Name: Heterotopic muqueuse procédure de greffe de médicaments Livraison directe au cerveau chez les souris (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-07-16T14:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 25 s
Description: Apprenez la greffe muqueuse hétérotopique pour la livraison de médicaments au cerveau chez la souris. Cette méthode innovante contourne la barrière hémato-encéphalique pour administrer des thérapeutiques à haut poids moléculaire directement dans le système nerveux central.

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Cette étude a été financée par la Fondation Mcihael J. Fox pour la recherche 2011 Innovations de réaction rapide de Parkinson Programme de bourses. Les bailleurs de fonds n&#39;ont joué aucun rôle dans la conception de l&#39;étude, la collecte et l&#39;analyse des données, la décision de publier, ou de la préparation du manuscrit.

Avant la chirurgie assurez-vous que toutes les procédures à effectuer sont approuvés par IACUC et des autorités éthiques ou juridiques supplémentaires et utilisent des pratiques de traitement sans cruauté des animaux. Cela comprend l&#39;utilisation des conditions de chirurgie stériles, anesthésier la souris en utilisant IACUC méthode approuvée, la lubrification des yeux de souris avec une pommade vétérinaire pendant la chirurgie, et fournir des soins post-opératoires. Ne pas procéder à une chirurgie s&#39;il ya une question de savoir si les aspects de la procédure sont approuvés. Toutes les procédures effectuées ici ont été approuvés par l&#39;Université institutionnel de protection et d&#39;utilisation des animaux Comité Boston. 1. Préparation des animaux et fournitures chirurgicales <ol><li> Autoclave tout instrument chirurgical qui sera utilisé au cours de la chirurgie. </li><li> Assurez-vous que toutes les techniques qui doivent être effectués sont approuvés par les organismes de réglementation animaux. </li></ol> 2. Récolte de la muqueuse du greffon <ol><li> Choisissez une souris génétiquement identiques du même âge quela souris expérimentales et euthanasier dans une méthode IACUC approuvé (ici: l&#39;asphyxie isoflurane suivie par dislocation cervicale). </li><li> Avec des ciseaux chirurgicaux, enlever la peau autour de la région nasale de la tête de la souris exposer le crâne. </li><li> Avec une perceuse pneumatique, marque avec trois lignes de deux qui flanquent latéralement la région nasale et une troisième en ligne avec les yeux qui relie les deux lignes perpendiculairement. </li><li> Forer vers le bas sur le ventre, afin de séparer la cloison nasale du tissu environnant. Un chemin plus large permettra d&#39;éviter des dommages à la membrane de la muqueuse mais il sera également plus difficile d&#39;isoler la membrane. Une coupe étroite près de la ligne médiane est recommandé. </li><li> Utilisez des ciseaux pour couper la cloison libre de tout tissu adhéré et le stocker dans une solution saline stérile. A cette époque, la greffe peut être nettoyé pour enlever les tissus connecté. La situation idéale est d&#39;avoir des membranes muqueuses endommagées exposés des deux côtés de la cloison cartilagineuse. Un grarrière peut fournir membrane pour deux souris à condition que la surface de la membrane est suffisant pour couvrir les sites de craniotomie. Il est recommandé que la greffe est utilisée le plus rapidement possible et le chercheur passe à l&#39;étape 3 dès que le greffon est isolé. </li></ol> 3. L&#39;implantation chirurgicale de greffe muqueuse <ol><li> Utilisant des procédures standard, aseptiques murins chirurgicales, anesthésier et monter une souris dans le cadre stéréologique. Utilisez environ 2% d&#39;isoflurane dans de l&#39;oxygène pur à l&#39;aide d&#39;une machine d&#39;anesthésie rongeur. </li><li> Immobiliser la souris dans un appareil stéréotaxique avec des barres d&#39;oreille et un support de nez. Appliquer une pommade ophtalmique pour les yeux et frotter le cuir chevelu avec de la bétadine et 75% d&#39;éthanol pendant trois tours. Utilisation de ciseaux ou une tondeuse à cheveux, enlever la fourrure sur la tête. Exposer le crâne avec une lame de rasoir et le niveau de la tête. Effectuer une craniotomie au-dessus de l&#39;emplacement du cerveau qui sera dosé. Par exemple, lorsque vous ciblez le striatum couper un 1,25 mmdiamètre trou circulaire dans le crâne (centré à l&#39;AP: 1,00 mm; ML: 0,88 mm) à l&#39;aide d&#39;un marteau-piqueur. Mouiller la zone percée avec une solution saline stérile et