transplantation hépatique orthotopique chez le rat

Transplantation hépatique orthotopique chez le rat est un modèle expérimental indispensable pour la recherche biomédicale. Nous présentons ici nos procédures chirurgicales de transplantation hépatique orthotopique chez le rat à la reconstruction de l'artère hépatique à l'aide d'une greffe partielle de 50%.

Interventions chirurgicales pour un modèle de rat de transplantation hépatique orthotopique partielle avec reconstruction artérielle hépatique

La recherche expérimentale sur les animaux joue un rôle central dans le développement de la pratique clinique de la transplantation. Le modèle de transplantation hépatique orthotopique porcine (OLTx) ressemble beaucoup aux conditions humaines et est fréquemment utilisé dans la recherche clinique. Le protocole suivant contient toutes les informations nécessaires pour un modèle OLTx porcin fiable utilisant un shunt porto-caval-jugulaire actif.

Technique de porc approvisionnement du foie et la transplantation orthotopique utilisant un Active Porto-Caval Shunt

Nous décrivons une nouvelle technique de transplantation cœur-poumon abdominale hétérotopique (HAHLT) chez le rat. La configuration de la greffe entraîne une circulation du greffon partiellement chargée, ce qui permet une évaluation fonctionnelle directe. Ce modèle peut être utilisé pour des études aiguës ou chroniques de la fonction et de l’état immunologique du greffon transplanté.

Rat Heterotopic abdominale Coeur / Transplantation pulmonaire simple dans une configuration de volume chargé

Ici, un protocole impliquant une transplantation hépatique partielle rat re-artérialisé est présenté. Plus précisément, 70 % foie a été réséquée en vivo en utilisant une technique de mise à jour d’une hépatectomie axée sur le navire. L’artère hépatique a été reconstruite d’une manière d’extrémité à l’autre. La technique de Brassard a été modifiée pour raccourcir le temps de l’abouchement de la veine cave infrahepatic.

Re-artérialisé Transplantation de foie partielle de Rat in vivo axée sur le navire 70 % hépatectomie

La reconstruction de la veine sus-hépatique (SHVC) reste une étape difficile dans une transplantation hépatique orthotopique rat. Dans cet article, nous montrons un protocole étape par étape pour la reconstruction de SHVC chez le rat en utilisant une technique nouvelle anastomose magnétique.

Un modèle de Rat de la Orthotopic Transplantation hépatique en utilisant une Technique nouvelle anastomose magnétique pour la Reconstruction de veine sus-hépatique

Le but de cette étude est de modifier le modèle de greffe du foie orthotopique de rat pour mieux représenter la transplantation de foie humain et améliorer la survie des receveurs. La méthode présentée rétablit l’afflux artériel hépatique en reliant l’artère hépatique commune du foie de donneur à l’artère hépatique appropriée du foie de destinataire.

Complications réduites après reconnexion artérielle dans un modèle de rat de transplantation orthotopique de foie

Cet article fournit une description détaillée de la façon de construire un modèle animal de la phase anhépatique (ischémie hépatique) chez les rats pour faciliter la recherche fondamentale sur les lésions ischémiques-reperfusion après la transplantation hépatique.

Lésion d’ischémie-reperfusion d’organe en simulant des changements hémodynamiques dans le modèle de greffe de foie de rat

Le protocole de greffe hépatique auxiliaire hétérotopique de rat décrit ici offre un outil d’investigation pratique pour explorer les mécanismes de rejet de l’allogreffe hépatique. Ce modèle permet d’atténuer les obstacles chirurgicaux et le stress animal de la transplantation hépatique orthotopique chez le rat.

Modèle de greffe de foie entier auxiliaire hétérotopique utilisant une hépaticourétérostomie pour des études de rejet d’allogreffe

Le manuscrit décrit les étapes nécessaires pour effectuer la transplantation cardiaque hétérotopique chez la souris.

Murin de transplantation cardiaque hétérotopique Technique

Découvrez la transplantation hétérotopique auxiliaire du foie chez le rat avec artérialisation régulée de la veine porte pour l'insuffisance hépatique aiguë. Cette technique innovante permet d'étudier la régénération hépatique.

Hétérotopique auxiliaire Rat Liver Transplantation avec un débit régulé veine porte artérialisation dans linsuffisance hépatique aiguë (Vidéo) | JoVE Journal

Hétérotopique auxiliaire Rat Liver Transplantation avec un débit régulé veine porte artérialisation dans l'insuffisance hépatique aiguë

Explorer plus de vidéos