September 13th, 2014
Transplantation hépatique auxiliaire fournit un support temporaire en insuffisance hépatique aiguë, jusqu'à la régénération du foie défaillant. La transplantation hétérotopique auxiliaire du foie (HALT) avec artérialisation de la veine porte (PVA) rend une fonction hépatique suffisante. Nous avons développé une technique analogue chez le rat afin d'examiner l'influence de l'artérialisation de la veine sur la morphologie et la fonction de la greffe.
L’insuffisance hépatique aiguë pose un grave problème en médecine clinique entraînant un taux de mortalité de 60 à 80 % dans l’insuffisance hépatique aiguë. La transplantation hépatique auxiliaire est une thérapie alternative prometteuse. Après la régénération du foie natif, l’immunosuppression peut être interrompue et le greffon hépatique peut être explanté ou laissé à l’atrophie.
Cependant, la technique opératoire de la transplantation hépatique auxiliaire est controversée. La méthode APOL, c’est-à-dire l’implantation orthotopique de segments auxiliaires, permet d’éviter la plupart des problèmes techniques qui pourraient survenir. Cependant, cette méthode nécessite des résections étendues du foie natif et du greffon.
En 1998, Erhart et son équipe ont lancé la transplantation hépatique auxiliaire hétérotopique appelée halt. En utilisant la veine porte artérielle appelée PVA, cette technique a montré des résultats cliniques initiaux prometteurs. Nous avons développé une technique d’arrêt avec une veine porte artérielle régulée par le flux chez le rat à des fins de recherche. Cette vidéo illustre en détail cette nouvelle technique expérimentale : 224 Syngen mâle, Louis frats, pesant 250 à 350 grammes, ont été opérés.
Les opérations du donneur et du receveur ont été réalisées sous anesthésie par inhalation. L’anesthésie générale des animaux a été induite avec de l’oph fluorine dans une boîte en plexiglas reliée à l’appareil d’anesthésie à un débit d’oxygène d’un litre par minute. Le vaporisateur avait une concentration de 5 % de fluor.
L’anesthésie a été maintenue à 1,5 % L’approbation du comité d’éthique local a été obtenue pour toutes les expériences, qui ont été réalisées conformément aux directives de protection des animaux. Lors de l’opération suivante. La veine porte est artérialisée via l’artère rénale droite.
Le flux sanguin dans la veine porte artérialisée est régulé par une puanteur ayant un diamètre intérieur de 0,3 millimètre et une longueur de huit millimètres. Des expériences pilotes avaient montré qu’un diamètre de stent de 0,3 millimètre produisait un débit sanguin moyen dans la veine porte artérialisée. C’est dans la fourchette physiologique supérieure.
La microcirculation hépatique est visualisée par imagerie OPS, une technique de spectroscopie par réflexion qui permet d’observer en temps réel la microcirculation hépatique in vivo. Sans l’utilisation d’agents de contraste dans le cadre d’une immersion physiologique dans une solution saline, la sonde est positionnée doucement à la surface du lobe hépatique droit. Il est important ici de ne pas comprimer le parenchyme hépatique.
L’opération du donneur est démontrée en premier après la laparotomie médiane. Le lobe latéral gauche et le lobe médian du greffon sont réséqués comme décrit par Higgins. Ici, vous voyez la préparation du ligament hépato duodénal.
Le canal biliaire est ligaturé en premier afin d’induire la congestion et la dilatation du petit canal biliaire. La veine gastroduodénale dans l’artère est ligaturée et transectée. Ensuite, le tronc CIC, l’artère hépatique commune, l’artère gastrique gauche et l’artère splénique sont isolés par la suite.
L’artère gastrique gauche et l’artère splénique sont transectées. Ici, vous voyez le tronc CIC et ici l’artère hépatique commune. Le canal biliaire congestionné est incisé et un stent de calibre 20 y est introduit.
Le positionnement du stent doit assurer le drainage de l’ensemble du système de voies biliaires de la butte. Le canal biliaire est transecté distalement à l’endoprothèse. Le segment infra-hépatique de la veine du câble est isolé juste au-dessus de la veine rénale droite.