utiliser une lame de rasoir pour enlever le crâne. </li><li> Retirez délicatement la durée à l&#39;aide de la pointe d&#39;une aiguille. En outre, ceci peut être accompli par l&#39;application d&#39;une quantité minimale de colle pour tissus de la surface durale humide. Une fois que cette couche a durci, le déplacement latéral d&#39;une pointe de lame de rasoir peut être utilisé pour retirer la membrane. </li><li> Placer la membrane de la muqueuse au-dessus de la surface du cerveau en prenant soin extrême afin de maintenir le côté tourné à l&#39;opposé de l&#39;épithélium de la plaie. Ceci est mieux fait en transférant la totalité de la cloison sur la surface du crâne à proximité du site de craniotomie avec des pincettes. Avec la pointe d&#39;une paire de ciseaux chirurgicaux, tirez la membrane hors du cartilage et sur la surface du crâne et du cerveau. Ne laissez pas dessécher la membrane ou de toucher avec n&#39;importe quel matériau absorbant. La greffe devrait généreusement chevaucher tous les bords osseux de la craniotomie site. </li><li> Couvrir la greffe d&#39;un morceau stérile de nitrile. Ceci agit de façon à empêcher l&#39;adhérence de la peau pour la greffe au cours de la guérison. Le nitrile doit être suffisamment large pour couvrir la totalité de la membrane de la muqueuse. Coupez membrane excessive si nécessaire. Éviter tout mouvement du nitrile une fois qu&#39;il est entré en contact avec le greffe. </li><li> Fermer la peau avec un 5-0 suture stérile course et laissez la souris récupérer pendant 3-7 jours avant de passer à l&#39;étape suivante. Prenez soin de ne pas perturber la barrière de nitrile ou la greffe de muqueuse lors de la fermeture de la peau. </li></ol> 4. Administration de dosage Solution <ol><li> Après avoir assuré la souris anesthésiée dans le cadre stéréotaxique, couper le fil de suture avec des ciseaux et enlever l&#39;excès de peau autour du crâne. </li><li> Retirer la barrière de nitrile et de nettoyer la surface du crâne. Utilisez salines et des cotons-tiges stériles pour nettoyer la zone jusqu&#39;à ce que le greffon est visible. Il peut être nécessaire de couper la greffe avec un rasoir si a augmenté plus grande que la desired surface. </li><li> Si l&#39;expérience sera de plus de quelques jours, il est sage d&#39;implanter au moins deux vis de crâne de renforcer l&#39;implant de la tête. </li><li> Placer le puits au-dessus de la greffe de sorte que les bords sont en contact avec le crâne. Appliquer l&#39;adhésif à base de cyanoacrylate à la jonction entre le puits et le crâne. Remplir le puits avec une solution saline stérile et assurez-vous qu&#39;il n&#39;y a pas de fuites. Les puits sont fabriqués à partir des aiguilles de seringues coupées. </li><li> Appliquer la colle d&#39;os sur le crâne d&#39;assurer le bien en place. </li><li> Retirer la solution saline à partir du puits avec une pipette. Laver les puits à plusieurs reprises pour vérifier que la colle n&#39;a pas divulgué po Ajouter la solution désirée; dans ce cas, 50 pi de dextran fluorescent est utilisé. On s&#39;attend à ce que les composés solubles dans l&#39;eau d&#39;une polarité similaire se comporteront les mêmes que le dextrane. Délivrance de composés hydrophobes ou de suspensions n&#39;a pas été explorée avec cette méthode. </li><li> Boucher le haut du puits à l&#39;aide d&#39;un morceau circulaire de nitrile obtenu à l&#39;haut avec de la colle cyanoacrylate. Assurez-vous que la colle n&#39;entre pas en contact avec le contenu des puits. </li></ol> 5. Analyse des transmuqueuse <ol><li> Après que la quantité désirée de temps s&#39;est écoulé, anesthésier les souris et échanger les contenus des puits avec une solution de colorant bleu d&#39;Evan. Ce colorant est utilisé pour vérifier que la greffe était intact. </li><li> Après 30 min, anesthésier la souris lourdement, enlever la solution de colorant, et euthanasier par décapitation. </li><li> Supprimer manuellement l&#39;implant et retirer le cerveau à l&#39;aide des ciseaux chirurgicaux. Veillez à maintenir la greffe en place. </li><li> Une fois retiré, le flash-geler le cerveau dans une solution d&#39;isobutane refroidi dans un bain de glace sèche. </li><li> Incluez le cerveau dans Optimal Cutting Temperature (OCT) solution et tranche à 50 um. </li><li> Placer les tranches souhaités directement sur une lame de microscope. </li><li> L&#39;image de la tranche en utilisant un microscope à fluorescence dès que la solution PTOM ne s&#39;est séché. </li></ol>

