Utilisation de protéines fluorescentes pour surveiller glycosome Dynamics dans le trypanosome africain

L’objectif général de l’expérience suivante est d’observer les changements en temps réel de la composition du glyco dans les cellules vivantes. Ceci est réalisé en exprimant une protéine fluorescente fusionnée à une séquence de ciblage Pero Somal PTs deux. La protéine de fusion est importée dans des zones glyco matures, qui deviennent des organites fluorescents.

La dégradation et le recyclage entraînent une perte de fluorescence qui peut être surveillée via la cytométrie en flux Les cellules sont exposées à différentes conditions environnementales afin d’identifier les facteurs qui déclenchent le remodelage du glyco. Les résultats montrent que la composition du glyco varie en réponse aux changements environnementaux en fonction des changements de fluorescence cellulaire lors du passage des cellules d’un milieu pauvre en nutriments à un milieu riche en nutriments. Ainsi, le principal avantage de cette technique par rapport aux méthodes existantes comme la microscopie électronique et à fluorescence, est qu’elle permet d’analyser en temps réel des milliers de cellules.