Ici, vous voyez le tus après la préparation, après la ligature de l’aorte au-dessus du tronc cœliaque. La veine porte est serrée et incisée. Le cathéter de perfusion est maintenant introduit et la perfusion est réalisée avec 30 millilitres de solution de colle d’histidine tryptophane gito.
Le diaphragme et la veine du câble suphépatique sont une incision pour permettre au purate de s’écouler. Le tronc CIC ainsi qu’un patch aortique sont excisés et rincés avec une solution de kétoglutarate de tryptophane d’histidine. La veine du câble infra-hépatique est transectée juste au-dessus de la veine rénale droite.
Ensuite, un stent d’un diamètre de 0,3 millimètre est placé dans la veine porte et fixé avec la ligature. La veine porte est transmise distalement au Scent. Ici, vous voyez le canal biliaire, la veine porte, le tronc cœliaque et la veine Caval infra hépatique.
Après ligature de la veine cave supra-hépatique, elle est transectée avec une coiffe du diaphragme. Le greffon est explanté et stocké dans une solution de kétoglutarate d’histidine tryptophane à quatre degrés Celsius Dans un sac en plastique sur un coin de glace, des sutures sont placées dans la veine cave infra hépatique. L’opération du destinataire est ensuite illustrée.
Après laparotomie et préparation, la veine cave infra hépatique, l’artère rénale droite est d’abord isolée. Ensuite, l’uretère est ligaturé et transecté. Après que l’artère rénale droite ait été clampée à son origine, la veine rénale droite est ligaturée.
Ensuite, après la section des deux vaisseaux rénaux, la néphrectomie est effectuée. Par la suite, l’artère rénale droite est raccourcie et rincée avec une solution saline d’héparine après clampage proximal et distal de la veine du câble infra hépatique. La veine rénale droite est transectée proximale à la ligature.
De cette manière, une lumière ovale est créée dans la veine du câble infra-hépatique. Le greffon est placé sous le foie natif. La veine du câble infra hépatique du donneur est anastomose d’un bout à l’autre de la veine du câble du receveur avec une suture courante à huit oh d’éthylène.
Après le rinçage avec une solution saline d’héparine, le stent dans la veine porte est introduit dans l’artère rénale droite. La veine porte et l’artère rénale sont reliées par deux points de suture. L’utilisation d’un stent d’un diamètre intérieur de 0,3 millimètre et d’une longueur de huit millimètres permet une anastomose veineuse artérielle avec des débits d’entrée normalisés et régulés.
Le stent de liaison est fixé dans l’artère rénale à l’aide d’une ligature pour permettre la reperfusion. La pince artérielle est d’abord retirée, suivie des deux pinces veineuses. Maintenant, vous voyez la microcirculation au moment de la reperfusion à partir des vaisseaux interlobulaires, se poursuivant le long des sinusoïdes et arrivant à la veine centrale du lobule hépatique.
Ici, vous voyez maintenant le greffon reperfusé, la veine porte artérialisée et le canal biliaire. L’aorte infrarénale est préparée, puis clampée et incisée. Une anastomose latérale entre l’aorte et le tronc cœliaque à l’aide d’un patch aortique est réalisée avec une suture courante à 10 O d’éthylène.
Après l’application d’un cordon de bourse Suture, une petite incision est pratiquée dans la paroi duodénale. Le canal biliaire stent est ensuite introduit dans le duo denim et la suture du cordon de la bourse est resserrée. Enfin, le duodénum et le canal biliaire sont maintenus étroitement ensemble par deux points de suture.
Ici, vous voyez le greffon reperfusé et le foie natif qui avait été sub totalement réséqué pour imiter l’insuffisance hépatique aiguë. Après l’opération, on a injecté de la buprénorphine par voie sous-cutanée aux animaux toutes les huit à 12 heures. Pendant deux jours.
Le taux de survie périopératoire était de 90 % et le taux de survie à six semaines était de 80 %Au cours de la première semaine postopératoire, quatre rats sont morts d’une péritonite due à une luxation de l’endoprothèse et à une fuite biliaire. De plus, sept rats sont morts d’une pneumonie, d’un abcès intraabdominal ou d’un iléus. Les animaux survivants étaient en excellent état général.
