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Nanomanipulation de molécules d'ARN simple par pinces optiques
Nanomanipulation de molécules d'ARN simple par pinces optiques
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JoVE Journal Bioengineering
Nanomanipulation of Single RNA Molecules by Optical Tweezers

Nanomanipulation de molécules d'ARN simple par pinces optiques

Full Text
15,476 Views
06:59 min
August 20, 2014

DOI: 10.3791/51542-v

William Stephenson1, Gorby Wan2, Scott A. Tenenbaum3,4, Pan T. X. Li4,5

1Nanoscale Engineering Graduate Program, College of Nanoscale Science and Engineering,University at Albany, State University of New York, 2Nanoscale Science Undergraduate Program, College of Nanoscale Science and Engineering,University at Albany, State University of New York, 3Nanobioscience Constellation, College of Nanoscale Science and Engineering,University at Albany, State University of New York, 4The RNA Institute,University at Albany, State University of New York, 5Department of Biological Sciences,University at Albany, State University of New York

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Des pinces optiques ont été utilisées pour étudier le repliement de l’ARN en étirant des molécules individuelles à partir de leurs extrémités 5' et 3'. Ici, des procédures courantes sont décrites pour synthétiser des molécules d’ARN pour l’épilation, l’étalonnage de l’instrument et les méthodes de manipulation de molécules uniques.

L’objectif général de l’expérience suivante est de démontrer une expérience de dépliage mécanique d’une seule molécule sur une structure d’ARN. Dans un premier temps, une chambre d’écoulement est construite et montée sur l’instrument. Dans la deuxième étape, des billes de taille micrométrique sont mélangées à l’échantillon d’ARN d’intérêt, puis les deux tailles différentes de billes sont chargées dans la chambre d’écoulement.

Enfin, la chambre d’écoulement et le piège optique peuvent être utilisés pour diriger les billes en contact les unes avec les autres afin d’évaluer une variété d’interactions entre molécules uniques. En fin de compte, cette technique de nanomanipulation peut être utilisée pour étudier le repliement de l’ARN aux niveaux structurel secondaire et tertiaire. Cette méthode peut aider à répondre à des questions clés dans le domaine du repliement de l’ARN, telles que comment un ARN se replie-t-il et se déplie-t-il ?

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