Name: Transplantation de queue peau détudier allogéniques CD4 réponses des cellules T chez la souris (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-07-25T13:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 48 s
Description: Apprenez la transplantation de peau de queue chez la souris pour étudier le rejet médié par les cellules T CD4 et l'induction de tolérance. Cette méthode chirurgicale minimalement invasive permet un suivi longitudinal sans sacrifice de l'animal.

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Ce travail a été soutenu par les subventions SNF PPOOA-_119204 et PPOOP3_144918 à S.W.R. Nous remercions E. Palmer et B.T.H. Hausmann pour leurs souris et leur expertise technique.

Dans cette publication de la vidéo et du protocole, toutes les procédures d&#39;animaux ont été effectuées conformément au protocole de l&#39;animal approuvé par l&#39;autorité cantonale de Bâle-Ville, Suisse. Effectuer toutes les procédures dans des conditions stériles là où c&#39;est possible. 1. Préparation de chirurgie <ol><li> Autoclave tous les instruments chirurgicaux et gaze avant de l&#39;utiliser. </li><li> Chauffer le coussin chaud et organiser instruments chirurgicaux sur la table (Table des Matières / Méthodes). </li><li> Ouvrez les bandages bande de doigt. Appliquez de la vaseline sur le pavé de la plaie avec un coton-tige (assurez-vous que la gaze est entièrement recouvert). </li><li> Peser les souris et administrer l&#39;analgésie buprénorphine 0,05 mg / kg de poids corporel. Remarque: ce sera une analgésie immédiatement après la transplantation. </li></ol> 2. Préparation de la Queue-peau pour la transplantation <ol><li> Euthanasier souris donneuses (par exemple, IA BM12) par asphyxie au CO2 et disinfect les queues avec une solution de désinfection avant l&#39;excision. </li><li> Placez la queue avec la bande noire sur un tableau en plastique propre et couper longitudinalement tout au long de la ligne médiane, une incision superficielle impliquant que la couche de la peau. </li><li> Retirez la peau de la queue en utilisant une pince de préhension. </li><li> Mettez la queue-peau dans une boîte de culture de 10 cm de cellule remplie avec 10 ml de HBSS. </li></ol> 3. Procédure chirurgicale <ol><li> Anesthésier les souris receveuses (par exemple, des souris C57BL / 6) par l&#39;inhalation d&#39;une solution d&#39;isofluorane à 3% dans une boîte à induction transparent. Remarque: Il faut 3-5 minutes pour la souris pour atteindre plan chirurgical anesthésie. Utilisez vétérinaire pommade sur les yeux pour prévenir la sécheresse tandis que sous anesthésie. </li><li> Placez la souris sur le tapis tiède et appliquer 1,5% isofluorane par un masque et des ânes bouche chaque réflexe animal par orteil pincement. </li><li> Raser le site dorsale des souris receveuses (par exemple, C57BL / 6) et enlever les poils de contamination en utilisant un sw de gaze secab. </li><li> Désinfecter rasé le site de transplantation avec une solution aseptique. </li><li> Pincer la peau avec des pinces dans le site milieu / droite du dos et utiliser des ciseaux courbes à faire une incision ronde d&#39;environ 1 x 0,6 cm. </li><li> En cas de saignement, puis nettoyer la plaie avec un coton-tige stérile. </li><li> Évaluer la taille de l&#39;incision et couper une greffe de la taille estimée de la queue-peau à l&#39;aide du scalpel. </li><li> Coupez les coins pour contourner la transplantation. </li><li> Chargez la greffe sur le scalpel, l&#39;excès de HBSS sec sur un coton-tige stérile et le placer dans le lit de la greffe de la souris receveuse. </li><li> Éviter le chevauchement des donateurs et de la peau de l&#39;hôte et appliquer l&#39;adhésif de tissu sur la zone de contact exclusivement. </li><li> Appliquer un enduit sans plis autour de la taille de la souris. </li><li> Appliquer un bandage non élastique adhésif pour fixer le plâtre à la souris (3 mm décalé). </li><li> Inciser avec les ciseaux environ 3 mm dans le site ventrale supérieure du bandage. Note: Ceci est pour éviter trapping des dents de la souris lors de la phase de récupération. </li><li> Retirer l&#39;anesthésie-bouche-masque et garder les souris transplantées sur le coussin chauffant jusqu&#39;à éveillé. </li><li> Retour souris transplantées dans leurs cages quand il est complètement rétabli et évaluer leur mobilité afin de s&#39;assurer que le bandage n&#39;est pas trop serré. </li><li> Stériliser l&#39;ensemble des instruments chirurgicaux avec l&#39;éthanol 70% avant de procéder à une intervention chirurgicale suivante. </li></ol> 4. Soins post-opératoires <ol><li> Ajouter le sirop contenant du paracétamol à l&#39;eau de boisson (4 mg / ml) et de l&#39;administrer pendant 7 jours. </li><li> Souris Retour à la salle de l&#39;animal une fois qu&#39;il a récupéré. </li><li> Suivre de près les souris des signes cliniques, y compris la dépression ou d&#39;autres changements de comportement (alimentaires ou immobilité), apparence anormale (manque de toilettage) ou la posture (horripilation ou posture recroquevillée) pour le moment le pansement est en place (1 semaine). </li></ol> 5. Bandage Removal (6-7 jours post-transplantation) <ol><li> Anesthetize les souris par inhalation d&#39;une solution isofluorane à 3% dans un caisson d&#39;aspiration transparente (voir ci-dessus). </li><li> Couper bandage en plâtre avec des ciseaux de l&#39;artère et retirez les. Remarque: éviter l&#39;étirement du site de transplantation. </li><li> Surveillance de la souris transplantées des signes cliniques (voir 4.3) et le score de rejet des greffes de peau (tableau 1). Remarque: Le système de pointage de greffe prend avantage des différentes textures de cheveux sur la queue-peau par rapport à la dorsale peau. L&#39;aspect de la greffe et le rejet est catégorisée en trois niveaux. Peau allogénique (CMH II correspondent pas, par exemple, IA BM12) greffes de souris C57BL / 6 immunocompétents sont généralement rejetés dans 12-15 jours post-greffe (propres données et 15-20). </li></ol>