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</ol>

Benjamin S. Bleier MD est l&#39;inventeur de plomb provisoires méthodes de délivrance de médicaments pour le système nerveux central de recouvrement de brevet.

L&#39;étape la plus difficile de la procédure décrite ici est la réussite du transfert d&#39;une membrane muqueuse de taille adéquate sur la surface du cerveau. Cette étape est faite beaucoup plus facile si la cloison nasale récolté est assez grand et bien nettoyée. Si la partie ventrale de la cloison est tronqué, une nouvelle greffe devrait être obtenu. L&#39;angle de perçage doit être perpendiculaire à la tête de la souris pour faire en sorte que la membrane de la muqueuse n&#39;est pas endommagé par le foret. Si un c...

Le traitement d&#39;une maladie neurologique ou psychiatrique est gravement entravée par la présence de la barrière hémato-encéphalique (BHE) qui empêche plus de 95% de tous les agents pharmaceutiques potentiels d&#39;atteindre le système nerveux central 1-3. Par exemple, il a été démontré dérivé des cellules gliales facteur neurotrophique (GDNF) pour être efficace dans le traitement de la maladie de Parkinson lorsqu&#39;il est injecté directement dans le cerveau, mais est inefficace lors de la livraison systémique parce qu&#39;il ne peut pas pénétrer dans le 4-6 du Bureau. Nombreux approché ont été développées pour tenter de contourner ce problème. L&#39;amélioration de l&#39;administration systémique de neurotheraputics a été démontrée à l&#39;aide de conjugués médicament contenant des anticorps sélectifs pour des protéines de transport situés sur l&#39;endothélium capillaire cérébral; Mais cette méthode n&#39;a pas été montré pour être applicable à une large gamme de produits pharmaceutiques 7,8. En outre, l&#39;ouverture osmotique du Bureau a été utilisé cliniqueallié, mais ce procédé souffre d&#39;un dosage systémique du médicament, par opposition à une livraison plus direct vers la région du cerveau d&#39;intérêt 9. Des efforts considérables ont été mis en optimisation de la prestation transnasal dans l&#39;espoir de cibler directement le cerveau 10-12. Bien que certains succès ont été réalisés, des résultats probants ont été obtenus seulement pour les médicaments qui possèdent des récepteurs endogènes, tels que l&#39;insuline 13,14. En outre, le mécanisme de livraison transnasal a été controversée des preuves suggérant entrée indirecte dans le cerveau via l&#39;absorption de neurone olfactif ou par la circulation sanguine 11. , Livraison transcrânienne directe en utilisant des cathéters implantables ont été réalisés, mais cette procédure est très invasive et associée à de nombreuses complications 15,16. A ce jour, il n&#39;existe pas de méthode générale, peu invasive pour délivrer des composés de poids moléculaire élevé dans le cerveau. Présenté ici est une procédure chirurgicale murinqui crée une interface semi-perméable avec le cerveau. Ceci est réalisé en greffant un explant de membrane muqueuse 17 sur un défaut de craniotomie chirurgicale chez une souris. En utilisant cette procédure, il a été montré que les composés solubles allant jusqu&#39;à 500 kDa peuvent être délivrés dans le système nerveux central (directement dans le parenchyme du cerveau ainsi que dans le liquide céphalo-rachidien) à la fois dans le temps et d&#39;une manière dépendante de la masse moléculaire 18. Cette méthode de contourner le Bureau est un modèle pour les réparations de défauts de la base du crâne chez l&#39;homme qui utilise des greffons vascularisés muqueuses pour réparer les trous dans le crâne après la chirurgie endoscopique transnasal 19,20.

