ADN-ARN combiné Fluorescent In situ Hybridation (FISH) à étudier inactivation du chromosome X dans différencié Femme Souris cellules souches embryonnaires

L’objectif général de cette procédure est d’étudier l’inactivation du chromosome X dans des cellules souches embryonnaires de souris femelles différenciées au moyen d’ADN et d’ARN fluorescents combinés simultanément dans l’hybridation C deux ou D-N-A-R-N-A poissons. Ceci est accompli en induisant d’abord la différenciation dans les cellules souches embryonnaires de souris femelles. Comme au cours de ce processus, qui simule le développement embryonnaire post-implantatoire normal, l’inactivation du chromosome X est initiée, ce qui entraîne une transcription améliorée et une accumulation d’ARN du kyste, codant pour le futur chromosome X inactif.

La deuxième étape consiste à fixer les cellules souches embryonnaires différenciées à l’aide de paraldéhyde. Ensuite, préparez les sondes pour détecter à la fois l’ADN du chromosome X et l’ARN du kyste en marquant les fragments d’ADN avec de la biotine ou du digo genin. Utilisation de la traduction de Nick.