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<li>Rosenberg, A. S., Finbloom, D. S., Maniero, T. G., Vander Meide, P. H., Singer, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Specific+prolongation+of+MHC+class+II+disparate+skin+allografts+by+in+vivo+administration+of+anti-IFN-gamma+monoclonal+antibody%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+immunology%22%5BJournal%5D)">Specific prolongation of MHC class II disparate skin allografts by in vivo administration of anti-IFN-gamma monoclonal antibody.</a> Journal of immunology. 144 (12), 4648-4650 (1950).</li>
<li>Goes, N., Sims, T., Urmson, J., Vincent, D., Ramassar, V., Halloran, P. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Disturbed+MHC+regulation+in+the+IFN-gamma+knockout+mouse.+Evidence+for+three+states+of+MHC+expression+with+distinct+roles+for+IFN-gamma%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+immunology%22%5BJournal%5D)">Disturbed MHC regulation in the IFN-gamma knockout mouse. Evidence for three states of MHC expression with distinct roles for IFN-gamma.</a> Journal of immunology. 155 (10), 4559-4566 (1995).</li>
<li>Surquin, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((IL-4+deficiency+prevents+eosinophilic+rejection+and+uncovers+a+role+for+neutrophils+in+the+rejection+of+MHC+class+II+disparate+skin+grafts%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">IL-4 deficiency prevents eosinophilic rejection and uncovers a role for neutrophils in the rejection of MHC class II disparate skin grafts.</a> Transplantation. 80 (10), 1485-1492 (2005).</li>
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</ol>

Les auteurs déclarent qu’ils n’ont pas d’intérêts financiers concurrents.

la transplantation de la peau est une méthode largement utilisée pour l&#39;étude de rejet et de la tolérance des lymphocytes T dépendant. Comme le modèle de transplantation de la peau a été établi, plusieurs adaptations et modifications ont été appliquées. Dans la procédure décrite, IA BM12 transplantation queue peau est réalisée en utilisant des gaz anesthésiques (de isofluorane). L&#39;utilisation de l&#39;anesthésie au gaz diminue le temps d&#39;exécution et la récupération des souris, ce qui diminue le s...