Six semaines après l’opération, les paramètres de synthèse hépatique se situaient dans la plage normale. Ici, vous voyez les scientifiques six semaines après une greffe de foie de rat auxiliaire hétérotopique avec veine porte artérielle. Six semaines après l’opération, le foie natif s’est régénéré, montrant une augmentation du poids de 2,3 plus ou moins 0,8 grammes à 9,8 plus ou moins un gramme.
À ce moment-là, le GRAT était atrophique et le poids du foie est passé de 3,3 plus ou moins 0,8 gramme à 2,3 plus ou moins 0,8 gramme. Le poids total des deux foies se situait dans le rapport physiologique entre le poids du foie et le poids corporel dans la coloration histopathologique à l’hématine eoin six semaines après l’arrêt. Des hépatocytes réguliers ont été observés, sans œdème ni dégénérescence graisseuse.
Tous les graphiques ont montré une légère prolifération de la bile, de la ductile et de la cholangite due à la formation de boues. Ce n’est que dans deux graphiques que l’on a pu observer une nécrose hépatocellulaire entre les CTUs de bas grade. L’utilisation d’un stent d’un diamètre intérieur de 0,3 millimètre et d’une longueur de huit millimètres permet d’obtenir un débit sanguin porte moyen après reperfusion de la veine porte artérialisée, c’est-à-dire dans la plage physiologique supérieure.
Le drainage biliaire est le talon d’Achille de la transplantation hépatique. Dans la transplantation hépatique de rat, les receveurs meurent souvent dans les premiers jours postopératoires en raison de fuites biliaires et de péritonite. Nous effectuons la colo doho od stomie à l’aide d’un stent, d’une suture par fil et de deux points de suture supplémentaires qui le sécurisent contre les fuites et la déconnexion.
Avec cette technique, les complications biliaires ont été réduites à 4 %. Nous utilisons cette méthode décrite pour la première fois par amond pour induire une insuffisance hépatique aiguë. Contrairement à l’application d’agents hépatotoxiques, cette méthode est standardisée et ne montre aucun effet secondaire sur d’autres systèmes organiques ou sur le greffon.
Contrairement à la transplantation hépatique orthotopique, il n’y a pas de phase hépatique finale. Lors de la transplantation hépatique hétérotopique, l’Anas peut être réalisé sans aucune pression temporelle. De plus, en position hétérotopique, il n’y a pas d’interférence par le diaphragme en mouvement.
De plus, la veine porte du receveur n’est pas clampée, évitant ainsi la congestion veineuse de l’intestin grêle, de la rate, du pancréas et de l’estomac. Avec cette technique, nous avons pu obtenir des résultats prometteurs à long terme en termes de greffe, de morphologie et de fonction, transplantation hépatique auxiliaire hétérotopique de rat avec porte régulée en flux. La veine artérielle est une technique innovante qui offre peu d’écueils et qui est facile à apprendre.
Cette technique convient pour étudier l’effet de la veine porte, de l’hyperperfusion hépatique artérielle et de la régulation du flux sanguin sur la fonction et la morphologie de la microcirculation hépatique. Ce modèle permet de futures études sur la régénération hépatique en compétition inter hépatique.
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L'insuffisance hépatique aiguë est une condition critique avec des taux de mortalité élevés, et la transplantation hépatique auxiliaire offre une solution potentielle en soutenant la fonction hépatique jusqu'à la régénération. Cette étude explore une nouvelle technique chez les rats impliquant une transplantation hépatique auxiliaire hétérotopique avec artérialisation de la veine porte pour évaluer son impact sur la morphologie et la fonction du greffon.
Heterotopic auxiliary rat liver transplantation with flow-regulated portal vein arterialization (PVA) provides a robust preclinical model for studying acute hepatic failure and liver regeneration. This technique enables controlled investigation of graft function, microcirculation, and regeneration dynamics, supporting predictive confidence in translational liver research. Its reproducibility and physiological relevance position it as a valuable tool for early discovery and mechanistic de-risking in hepatic disease pipelines.
This model integrates into the discovery-to-preclinical continuum for hepatic disease research, bridging mechanistic studies and translational validation.