Isolement de l'ARN de souris Pancréas: un tissu de Ribonuclease riche

L’objectif global de cette procédure est d’isoler l’ARN avec une grande intégrité du pancréas de souris à crête de ribonucase. Pour ce faire, on retire rapidement le pancréas de la carcasse d’une souris euthanasiée. Ensuite, le pancréas a été immergé dans le réactif de lyse et le tissu est homogénéisé.

Après la centrifugation, l’ARN est isolé du surnageant à l’aide de protocoles standard et la solution inhibitrice d’ARN est ajoutée à la solution finale d’ARN. La dernière étape consiste à nettoyer soigneusement les lames de l’homogénéisateur en enlevant tous les morceaux de tissu coincés dans les lames, puis en effectuant une série de lavages à l’éthanol et à l’eau. En fin de compte, cette procédure permet d’isoler l’ARN du pancréas de souris dont le nombre d’intégrité de l’ARN est supérieur à sept pour l’analyse de routine de l’expression génique