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Un guide pour In vivo Simple unité d'enregistrement de Optogenetically identifié cortica...
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JoVE Journal Neuroscience
A Guide to In vivo Single-unit Recording from Optogenetically Identified Cortical Inhibitory Interneurons

Un guide pour In vivo Simple unité d'enregistrement de Optogenetically identifié corticale inhibitrice Interneurones

Full Text
19,803 Views
10:32 min
November 7, 2014

DOI: 10.3791/51757-v

Alexandra K. Moore1, Michael Wehr1

1Institute of Neuroscience,University of Oregon

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Nous décrivons ici notre stratégie pour obtenir des enregistrements unitaires stables et bien isolés à partir d’interneurones inhibiteurs identifiés dans le cortex de souris anesthésié. Les neurones exprimant ChR2 sont identifiés par leur réponse à la lumière bleue. La méthode utilise un équipement d’enregistrement extracellulaire standard et constitue une alternative peu coûteuse à l’imagerie calcique ou au patching guidé visuellement.

L’objectif global de l’expérience suivante est d’obtenir des enregistrements unitaires extracellulaires de haute qualité à partir d’interneurones corticaux chez des souris exprimant le canal rootin two. Ceci est réalisé en faisant avancer une électrode d’enregistrement à haute impédance à travers le tissu pour identifier les interneurones à partir des réponses de pointe aux impulsions de lumière bleue. Le signal électrique est surveillé pour détecter les changements qui indiquent la vitesse d’avance appropriée et la probabilité d’obtenir un enregistrement stable et bien isolé.

S’il n’est pas possible d’obtenir une bonne isolation unitaire ou, à l’inverse, si les neurones sensibles à la lumière sont rarement rencontrés, remplacez l’électrode d’enregistrement. Les résultats montrent la fiabilité des réponses de la lumière évoquée à partir de neurones identifiés optiquement et le rapport signal sur bruit typique obtenu avec cette stratégie. L’approche de photostimulation est un moyen accessible et peu coûteux de cibler des types de cellules génétiquement identifiés à l’aide d’un amplificateur extracellulaire standard et de la lumière bleue.

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Neuroscience Numéro 93 Optogenetics channelrhodopsin ChR2 cortex In vivo Enregistrement extracellulaire Parvalbumine interneurones souris électrophysiologie

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