Évaluation de la performance fonctionnelle dans le MDX Modèle de souris

L’objectif global de ces procédures est de déterminer la fonctionnalité musculaire au moyen de plusieurs tests fonctionnels non préjudiciables. La force des quatre membres peut être évaluée au moyen du test de force de préhension, la coordination de l’équilibre et l’état musculaire peuvent être évalués dans les tests de suspension à deux membres et à quatre membres. La tige du rotor est également utilisée pour évaluer l’équilibre, la coordination et la condition.

La course forcée sur tapis roulant peut être utilisée soit pour exacerber la progression de la maladie, soit, avant un test fonctionnel, pour épuiser les souris. Ces tests fonctionnels peuvent être utilisés pour évaluer de manière fiable le rôle de la génétique et l’effet des composés thérapeutiques potentiels sur les performances musculaires. Le premier test à être montré est le test de force des mâchoires à quatre membres.

Assurez-vous que le réglage du capteur de force est en mode de tension maximale pour la traction et utilisez des grammes lorsque l’appareil réinitialise le compteur au début de chaque enregistrement. Laissez chaque souris tirer trois fois de suite. Saisissez la souris par la queue et déplacez-la horizontalement vers la grille.

Vérifiez que la souris saisit fermement la grille avec ses quatre pattes et tirez pour briser sa prise. La force la plus élevée appliquée à la grille sera affichée sur l’écran des transducteurs, qui peut être enregistré manuellement ou automatiquement. Rejeter tous les essais dans lesquels la souris n’utilise qu’un quatre PA ou les membres postérieurs ou tourne pendant le poteau ou n’a clairement pas montré de résistance au poteau.

Après que la souris ait tiré trois fois, remettez-la dans la cage pendant une période de repos d’au moins une minute. Laissez ensuite la souris effectuer quatre séries de sondages, chacune suivie d’une courte période de repos. De cette façon, la souris tire un total de 15 fois.

L’appareil pour le test de suspension à deux membres est un cintre en métal de deux millimètres d’épaisseur solidement fixé à une étagère avec du ruban adhésif. Maintenez le hangar à 37 centimètres au-dessus d’une couche de litière, en tenant la souris par la queue. Amenez-le près du fil.

Laissez la souris saisir le fil avec les deux quatre pattes seulement et abaisser les membres postérieurs de manière à ce que la souris ne reste suspendue qu’avec les deux quatre pattes sur le fil. Dès que la souris est relâchée, démarrez le minuteur. Après avoir été relâchée, une souris forte essaiera d’attraper le fil avec les quatre membres et la queue, ce qui est autorisé.

Lorsqu’une souris présente un comportement inapproprié, comme se tenir en équilibre sur le fil ou sauter délibérément du fil, replacez immédiatement la souris sur le fil sans arrêter la minuterie. Lorsque les souris sont capables de rester suspendues pendant 600 secondes, retirez-les du fil et remettez-les dans la cage. Lorsque les souris tombent du fil, arrêtez la minuterie et enregistrez directement le temps de suspension.

Testez à nouveau ces souris au maximum deux fois de plus. Pour le test de suspension à quatre membres, placez le couvercle d’une cage à rats à 25 centimètres au-dessus de la litière molle pour empêcher les souris de se blesser en tombant, mais aussi pour décourager les souris de sauter intentionnellement hors de la grille. Ensuite, placez la souris sur la grille de manière à ce qu’elle saisisse la grille avec ses quatre pattes.

Ensuite, inversez la grille de sorte que la souris soit suspendue et démarrez immédiatement la minuterie. Si une souris peut rester suspendue pendant 600 secondes, remettez-la directement dans sa cage. Testez à nouveau toutes les souris qui tombent de la grille avant 600 secondes pour un maximum de deux fois de plus pour la tige du rotor.

Testez, réglez la vitesse initiale à cinq tr/min. Placez ensuite jusqu’à cinq souris sur le tube pendant qu’il tourne lentement. Une fois que toutes les souris sont positionnées, augmentez la vitesse du tube de cinq à 45 tr/min en 15 secondes.