<table><tbody><tr><td>Souris</td><td>Taconic</td><td>C57BL/6</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Piramal Soins de santé</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Ciseaux fins pour étudiants</td><td>Outils scientifiques fins</td><td>91461-11</td><td></td></tr><tr><td>Perceuse pneumatique</td><td>MTI Dental</td><td>333-CB</td><td></td></tr><tr><td>Mèche</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Pince</td><td>Outils scientifiques fins</td><td>91106-12</td><td></td></tr><tr><td>Injection de chlorure de sodium à 0,9 % USP</td><td>Abbott Laboratories</td><td>4925</td><td></td></tr><tr><td>Boîte de Pétri en polystyrène</td><td>Fisher</td><td>08-757-12</td><td>pour le stockage temporaire des greffons</td></tr><tr><td>Stérilisateur à billes</td><td>Outils pour les sciences fines</td><td>18000-45</td><td></td></tr><tr><td>Système d’oxygène/isoflurane</td> Système de contrôle <td>de la température V720100</td><td></td><td>SurgiVet</td></tr><tr><td></td><td>Physitemp</td><td>TCAT-2LV</td><td></td></tr><tr><td>Instrument stéréotaxique pour petits animaux</td><td>KOPF</td><td>Modèle 940</td><td></td></tr><tr><td>Pommade</td><td></td><td></td><td></td>oculaire</tr><tr><td>Rasoir</td><td></td><td></td><td></td>électrique</tr><tr><td>Applicateurs à embout de coton</td><td>Fisher</td><td>23-400-106</td><td></td></tr><tr><td>7,5 % Providone iode</td><td></td><td></td><td>Bétadine Gommage chirurgical</td></tr><tr><td>70 % Éthanol</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Lame chirurgicale Feather en acier inoxydable</td><td></td><td>2976#10</td><td></td></tr><tr><td>Manche de scalpel - #3</td><td>Fine Science Tools</td><td>10003-12</td><td></td></tr><tr><td>3 % de peroxyde d’Hydogen</td><td>pour le nettoyage du</td><td></td><td></td> crâne</tr><tr><td>Adhésif pour tissus Vetbond</td><td>3M</td><td>1469SB</td><td></td></tr><tr><td>Aiguilles</td><td>Becton, Dickinson and Company</td><td>305176</td><td>pointe d’aiguille coupée et utilisée également</td></tr><tr><td>Seringues</td><td>Becton, Dickinson and Company</td><td>309597</td><td></td></tr><tr><td>Gants en nitrile</td><td>Denville Scientific Inc</td><td>G4162</td><td>pour la fermeture de puits et la protection de la greffe</td></tr><tr><td>5-0 Fil</td><td></td><td></td><td></td>de suture en nylon</tr><tr><td>Student Halsey porte-aiguille</td><td>Fine Science Tools</td><td>91201-13</td><td></td></tr><tr><td>Adhésif</td><td></td><td></td> cyanoacrylate <td>disponible dans le commerce super colle</td></tr><tr><td>Kit de ciment dentaire, 1 lb, rose opaque</td><td>Stoelting</td><td>51458</td><td></td></tr><tr><td>Isobutane (2-méthylbutane)</td><td>Aldrich</td><td>M32631</td><td>pour bain de glace carbonique</td></tr><tr><td>Glace</td><td></td><td></td><td></td> sèche</tr></tbody></table>

heterotopic muqueuse procédure de greffe de médicaments livraison directe au cerveau chez les souris

Heterotopic Mucosal Engrafting Procedure for Direct Drug Delivery to the Brain in Mice

