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Évaluer le développement de cellules murines dendritiques plasmacytoïdes dans les plaques de Peye...
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Immunology and Infection
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JoVE Journal Immunology and Infection
Assessing the Development of Murine Plasmacytoid Dendritic Cells in Peyer’s Patches Using Adoptive Transfer of Hematopoietic Progenitors

Évaluer le développement de cellules murines dendritiques plasmacytoïdes dans les plaques de Peyer Utiliser le transfert adoptif de progéniteurs hématopoïétiques

Full Text
11,545 Views
13:34 min
March 17, 2014

DOI: 10.3791/51189-v

Haiyan S. Li1, Stephanie S. Watowich1,2

1Department of Immunology,The University of Texas MD Anderson Cancer Center, 2The University of Texas Graduate School of Biomedical Sciences

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Ce protocole décrit les procédures expérimentales pour évaluer la différenciation des cellules dendritiques plasmacytoïdes dans les plaques de Peyer de progéniteurs de cellules dendritiques ordinaires, en utilisant des techniques impliquant l'isolement FACS à médiation cellulaire, le transfert de gène hydrodynamique, et l'analyse des flux de sous-ensembles immuns dans les plaques de Peyer.

L’objectif général de la procédure suivante est d’examiner la capacité des progéniteurs hématopoïétiques purifiés à donner naissance à des cellules dendritiques plasmacytoïdes dans les plaques de pire intestinale lors du transfert adoptif. Ceci est accompli en effectuant d’abord un transfert de gène hydrodynamique du plasmide, codant pour le facteur de croissance cellulaire dendritique. FLIT trois ligand dans le patch de PI plasmacytoïde cellule dendritique souris altérées.

Dans la deuxième étape, les cellules progénitrices dendritiques communes sont isolées de la moelle osseuse de type sauvage par séparation magnétique des billes et tri par flux. Dans la dernière étape, les cellules progénitrices sont transférées adoptivement par injection intraveineuse dans des souris atteintes de cellules dendritiques plasmacytoïdes de bûchers qui ont été traitées par transfert de gènes hydrodynamiques. En fin de compte, la population de cellules dendritiques plasmacytoïdes du patch de PI dérivée de la cellule progénitrice hématopoïétique du donneur peut être évaluée par cytométrie en flux.

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