Laissez-le ensuite à 45 tr/min pour le reste de la course. Continuez à surveiller l’exécution tout au long du test. Le temps de fonctionnement est enregistré en continu par le logiciel et s’arrête automatiquement lorsqu’une souris tombe du tube.

Comme cela active la barre de temps positionnée sous le tube. Repositionnez les souris qui tournent sur elles-mêmes pendant la course sans arrêter le tube en rotation. Mettez fin à la session de test pour toutes les souris capables de fonctionner pendant 500 secondes et renvoyez-les dans leur cage.

Donnez des souris qui tombent plus tôt. Un maximum de deux essais de plus pour leur permettre d’améliorer leur temps de course. Pour le test d’effort sur tapis roulant, placez les souris sur un tapis roulant horizontal.

Démarrez le tapis roulant à une vitesse de course de 12 mètres par minute. Lors de la première séance, encouragez les souris à courir en les poussant doucement lorsqu’elles sont près de la fin de la ceinture. Après que les souris aient couru pendant 30 minutes, testez-les immédiatement sur le test de suspension à deux membres ou remettez-les dans leur cage.

La force de préhension des quatre membres des souris MDX femelles de neuf semaines était altérée par rapport aux souris de type sauvage, comme le montre ici. Cependant, la fatigue moyenne était inférieure à 10 % et ne variait pas entre les tensions dans le test de suspension à deux membres effectué une fois par semaine. Les souris MDX mâles et les souris de type sauvage ont montré une courbe d’apprentissage au cours des premières semaines de test.

Cependant, les performances des souris MDX étaient moins bonnes à tout moment par rapport aux souris de type sauvage. Le temps de suspension maximum autorisé de 600 secondes est indiqué par la ligne pointillée. Quatre. La performance de suspension des membres a été évaluée une fois par semaine chez les souris MDX mâles et les souris de type sauvage.

Au fil du temps, les souris MDX sont restées suspendues moins longtemps que les souris de type sauvage. Le temps de fonctionnement de la tige du rotor n’a pas varié entre les jeunes souris MDX mâles et les souris de type sauvage directement après avoir couru sur un tapis roulant pendant 30 minutes. Les souris femelles ont été testées avec le test de suspension à deux membres tandis que toutes les souris de type sauvage sont restées suspendues jusqu’au temps maximum autorisé.

Toutes les souris MDX sont tombées du fil plus tôt. La présence de lésions membranaires a été déterminée en évaluant les taux sériques de créatine kinase qui s’échappent des fibres musculaires par des déchirures de la membrane. Les niveaux de créatine kinase étaient élevés chez les souris MDX par rapport aux souris de type sauvage avant l’exercice et l’exercice sur tapis roulant a augmenté chez les souris MDX alors qu’ils restent faibles chez les souris de type sauvage.

Les muscles des souris MDX sont très vulnérables aux exercices sur tapis roulant. Aggravation de la pathologie de la maladie de manière extensive après quelques semaines de fonctionnement ces colorations h et e des quadriceps de 16 semaines sans exercice et sur tapis roulant exercé. Les souris MDX montrent qu’une fibrose et une nécrose étendues se développent, les muscles des souris de type sauvage subissant le même protocole de course n’ont pas été affectés.

Les différences de fond génétique influencent les performances fonctionnelles, les performances du test de suspension à deux membres différaient significativement entre deux souches de souris MDX. Les résultats du test de suspension à quatre membres étaient légèrement plus élevés dans le contexte mixte. Souris MDX.

Le temps de fonctionnement des tiges du rotor différait également légèrement entre les déformations. Lors de la tentative de cette procédure, il est important de se rappeler de toujours utiliser des groupes suffisamment puissants de souris d’âge et de sexe assortis avec des antécédents génétiques correspondants. Gardez également les conditions expérimentales aussi standardisées que possible.

Par exemple, utilisez le même moment de la journée et le même jour de la semaine, la même pièce et le même expérimentateur.