Livraison d&#39;agents thérapeutiques dans le cerveau est entravée par la présence de la barrière hémato-encéphalique (BHE) qui restreint le passage de composés polaires et de haute masse moléculaire et de la circulation sanguine dans le tissu cérébral. Certains succès de livraison directe chez l&#39;homme a été atteint par l&#39;implantation de cathéters transcrânienne; Cependant cette méthode est très invasive et associée à de nombreuses complications. Une alternative moins invasive consiste à doser le cerveau à travers un implanté chirurgicalement, la membrane semi-perméable telle que la muqueuse nasale qui est utilisé pour réparer des défauts de la base du crâne après la chirurgie endoscopique transnasale tumorale d&#39;élimination chez les humains. transfert des médicaments bien que cette membrane serait effectivement contourner la BBB et diffuser directement dans le cerveau et le liquide céphalorachidien. Inspiré par cette approche, une approche chirurgicale chez la souris a été développée qui utilise une membrane muqueuse septale donneur greffé sur un défaut chirurgical Bureau extra. Ce modèle a été démontré efficacementpermettre le passage de composés de haut poids moléculaire dans le cerveau. Depuis de nombreux médicaments candidats sont incapables de traverser la BHE, ce modèle est utile pour effectuer des essais précliniques de nouveaux traitements pour les maladies neurologiques et psychiatriques.

L&#39;obtention d&#39;un assez grand cloison nasale explant est crucial pour les étapes ultérieures. Ceci peut être réalisé par perçage à l&#39;emplacement sur ​​le crâne de la souris donneuse représenté sur la figure 1a. Coupant le long de ce chemin va produire un explant de la taille suffisante comme le montre la Figure 1b. Si la profondeur de perçage n&#39;est pas assez profond, la greffe sera tronquée et il sera difficile d&#39;obtenir une membrane suffisamment grande pour couvrir l...

Un modèle de souris de la reconstruction de la base du crâne humain endoscopique a été développé qui crée une interface semi-perméable entre le cerveau et le nez en utilisant des greffes muqueuses nasales. Cette méthode permet aux chercheurs d&#39;étudier à la livraison du système nerveux central de la thérapeutique de haut poids moléculaire qui sont par ailleurs exclus par la barrière hémato-encéphalique lorsqu&#39;il est administré par voie systémique.

Heterotopic muqueuse procédure de greffe de médicaments Livraison directe au cerveau chez les souris

Delivery of therapeutics into the brain is impeded by the presence of the blood-brain barrier (BBB) which restricts the passage of polar and high ...

L'objectif général de cette procédure est de réaliser avec succès une greffe hétérotrophe de muqueuse afin de délivrer des composés dans le cerveau. Cette opération s'effectue en deux étapes : premièrement, isoler un greffon de septum nasal provenant d'une souris donneuse ; deuxièmement, transplanter la membrane muqueuse du septum sur un défaut crânien d'une souris receveuse.Ensuite, le cerveau est administré via la greffe pendant une période définie. L'étape finale consiste à analyser les conséquences de la procédure d'administration au cerveau en utilisant la fluorescence, la microscopie ou l'immunohistochimie afin de visualiser la diffusion des composés délivrés dans le parenchyme cérébral. L'utilisation de produits pharmaceutiques destinés au système nerveux est fortement limitée en raison de la présence de la barrière hémato-encéphalique.Nous avons mis au point une technique fondée sur la chirurgie endoscopique transnasale humaine, permettant de greffer une muqueuse dans une ouverture de la barrière hémato-encéphalique et d'utiliser celle-ci comme voie d'acheminement pour la délivrance directe de médicaments au cerveau. Ici, Richie Komen, étudiant postdoctoral au laboratoire d

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Source : Zamboni, M., et al., Induction de la modification des cellules leptoméningées par injection intracisternale. J. Vis. Exp. (2020)Cette vidéo montre la procédure d’administration d’un médicament inducteur dans la citerne magna d’une souris anesthésiée. L’injection induit sélectivement l’expression de marqueurs fluorescents dans les cellules de surface du cerveau accessibles via le liquide céphalo-rachidien, confirmée par l’imagerie par fluorescence.

Administration ciblée de médicament dans un modèle murin par injection de citerne magna

Dans cette vidéo, nous décrivons la procédure d’administration de cellules tumorales dérivées de l’homme dans la citerne magna du cerveau d’une souris. Le modèle murin orthotopique peut être utilisé pour étudier la propagation métastatique du cancer aux méninges crâniennes.

Injection chirurgicale de citerne magna : une méthode d’administration de cellules tumorales directement dans le système nerveux central d’un modèle murin

Cette vidéo montre l’injection intra-ventriculaire médiée par l’ommaya dans un modèle murin. La méthode permet l’administration localisée de candidats médicaments potentiels et échappe à la barrière hémato-encéphalique.