La transplantation d&#39;organes solides tels que la peau, le cœur et les reins est maintenant une procédure standard dans la pratique médicale dans le monde entier 1. Organes transplantés avec succès peuvent être rejetés par l&#39;activation du système immunitaire receveur, qui reconnaît les antigènes majeurs d&#39;histocompatibilité du donneur. Patients transplantés donc besoin d&#39;un traitement avec des médicaments immunosuppresseurs 2. Allogreffe de peau chez la souris a été créé par Medawar et ses collègues en 1955 et a été utile pour identifier les molécules ciblées plus tard décrit comme complexe majeur d&#39;histocompatibilité (CMH) de classe I et II. Depuis lors, le modèle de greffe de peau a été continuellement modifié et adapté pour étudier le rôle des sous-ensembles de lymphocytes T et de la pertinence de l&#39;intervention chimique et biologique dans la suppression du rejet de greffe 2-4. La peau de l&#39;oreille et du tronc sont plus difficiles à préparer et sont plus sensibles à l&#39;hypoxie et la nécrose de la peau queue 5; cependant,la procédure de transplantation est similaire. En outre, le suivi des greffes de peau de la queue est facile en raison de la texture des cheveux caractéristique de la peau. Cet article prévoit une procédure détaillée pour le CMH de classe II inadéquation transplantation queue peau qui permet l&#39;étude des différents aspects de CD4 + T à médiation cellulaire rejet d&#39;allogreffe et de tolérance chez les souris. La mutation à trois points naturel dans la molécule du CMH de classe II I-Ab (appelé IA BM12) 6-9 est suffisante pour induire le rejet des allogreffes de la peau chez des souris C57BL / 6 souris 8. La molécule d&#39;BM12 IA active les cellules T CD4 + avec divers récepteurs cellulaires αβ-T (TCR) des chaînes à partir de souris C57BL / 6, dont les lymphocytes T Vα2Vβ8-TCR spécifiques ont été identifiées, afin de générer une souris TCR transgéniques 10. Le transfert adoptif de lymphocytes T Vα2Vβ8-TcR-spécifiques a été utilisée pour établir un modèle de rejet dans C57B immunodéficientesL / 6 Rag2 - / - souris transplantées avec la peau IA BM12. Les différences génétiques entre donneur et receveur impact sur le résultat de l&#39;acceptation de la greffe et le rejet. Il existe différents types de greffes: autogreffes sont des greffes du destinataire individuel lui-même; syngrafts et allogreffes sont des greffes de personnes génétiquement identiques et sans lien génétique respectivement. Acceptation de différentes greffes d&#39;organes allogéniques a été démontrée par intervention chimique et biologique chez les patients et les modèles de souris 11,3,4. Dans une approche de base, anticorps anti-CD3-traité souris C57BL / 6 a montré une survie prolongée des IA BM12 queue-peau (données non publiées). L&#39;épuisement des CD4 + et T CD8 + avant la transplantation dans des souris receveuses abouti à l&#39;acceptation de CMH de classe I et II greffes incompatibles (Rev. en 12). Fait intéressant, le rejet des greffes de peau dépend de la présence de cellules CD4 + </sup&gt; Cellules T (Rev. en 12). Dans ce modèle, le ciblage des interactions spécifiques entre les différentes cellules du système immunitaire en bloquant les molécules de co-stimulation avec des anticorps ou avec suppression des cellules T régulatrices pourrait induire une tolérance (données non publiées). En effet, le blocage à la fois CD40 et CD28 conduit à long terme allogreffe de tolérance cutanée 13,14. Transplantation queue-peau est facile à réaliser et facile à contrôler par rapport à la transplantation d&#39;autres organes. En outre, les greffes de peau de la queue sont faciles à préparer et sont moins sensibles à l&#39;ischémie que les autres tissus de la peau. Contrairement aux anesthésiques injectés, l&#39;utilisation de gaz anesthésique (de isofluorane) lors de la transplantation réduit à la fois la procédure et le temps de récupération de destinataire. Curling de la greffe de peau de la queue, ce qui peut conduire à une cicatrisation incomplète, le rejet de greffe, est empêchée par l&#39;application de colle pour tissus. En outre, le modèle de transplantation queue peau IA BM12 active exclusivement CD4 <sup&gt; + Cellules T dans les deux immunocompétents et des souris immunodéficientes (de la même origine génétique) de faciliter l&#39;interprétation des résultats. Ce protocole décrit un modèle de souris fiables, reproductibles et facilement contrôlé qui permet une intervention chimique et biologique. Le modèle est conçu pour enquêter sur le rejet et l&#39;induction de tolérance des greffes de peau queue.

