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DOI: 10.3791/51196-v
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Les bactéries peuvent accumuler des mutations néfastes ou bénéfiques au cours de leur vie. Dans une population de cellules, les individus qui ont accumulé des mutations bénéfiques peuvent rapidement surpasser leurs semblables. Ici, nous présentons une procédure simple pour visualiser la compétition intraspécifique dans une population de cellules bactériennes au fil du temps en utilisant des individus marqués par fluorescence.
Cette méthode utilise la co-culture de bacillus sutilis marqué par fluorescence pour surveiller l’expansion clonale rapide et l’élimination des mutations bénéfiques et nuisibles dans une population cellulaire bactérienne au fil du temps. Tout d’abord, préparez les pré-cultures de bactéries pour l’expérience de compétition. Mélangez des quantités égales des souches marquées par fluorescence et cultivez les bactéries dans différentes conditions nutritionnelles.
Ensuite, collectez les échantillons à différents moments, diluez de manière appropriée et multipliez les cellules sur des plaques de gélose. Visualisez et comptez maintenant les souches survivantes par microscopie à fluorescence stéréoscopique. En fin de compte, les résultats peuvent déterminer le pourcentage de bactéries survivantes par rapport au nombre total de colonies dénombrées.
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