Trace conditionnement de la peur chez la souris

L’objectif global de l’expérience suivante est d’évaluer l’apprentissage et la mémoire dépendants de l’hippocampe chez la souris en utilisant le conditionnement des sphères de traces. Ceci est réalisé en entraînant d’abord l’animal à associer un ton auditif à un stimulus aversif. Le lendemain, l’animal est placé dans un nouveau contexte et le comportement de congélation est enregistré en réaction au ton.

Le troisième jour, l’animal est ramené dans son contexte d’origine et le comportement de congélation est enregistré. Les résultats montrent que les souris entraînées avec l’appariement de tonalités de choc affichent un comportement de congélation plus important que celles qui ne reçoivent pas de choc. Cette méthode peut être utilisée pour fournir des informations sur l’apprentissage dépendant de l’hippocampe, la mémoire et les souris, et est particulièrement utile lorsqu’elle est utilisée dans l’étude des animaux transgéniques et knock-out.

La procédure suivante est effectuée dans une chambre de conditionnement de la peur logée à l’intérieur d’une chambre d’atténuation du bruit plus grande. Avec la porte de la chambre fermée, les lumières atteignent le niveau d’éclairage souhaité si elles sont correctement placées, le voyant de niveau de lumière doit être éteint. Utilisez un sonomètre pour confirmer un niveau constant de bruit de fond à l’intérieur de chaque chambre.

Ensuite, calibrez le ton utilisé pendant l’entraînement. Utilisez un appareil d’étalonnage externe pour calibrer le niveau de choc. Placez une mine sur une barre et trois ou quatre autres barres par-dessus.

Utilisez le générateur de chocs pour administrer le choc et calibrer jusqu’à ce que le bon niveau soit atteint. Répétez cette étape pour chaque chambre de conditionnement de la peur. Une fois l’appareil préparé, transférez les sujets dans une salle d’attente séparée de la salle d’essai afin de réduire les manipulations excessives.

Avant de tester, étiquetez les queues au moins 30 minutes avant le test ou la veille. Lorsque vous êtes prêt à commencer, transférez la souris de test dans une cage propre et étiquetée pour le transport vers la chambre de conditionnement de la peur. Placez la souris dans la chambre, fermez la porte et démarrez le logiciel.

Le premier jour de l’entraînement, les souris sont autorisées à explorer la chambre pendant trois minutes. Le logiciel présente alors une 22e tonalité, suivie d’un intervalle de trace 22e qui se termine par un léger choc au pied. Observez le sujet pour confirmer qu’il a reçu les stimuli aversifs.

Un 202e intervalle entre les essais sépare cinq essais de conditionnement. Après les essais, laissez l’animal rester dans la chambre d’essai pendant une minute avant de le retirer, remettez-le dans la cage de transfert et retournez dans la salle d’attente. S’il y a d’autres souris à tester individuellement dans leur cage domestique, hébergez la souris jusqu’à ce que toutes les souris aient terminé les tests.

Nettoyez la chambre d’essai avec de l’isopropanol à 30 % en prévision du prochain animal. Répétez ces étapes jusqu’à ce que toutes les souris aient été entraînées. Renvoyez toutes les souris dans leur salle de colonie.

Après que la dernière souris de la cohorte ait été testée le lendemain, les animaux sont testés. Pour la mémoire de la peur de la trace. Ce jour-là, remplacez la litière des cages de transfert par du papier déchiqueté pour changer leur contexte.

Le contexte de la Chambre a également changé. Placez une feuille de mousse sous un insert acrylique transparent sur le sol pour modifier sa texture et son apparence. Placez un séparateur en acrylique à l’intérieur de la zone d’essai.

Changez l’odeur en plaçant l’extrait de vanille dans un bateau de lactosérum sous le sol. Insérez ce jour-là, nettoyez la chambre avec 70 % d’éthanol au lieu de 30 % d’isopropanol entre chaque souris. Lorsque vous êtes prêt, placez la souris dans la chambre d’essai et démarrez le programme.

La session commence par une période de référence de deux minutes suivie de trois présentations du 22e ton. Il y a un 222e intervalle entre les essais entre chaque présentation de tonalité. Une fois la séance terminée, retournez les souris dans leur cage d’origine et continuez jusqu’à ce que tous les animaux aient été testés en vue du test du lendemain.

Restaurez le même contexte que celui utilisé le premier jour. Nettoyez la chambre avec 30 % d’isopropanol. Le conditionnement contextuel est effectué le troisième jour.

À l’aide des mêmes cages de transfert que le premier jour, récupérez la souris de test dans la salle d’attente. Placez la souris dans la chambre de test, puis démarrez le programme de test de la mémoire contextuelle. Exécutez un programme pour enregistrer le comportement de gel pendant huit minutes.

Après ce temps, retournez la souris dans sa cage d’origine et continuez les tests Comme indiqué précédemment, les résultats représentatifs montrent une augmentation du comportement de congélation chez les animaux recevant l’appariement de tonalités de choc au cours de la séance d’entraînement. Dans un nouveau contexte, les souris qui ont reçu le stimulus de choc aversif ont eu plus de congélation que les souris qui n’ont pas reçu le choc pendant la trace du ton de base et l’intervalle entre les essais. Lorsqu’ils sont retournés dans leur contexte d’origine, les animaux recevant le stimulus de choc aversif ont montré un comportement de congélation constamment plus élevé au cours de la période de huit minutes.

Après avoir regardé cette vidéo, vous devriez avoir une bonne compréhension de la façon d’utiliser le conditionnement de la peur à l’état de trace afin de comprendre l’apprentissage dépendant de l’hippocampe et la mémoire et les souris.