<table><tbody><tr><td>Bétadine solution étalon</td><td>Mundipharma</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Coton-tige</td><td>Carl Roth GmbH</td><td>31025060</td><td></td></tr><tr><td>Dafalgan , UPSA</td><td>Bristol Myers Squibb UPSA</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Hansaplast Finger strips</td><td>Beierdorf AG</td><td>REF.76861</td><td></td></tr><tr><td>Adhésif tissulaire histoacryle</td><td>Braun</td><td>REF.1050052</td><td></td></tr><tr><td>Leukotape classic , 2 cm x 10 m</td><td>BSN Medical SAS</td><td>REF.02204-00</td><td></td></tr><tr><td>PBS, Saline tamponnée au phosphate, pH 7,4</td><td>Invitrogen</td><td>10010015</td><td>GIBCO</td></tr><tr><td>Gaze stérile, 5 x 5 cm, 8 plis</td><td>MaiMed GmbH</td><td>21010</td><td></td></tr><tr><td>Pince à motif étroit</td><td>FST</td><td>11003-12</td><td></td></tr><tr><td>Ciseaux à iris fins courbé</td><td>FST</td><td>14095-11</td><td></td></tr><tr><td>Ciseaux à iris fins</td><td>FST</td><td>14094-11</td><td></td></tr><tr><td>Ciseaux Mayo</td><td>FST</td><td>14010-15</td><td></td></tr><tr><td>Ciseaux artériels pointe sphérique 11,5 cm</td><td>FST</td><td>14080-11</td><td></td></tr><tr><td>Pince à tissus</td><td>FST</td><td>11021-14</td><td></td></tr><tr><td>Lame chirurgicale n° 20</td><td>Swann-Morton LTD</td><td>3006</td><td>Acier au carbone</td></tr><tr><td>Poignées de lame chirurgicale</td><td>Swann-Morton LTD</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Seringue, 1 ml</td><td>ARTSANA</td><td></td><td>Jetable</td></tr><tr><td>Temgesic, buprénorphine</td><td>ESSEX Chemie AG</td><td></td><td>0,3 mg/ml</td></tr><tr><td>Boîtes de culture tissulaire 10 cm, 60,1 cm2</td><td>TPP</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Vaseline</td><td>Vifor SA</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Warm pad</td><td>Solis</td><td></td><td>Type 223</td></tr></tbody></table>

transplantation de queue peau d&#39;étudier allogéniques cd4 réponses des cellules t chez la souris

