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DOI: 10.3791/51341-v
Donna Cvetković*1, Cameron Glenn-Franklin Goertzen*1, Moshmi Bhattacharya1,2,3
1Department of Physiology and Pharmacology, Schulich School of Medicine and Dentistry,University of Western Ontario, 2Department of Oncology, Schulich School of Medicine and Dentistry,University of Western Ontario, 3Lawson Health Research Institute
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Cet article fournit des méthodologies détaillées pour l'utilisation de trois dimensions (3D) des essais pour quantifier l'invasion des cellules du cancer du sein. Plus précisément, nous discutons les procédures nécessaires pour mettre en place de tels essais, la quantification et l'analyse des données, ainsi que des méthodes pour examiner la perte de l'intégrité de la membrane qui se produit lorsque les cellules envahissent.
L’objectif global de la procédure suivante est d’évaluer la capacité invasive des cellules cancéreuses à l’aide d’un test d’invasion tridimensionnel. Ceci est accompli en cultivant d’abord des cellules cancéreuses dans une matrice de membrane basale. L’invasion cellulaire de la matrice est ensuite observée pendant cinq jours ou plus par microscopie optique.
Dans la dernière étape, les cellules sont marquées avec des anticorps fluorescents pour la localisation des protéines d’intérêt. En fin de compte, le taux d’invasion des cellules cancéreuses et les changements qui en résultent dans l’expression des protéines peuvent être analysés par microscopie immunofluorescente. Le principal avantage de cette technique par rapport aux techniques existantes telles que le test d’invasion de la chambre Transwell, est que le test d’invasion de gel majeur en 3D imite mieux l’environnement in vivo que le cancer résout en croissance.
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