Injection intra-ventriculaire chez la souris : une méthode d’administration directe de médicaments médiée par Ommaya pour administrer des médicaments aux ventricules cérébraux du cerveau de souris

Cette vidéo présente une procédure d’implantation d’une canule intracrânienne dans un modèle murin de tumeur cérébrale, afin de faciliter l’administration d’un agent immunothérapeutique. L’administration de lymphocytes T du récepteur antigénique chimérique spécifiques du glypican-2 dans le microenvironnement tumoral déclenche l’activation des lymphocytes T, entraînant une lyse et une régression tumorale.

Implantation d’un canule intracrânienne chez une souris pour administrer des agents thérapeutiques aux tumeurs cérébrales

Source : Leda, A. R., et al. Technique de perfusion de microchirurgie chez la souris pour l’administration ciblée de substances dans le SNC via l’artère carotide interne. J. Vis. Exp. (2017)Cette vidéo présente une procédure microchirurgicale conçue pour faciliter la perfusion ciblée d’une substance testée dans le cerveau via l’artère carotide interne (ICA). La procédure implique une suture précise et une manipulation vasculaire pour restreindre temporairement le flux sanguin, assurant ainsi...

Administration ciblée de substances au cerveau de la souris par perfusion dans l’artère carotide interne

Le présent protocole décrit une technique de perfusion de microchirurgie chez la souris, qui délivre efficacement des substances directement dans le cerveau via l’artère carotide interne.

Souris microchirurgie Infusion Technique pour ciblée Substance Livraison dans le SNC via L'artère carotide interne

Les cellules souches sont des vecteurs thérapeutiques prometteurs pour traiter les tumeurs cérébrales en raison de leur tropisme intrinsèque tumoral. L'administration de cellules souches intranasales non invasives contourne la barrière hémato-encéphalique et démontre un fort potentiel de traduction clinique. Cet article résume les principes fondamentaux de la transmission des cellules souches intranasales dans un modèle de souris du gliome.

Livraison intradermique de cellules souches thérapeutiques au glioblastome dans un modèle de souris

Ici, nous présentons un protocole utilisant un dispositif de positionnement de souris qui permet le placement approprié des souris pour l'administration intranasale d'une formulation de peptide-siRNA de cerveau-ciblage permettant le silençage efficace de gène dans le système nerveux central.

Un dispositif de positionnement pour le placement des souris pendant la livraison de siRNA intranasal au système nerveux central

Ici, nous décrivons un modèle de xénogreffe murine qui ressemble fonctionnellement à un réservoir ommaya chez les patients. Nous avons développé le Murine Ommaya pour étudier de nouvelles thérapies pour la maladie leptoméningée universellement mortelle.

Un modèle murin de xénogreffe d’Ommaya pour étudier le traitement ciblé direct de la maladie leptoméningée

Le protocole présenté ici permet la transplantation de microglies humaines induites dérivées de cellules souches pluripotentes (iPSMG) dans le cerveau par voie transnasale chez des souris immunocompétentes. La méthode de préparation et de transplantation transnasale de cellules et l’administration d’un mélange de cytokines pour le maintien de l’iPSMG est présentée.

Transplantation de microglies dérivées de cellules souches pluripotentes induites par l’homme dans le cerveau de souris immunocompétentes par voie transnasale non invasive

Le développement de modèles orthotopiques de tumeurs cérébrales pédiatriques nécessite une précision méticuleuse, en utilisant un dispositif stéréotaxique pour implanter les cellules cancéreuses avec précision. La méthodologie présentée ici décrit les étapes de la préparation des cellules tumorales cérébrales, de la réalisation d’injections intracrâniennes et de la mise en œuvre d’un système de surveillance postopératoire pour évaluer la greffe de tumeur cérébrale.

Etablissement de modèles de xénogreffes orthotopiques dérivées de patients pour des tumeurs cérébrales à l’aide d’un dispositif stéréotaxique

Apprenez la greffe muqueuse hétérotopique pour la livraison de médicaments au cerveau chez la souris. Cette méthode innovante contourne la barrière hémato-encéphalique pour administrer des thérapeutiques à haut poids moléculaire directement dans le système nerveux central.

Heterotopic muqueuse procédure de greffe de médicaments Livraison directe au cerveau chez les souris

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