Transplantation of Tail Skin to Study Allogeneic CD4 T Cell Responses in Mice

L’étude des réponses des lymphocytes T et de leurs conséquences lors de la reconnaissance d’allo-antigènes nécessite un modèle qui permette de distinguer les lymphocytes T donneurs et hôtes, de suivre facilement le greffon et d’adapter le système afin de répondre à différentes questions immunologiques. Medawar et ses collègues ont établi la greffe allogénique de peau de queue chez la souris en 1955. Depuis, le modèle de greffe de peau n’a cessé d’être modifié et adapté pour répondre à des questions spécifiques. L’utilisation de la peau de la queue rend ce modèle facile à marquer pour le rejet du greffon, ne nécessite ni préparation approfondie ni anesthésie profonde, est applicable aux animaux de tous les antécédents génétiques, décourage la nécrose ischémique et permet une intervention chimique et biologique. 
En général, les lymphocytes T allogéniques CD4+ et CD8+ sont responsables du rejet des allogreffes car ils reconnaissent les antigènes majeurs d’histocompatibilité non appariés de différentes souches de souris. Plusieurs modèles ont été décrits pour activer les lymphocytes T allogéniques chez des souris transplantées de peau. L’identification de molécules du complexe majeur d’histocompatibilité (CMH) de classe I et II dans différentes souches de souris, y compris les souris C57BL/6, a été une étape importante vers la compréhension et l’étude des alloréponses médiées par les lymphocytes T. Dans le modèle de transplantation de peau de queue décrit ici, une mutation en trois points (I-Abm12) dans le sillon de présentation de l’antigène de la molécule du CMH de classe II (I-AB) est suffisante pour induire une forte activation allogénique des lymphocytes T CD4+ chez les souris C57BL/6. Les greffes de peau de souris I-Abm12 sur des souris C57BL/6 sont rejetées dans un délai de 12 à 15 jours, tandis que les greffes syngéniques sont acceptées jusqu’à 100 jours. L’absence de lymphocytes T (souris CD3-/- et Rag2-/-) permet l’acceptation de la greffe de peau jusqu’à 100 jours, ce qui peut être surmonté par le transfert de 2 x 104 lymphocytes T de type sauvage ou transgéniques. Les lymphocytes T transférés par adoption prolifèrent et produisent de l’IFN-γ chez les souris Rag2-/- transplantées I-Abm12.

Dans une première approche C57BL / 6 ont été transplantés avec IA allogreffes BM12 et IA b syngrafts. Après élimination de bandage, greffes signes manifestes de la cicatrisation sans fermeture de la zone de contact en souris C57BL / 6 (Figure 1A). Après élimination de bandage, CD4 + T inflammation à médiation cellulaire a conduit à l&#39;apparition de zones nécrotiques (taches rouges) et le rejet des IA allogreffes BM12 dans souris C57BL / 6 dans les 13 jours ...

La greffe de peau de queue est un modèle puissant pour étudier le rejet dépendant des lymphocytes T et l’induction de la tolérance au cours des réponses immunitaires allogéniques chez la souris. Les avantages de ce protocole sont la chirurgie invasive mineure et la facilité de surveillance sans qu’il soit nécessaire de sacrifier la souris receveuse.

Transplantation de queue peau d&#39;étudier allogéniques CD4 réponses des cellules T chez la souris

The study of T cell responses and their consequences during allo-antigen recognition requires a model that enables one to distinguish between donor and ...

