L'échographie diagnostique de souris membrane Fonction

L'imagerie par ultrasons de diagnostic s'est avéré être efficace dans le diagnostic de diverses maladies respiratoires chez les sujets humains et animaux. Nous démontrons un protocole d'échographie complet utilisé par le laboratoire du Dr Zuo pour analyser la cinétique de diaphragme spécifiquement dans les modèles de souris. C'est aussi une technique de recherche non-invasive qui peut fournir des informations quantitatives sur la fonction des muscles respiratoires de la souris.

L’objectif global de cette procédure est de démontrer comment évaluer avec précision la contractilité du diaphragme dans un modèle murin. À l’aide de l’imagerie par ultrasons, les premières étapes consistent à anesthésier la souris et à enlever ses poils abdominaux. Les étapes suivantes consistent à appliquer du gel à ultrasons et à résoudre l’image du diaphragme à l’aide des sondes à ultrasons.

En fin de compte, les résultats peuvent montrer l’excursion du diaphragme et la fréquence respiratoire en utilisant les pieds à coulisse électroniques du logiciel. Le principal avantage de cette technique par rapport aux méthodes existantes comme la myographie invasive, est qu’elle n’est pas invasive et réduit le nombre d’animaux sacrifiés. Les implications de cette technique s’étendent au diagnostic et au traitement potentiel de la dysfonction des muscles respiratoires.

Bien que cette méthode puisse donner un aperçu de la contractilité du diaphragme dans un modèle murin, elle pourrait également être appliquée à d’autres systèmes tels que les modèles cliniques pour évaluer la progression de la maladie et l’efficacité du traitement. Installez une table d’intervention propre avec un tampon isotherme chauffé enveloppé dans une serviette chirurgicale. Le coussin chauffant doit être utilisé pour stabiliser la température centrale de l’animal tout en réduisant le stress potentiel de l’animal.

La souris doit être placée dans la chambre d’induction de l’anesthésie avec un débit d’oxygène réglé à 1,5 litre par minute, et avec 3,5 % de fluor vaporiséLa sédation se règle généralement en deux minutes et se caractérise par une perte de la fonction motrice volontaire. Maintenez ensuite l’état anesthésié par l’administration de gaz du cône nasal. Après l’anesthésie, l’animal applique une petite quantité de pommade ophtalmique directement sur les cornées pour réduire la sécheresse oculaire pendant l’anesthésie.

La souris ne doit jamais montrer le réflexe de retrait de la pédale. Les muqueuses doivent toujours avoir une couleur rose et l’animal doit respirer régulièrement. Fixez chaque patte de la souris anesthésiée sur la table d’intervention chauffée à l’aide d’un adhésif amovible, tel qu’un ruban chirurgical.

À l’aide d’un rasoir électrique, enlevez la plupart des poils sur la surface ventrale du corps entre l’abdomen et à mi-hauteur de la cavité thoracique. Appliquez ensuite une crème dépilatoire pour enlever les poils restants. Après deux à trois minutes, essuyez la crème avec un tampon de gaze humide.

Retirez également l’excès de poils avec de l’eau et de la gaze. Ensuite, nettoyez la région rasée avec quatre gommages d’alcool à 70 % ou un antiseptique équivalent allumez l’appareil à ultrasons. Une sonde micro-convexe ou une sonde linéaire à réseau phasé est idéale en raison de ces sondes, de son faible encombrement et de son excellente résolution axiale.

Ajustez la fréquence des ultrasons sur une plage de 6,5 à 12 mégahertz. Réglez maintenant le mode de la machine, la luminosité et les modes de mouvement ensemble, pour fournir la meilleure image de la contraction du diaphragme. Ensuite, appliquez une petite quantité de gel à ultrasons sur la partie supérieure de l’abdomen et massez le gel vers la cavité thoracique.

Placez le transducteur à ultrasons sur le gel et inclinez-le vers le haut vers le cœur. Ajustez la sonde pour optimiser la résolution de l’image. C’est un défi, mais cela deviendra plus facile avec la pratique.

Il est très important de ne pas oublier de surveiller la respiration de l’animal sous anesthésie, juste pour s’assurer que les résultats de l’examen ne sont pas compromis. Appuyez sur le bouton freeze pour enregistrer temporairement les images du diaphragme et afficher les contractions sélectionnées. Enregistrez l’enregistrement sous forme de boucle cyl, ce qui permet de mesurer ultérieurement l’excursion diaphragmatique et le taux respiratoire.

Après l’imagerie, la souris devrait se remettre complètement de l’anesthésie en 30 minutes. Ne laissez pas l’animal sans surveillance jusqu’à ce qu’il ait repris suffisamment conscience pour maintenir le sternal couché. Pour analyser les données en mode M, mesurez la profondeur et la vitesse du mouvement du diaphragme, de la relaxation à la contraction, à l’aide des pieds à coulisse électroniques qui font partie du logiciel d’échographie.

Alternativement, en mode B, convertissez le fichier de boucle CINA en un fichier MP quatre et déterminez la fréquence respiratoire en comptant le nombre de contractions diaphragmatiques pendant la période d’enregistrement, les pieds à coulisse électroniques peuvent également être utilisés en mode B pour déterminer la profondeur du mouvement du diaphragme. Le diaphragme d’une souris, le déplacement vertical maximal ont été enregistrés et la distance a ensuite été calculée comme décrit par le protocole à l’aide d’un pied à coulisse électronique. De telles mesures ont été effectuées sur trois souris différentes.

À titre d’exemple, c’est après la conversion du fichier de boucle CIL en un fichier MP quatre. La fréquence respiratoire a été déterminée en comptant le nombre de contractions diaphragmatiques pendant une période d’enregistrement de six secondes. Cette analyse a été effectuée en mode B.

Alternativement, le mode M fournissait une image visualisée du mouvement vertical du diaphragme ainsi que de la fréquence respiratoire. Certains artefacts d’imagerie potentiels peuvent se produire lors de l’imagerie par échographie diagnostique, tels que la réverbération. Un autre artefact que l’on peut rencontrer est la présence de contes de comètes Une fois maîtrisée, cette technique peut prendre 20 à 30 minutes si elle est exécutée correctement.

Après avoir regardé cette vidéo, vous devriez avoir une bonne compréhension de la façon d’évaluer avec précision une contractilité du diaphragme dans le modèle de souris à l’aide d’une technique d’imagerie par ultrasons diagnostique.