Synthèse et purification de Iodoaziridines implication quantitative de sélection de la phase stationnaire optimale pour chromatographie

L’objectif général de cette procédure est de préparer et de purifier une fin de l’iode. Ceci est accompli en générant d’abord du lithium méthyle di ito par déprotonation du méthane di ito à basse température et en réagissant avec un système immunitaire. La deuxième étape consiste à réchauffer rapidement le mélange réactionnel pour favoriser la cyclisation de l’intermédiaire diiodure jusqu’au produit d’iodure d’olive souhaité.

Ensuite, la stabilité du produit Ito Uridine aux différentes phases stationnaires utilisées pour la chromatographie est évaluée afin de déterminer la plus appropriée pour la purification. La dernière étape consiste à purifier l’iode et à effectuer une analyse RMN des protons. En fin de compte, cet écran de phases stationnaires pour la chromatographie est utilisé pour montrer que l’Illumina basique modifié à l’activité quatre est le plus approprié pour la purification de l’odine IDO.

Nous avons eu l’idée de cette méthode pour la première fois lorsque nous avons constaté que les nouveaux produits d’iode IDO étaient instables à la chromatographie sur gel de silice et que nous avions besoin d’une purification alternative. À partir de là, nous avons conçu une procédure pour évaluer la stabilité de l’odine IO afin d’organiser des phases stationnaires pour la chromatographie, qui peut également être appliquée à d’autres composés potentiellement sensibles. Tom et Dom sont tous deux doctorants dans mon groupe de recherche.

Première flamme sèche, une fiole à fond rond de 100 millilitres contenant une barre d’agitation et équipée d’un septum sous un jet d’argonne. Après avoir laissé le ballon refroidir à température ambiante, ajoutez 5,7 millilitres de tétraèdre anhydre et 2,7 millilitres d’éther éthylique anhydre à l’aide d’une seringue et 315 microlitres d’hexaéthyldilane fraîchement distillé à l’aide d’une micro-seringue. Placez la fiole dans un faiseur de taille appropriée qui lui permettra d’être bien immergée.

Une fois l’agitation commencée, ajoutez de la glace sèche et de l’acétone dans l’exécuteur pour refroidir la solution à moins 78 degrés Celsius. Couvrez ensuite l’exécuteur d’une feuille d’aluminium pour minimiser l’exposition du récipient de réaction. À la lumière qui suit cela, ajoutez 0,6 millilitre de 2,5 molaires et du lithium butyle dans des hexanes goutte à goutte via une seringue pendant deux à trois minutes.

Après avoir laissé le mélange remuer à moins 78 degrés Celsius pendant 30 minutes. Pour former la solution de lithium hexaéthyl dilane, ajoutez un millilitre de térah hydro ferran anhydre dans un flacon à fond rond de 10 litres séché à la flamme à l’aide d’une seringue. Ajoutez ensuite 135 microlitres de méthane di ITOM à l’aide d’une micro-seringue et faites tourner doucement le ballon pour vous assurer que la solution est bien mélangée.

Ensuite, ajoutez la solution de méthane di ITOM goutte à goutte pendant deux minutes à la solution de lithium hexa éthyl dilane à moins 78 degrés Celsius tout en laissant la solution remuer pendant 20 minutes. Pesez 135 milligrammes de l’amin dans un autre flacon à fond rond de 10 millilitres séché à la flamme et dissolvez-le dans deux millilitres de tétra hydro ferran anhydre. Après les 20 minutes de temps de déprotonation, ajoutez la solution immunitaire goutte à goutte à la solution de lithium dito méthyle pendant cinq minutes à moins 78 degrés Celsius.

Immédiatement après la fin de l’édition dropwise, soulevez le récipient de réaction du bain de glace carbonique. Récupérez le ballon avec du papier d’aluminium et transférez-le dans un bain d’eau glacée à zéro degré Celsius. Remuez la solution pendant 15 minutes à zéro degré Celsius.

Ensuite, éteignez la réaction en ajoutant 30 millilitres de solution aqueuse saturée de bicarbonate de sodium. Transférez le mélange dans un entonnoir à déconnecter et ajoutez 30 millilitres de di chlorométhane. Secouez le mélange, aérez l’entonnoir et retirez la couche organique inférieure.

Après avoir répété l’extraction deux fois, ajoutez du sulfate de sodium aux couches organiques combinées pour éliminer toute eau présente dans la solution. Ensuite, filtrez le sulfate de sodium sous filtration sous vide à l’aide d’un entonnoir en verre avec un bouchon de coton, collectez le filtrat dans une fiole à fond rond de 250 millilitres, retirez le solvant sous pression réduite sur un évaporateur rotatif. Pour obtenir un échantillon impur du produit ITO uridine souhaité.

Ajouter 1 3 5 TRIMETH oxybenzène comme étalon interne à la distillation brute et dissoudre l’échantillon de dine brute dans du chlorométhane. S’assurer que cela est complètement dissous. Prélever une aliquote de ce mélange, puis retirer le solvant sous pression réduite.