L'objectif général de la procédure suivante est d'effectuer une greffe de peau de la queue. Pour étudier le rejet médié par les lymphocytes T ou l'induction de tolérance dans un modèle murin, on commence par prélever la peau de la queue d'une souris donneuse. Dans une deuxième étape, le site de greffe est préparé sur l'animal receveur.Ensuite, la greffe est transplantée et fixée à l’aide d’un adhésif tissulaire et d’un pansement lors de l’étape finale. Le pansement est retiré sept jours après la transplantation et la greffe est évaluée. En définitive, la réponse alloanimmunitaire médiée par les lymphocytes T peut être étudiée.Cette technique de greffe de peau de la queue fournit un modèle puissant pour l'étude du rejet et de l'induction de la tolérance dépendants des lymphocytes T lors des réponses immunitaires allogéniques chez la souris. Avant de commencer la procédure, ouvrez les bandages adhésifs en forme de doigt et appliquez de la vaseline sur les tampons de plaie à l’aide d’un coton-tige, en veillant à ce que la gaze soit entièrement recouverte. Ensuite, désinfectez la queue d’une souris donneur euthanasiée à l’aide d’une solution de désinfection.Ensuite, positionnez la queue sur une planchette en plastique propre. Tournez la bande noire supérieure vers le bas et pratiquez une incision superficielle longitudinale à travers la peau le long de la ligne médiane de la queue. Utilisez une pince de maintien pour détacher la peau, puis placez le tissu dans une boîte de culture cellulaire de 10 centimètres remplie de 10 millilitres de HBSS.Raser la zone dorsale d’un souris récipient anesthésiée et utiliser un morceau de gaze sèche pour éliminer tous les poils indésirables. Après avoir désinfecté la zone de greffe rasée avec une solution aseptique, pincer la peau avec une pince en milieu du côté droit du dos et utiliser des ciseaux courbes pour pratiquer une incision circulaire d’environ un sur 0,6 centimètre de diamètre. Ensuite, utiliser un scalpel pour découper un greffon à partir de la peau caudale prélevée sur le donneur, arrondir les coins du tissu, charger le greffon sur le scalpel, puis absorber l’excès de HBSS à l’aide d’un coton stérile.Ensuite, placez le tissu desséché sur le lit de greffe de la souris receveuse. Évitez le recouvrement entre la peau du donneur et celle de l'hôte en appliquant l'adhésif tissulaire uniquement sur la zone de contact. Puis enroulez une bande de pansement sans plis autour de la taille de la souris et appliquez un bandage adhésif inélastique afin de fixer le pansement sur la souris, empêchant ainsi la souris de s'accrocher les dents dans le bandage.Pendant la récupération, réalisez une incision de trois millimètres sur le côté ventral supérieur du tissu. Après un rétablissement complet sur un tapis chauffant, remettez l’animal transplanté dans sa cage et évaluez sa mobilité. Pour s’assurer que le pansement n’est pas trop serré, traitez la souris avec du sirop de paracétamol dans l’eau de l’animal pendant sept jours.Après six à sept jours, utilisez des ciseaux d'artère stériles pour couper et retirer soigneusement les pansements en prenant garde d'éviter toute extension du site de greffe. Enfin, surveillez les souris greffées pour détecter les signes cliniques et évaluez le rejet des greffes cutanées. Dans cette expérience, des souris C57BL/6 ont reçu des allogreffes IABM12 et des greffes IAB sin.Après le retrait des pansements, la greffe présentait des signes de cicatrisation sans fermeture de la zone de contact chez les souris C 57 BL six. Une à deux semaines plus tard, une inflammation médiée par des lymphocytes T CD quatre positifs a conduit à l’apparition de zones nécrotiques au sein de la greffe. Le rejet des allogreffes I A BM 12 a été observé chez les souris C 57 BL six dans les 13 jours suivant la transplantation.Bien que les greffes syngéniques aient été tolérées jusqu'à 100 jours. Le rejet de la peau des queues présentant un désaccord au niveau des molécules du complexe majeur d'histocompatibilité de classe II dépend de la présence de lymphocytes T positifs pour le CD quatre d'origine allogénique. Par exemple, les souris déficientes en lymphocytes T, de type knock-out pour le CD trois E, ainsi que les souris déficientes à la fois en lymphocytes T et B, de type knock-out pour le RAG deux, présentent une cicatrisation complète des plaies et tolèrent les greffes I a BM 12 pendant jusqu'à 100 jours.L'acceptation du greffon de peau de queue allogénique IABM 12 permet l'étude des lymphocytes T CD4 positifs et de leurs fonctions effectrices dans un modèle murin sans pathologies graves. L'avantage de ce modèle de transplantation de peau de queue est que l'analyse fonctionnelle des lymphocytes T CD4 positifs peut être facilement réalisée par transfert adoptif de lymphocytes T CD4 positifs spécifiques de l'antigène. Dans cette expérience représentative, le transfert de deux fois 10 à la puissance quatre cellules A BM transgéniques spécifiques de l'antigène a suffi à induire le rejet des greffons IABM 12 chez des souris knock-out rag deux en 13 jours. Les cellules A BM exprimant les chaînes TCR V alpha deux V beta huit ont été observées se multiplier intensément lors du test de dilution EFL six 70 et produire de l'IFN Gamma après stimulation par la PMA.Ces données démontrent que seules quelques cellules T CD4 positives allogéniques sont nécessaires pour provoquer le rejet de greffes cutanées de souris A BM 12, ce qui en fait un modèle idéal pour l'analyse des cellules T allogéniques en l'absence de pathologie sévère. Après avoir visionné cette vidéo, vous devriez avoir une bonne compréhension de la façon d'effectuer une greffe de peau de queue et de surveiller avec succès le rejet de la greffe.

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JoVE Journal

Immunology and Infection

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Expression de la cytokine exogène dans les xénogreffes dérivées par un patient par injection avec une lignée cellulaire Stromal transduites par une cytokine

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Transplantation de queue peau d'étudier allogéniques CD4 réponses des cellules T chez la souris

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