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DOI: 10.3791/51757-v
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Nous décrivons ici notre stratégie pour obtenir des enregistrements unitaires stables et bien isolés à partir d’interneurones inhibiteurs identifiés dans le cortex de souris anesthésié. Les neurones exprimant ChR2 sont identifiés par leur réponse à la lumière bleue. La méthode utilise un équipement d’enregistrement extracellulaire standard et constitue une alternative peu coûteuse à l’imagerie calcique ou au patching guidé visuellement.
L’objectif global de l’expérience suivante est d’obtenir des enregistrements unitaires extracellulaires de haute qualité à partir d’interneurones corticaux chez des souris exprimant le canal rootin two. Ceci est réalisé en faisant avancer une électrode d’enregistrement à haute impédance à travers le tissu pour identifier les interneurones à partir des réponses de pointe aux impulsions de lumière bleue. Le signal électrique est surveillé pour détecter les changements qui indiquent la vitesse d’avance appropriée et la probabilité d’obtenir un enregistrement stable et bien isolé.
S’il n’est pas possible d’obtenir une bonne isolation unitaire ou, à l’inverse, si les neurones sensibles à la lumière sont rarement rencontrés, remplacez l’électrode d’enregistrement. Les résultats montrent la fiabilité des réponses de la lumière évoquée à partir de neurones identifiés optiquement et le rapport signal sur bruit typique obtenu avec cette stratégie. L’approche de photostimulation est un moyen accessible et peu coûteux de cibler des types de cellules génétiquement identifiés à l’aide d’un amplificateur extracellulaire standard et de la lumière bleue.
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