Une fois terminé, analysez l’échantillon par spectroscopie RMN de protons. Après l’analyse RMN, ouvrez le spectre RMN des protons enregistré à l’aide d’un logiciel de traitement RMN standard tel que Mast Nova. Faites un clic droit sur le spectre et choisissez intégration.

Choisissez ensuite manuel pour fournir l’outil d’intégration. Cliquez et faites glisser pour couvrir la largeur des pics à 6,08 PP m et 4,87 PP M afin d’intégrer les signaux de l’étalon interne et du signal CHI aîné respectivement. Faites un clic droit sur l’intégrale pour le pic à 6,08 PP m, sélectionnez modifier l’intégrale et changez la valeur normalisée à 3,0.

Ensuite, utilisez la valeur intégrale mise à jour du signal CHI d’iode pour déterminer le rendement de l’iode I OTO. Une fois l’analyse RMN terminée, mélanger 25 grammes des phases stationnaires suivantes avec 50 millilitres d’acétate d’éthyle hexane à 5 % dans six flacons coniques distincts de 250 millilitres contenant des barres d’agitation dans une fiole conique. Préparez une solution de 50 millilitres, un heane d’acétate d’éthyle à 5 % à utiliser comme témoin.

Mélangez ensuite les boues sur une plaque d’agitation magnétique. Ajouter deux aliquotes d’un millilitre de la solution étalon interne I OTO Azarin à chacune des fioles coniques à température ambiante. Mélangez ensuite les mélanges de boue pendant 30 minutes.

Après 30 minutes, filtrez chacun des mélanges de boue sous vide à l’aide d’un entonnoir centré, en recueillant chaque filtrat dans une fiole à fond rond de 250 millilitres. Lavez deux fois le résidu dans l’entonnoir centré avec 30 millilitres de chlorométhane. Éliminez le solvant des échantillons obtenus à l’aide d’un évaporateur rotatif.

Ensuite, analysez les échantillons par spectroscopie RMN des protons pour calculer la quantité d’iode odine récupérée dans chaque cas. Comme décrit précédemment, notez les rendements dans le cahier de laboratoire. Comparez les rendements de I OTO Aine obtenus de chaque phase stationnaire testée avec ceux obtenus précédemment pour déterminer l’échantillon donnant le rendement le plus élevé.

Ensuite, répétez la synthèse décrite précédemment pour générer le mélange brut d’iode IO afin de générer l’activité de base d’Illumina. Quatrièmement, ajoutez 100 grammes d’activité Illumina de base, un dans une fiole à fond rond de 500 millilitres, puis ajoutez 10 millilitres d’eau dans la fiole. Après avoir équipé le flacon d’un bouchon en verre, secouez-le vigoureusement jusqu’à ce qu’il n’y ait plus de grumeaux, indiquant une répartition uniforme de l’eau dans tout l’Illumina.

Une fois que l’Illumina a refroidi à température ambiante, purifiez l’iode IO brut par chromatographie sur colonne en utilisant l’activité de base quatre d’Illumina. En tant que phase stationnaire, élué avec une classification en hexane à 5 % YL de taxane d’acétate. Mélanger le produit contenant les fractions dans une fiole à fond rond et éliminer le solvant à l’aide d’un évaporateur rotatif pour obtenir l’iode pur oxyde.

Avant la purification, un rendement de 59 % d’iode a été calculé par RMN des protons. Cependant, cet iode était difficile à purifier et a subi une décomposition significative lors de la purification de la silice sur Illumina de base. La quatrième activité a permis au produit d’obtenir un rendement de 48 %.

L’analyse RMN des protons a donné une série de rendements pour les phases stationnaires par rapport à l’activité de base Illumina standard interne, quatre ont donné le rendement le plus élevé de 53 %, ce qui est le plus proche du rendement RMN. Par conséquent, l’activité de base Illumina quatre a été choisie pour la fin. Toal iota était la purification rachetée par IR.

Une large sélection d’AINES ITO est accessible en haut rendement. L’alcool al et les amines aromatiques et toales sont compatibles avec la réaction, y compris l’exigence hystérique de tourte et d’ortho. À titre d’exemples, il est proposé que la réaction se produise par déprotonation, suivie d’une édition nucléophile.

Pour donner à l’aminogemme l’iodure intermédiaire, le réchauffement ultérieur induit une cyclisation stéréosélective hautement DIA favorisant l’iode cis. En raison d’interactions stériques subtiles dans l’état de transition de cyclisation lors de l’optimisation de la réaction, le contrôle de la température et le timing étaient essentiels au résultat de la réaction. L’extinction de la réaction sans réchauffement a permis d’obtenir l’iode et l’iodure d’iode.

Cependant, les produits subissent une dégradation dans les conditions de réaction, ce qui est évité en réchauffant la réaction et en réduisant les temps de réaction. Après avoir regardé cette vidéo, vous devriez avoir une bonne compréhension de la façon de synthétiser le produit d’iridium IO et d’évaluer sa stabilité à une large gamme de phases stationnaires pour la purification par chromatographie. N’oubliez pas que travailler avec du lithium mbu peut être extrêmement dangereux et que des précautions telles que travailler sous une atmosphère d’écrou et tremper l’accès en toute sécurité.

Le réactif doit toujours être pris lors de l’exécution de cette procédure.