Les mesures comportementales et locomotrices grâce à un système de surveillance d'activité en plein champ pour les maladies musculaires squelettiques

L’objectif général de cette procédure est de mesurer la locomotion et l’activité comportementale des souris dans un environnement en plein champ. La première étape consiste à acclimater les souris à la chambre en plein champ pendant quatre jours consécutifs. Après l’acclimatation, l’activité comportementale est enregistrée à l’aide d’un logiciel spécialisé.

Chaque jour, les données sont exportées et examinées à des fins de contrôle de la qualité. Après les tests, les données sont analysées pour détecter plusieurs paramètres comportementaux. En fin de compte, l’activité en plein champ est utilisée pour montrer les différences entre les animaux témoins et les animaux d’essai de manière non invasive.

L’avantage de cette méthode non invasive est qu’elle permet une évaluation globale de la qualité de vie générale de manière longitudinale. Cela imite le test de marche de six minutes utilisé comme mesure des résultats cliniques et donne un aperçu des effets potentiels des médicaments hors cible pour les meilleurs résultats. Assurez-vous que tous les animaux sont correctement acclimatés et que les tests sont effectués à la même heure chaque jour, et qu’il s’agit d’une pièce calme à température et humidité contrôlées avec un éclairage uniforme.

Pour commencer, amenez les souris dans la salle de test et laissez-les s’acclimater pendant environ 10 minutes. Quittez la pièce pendant ce temps. Ensuite, retournez dans la pièce et allumez les chambres d’activité.

Même si les données ne sont pas collectées pour le moment, cela imitera l’environnement de test. La chambre d’activité utilisée dans ce protocole contient un séparateur central qui divise la chambre en quadrants. Assurez-vous que le séparateur est correctement aligné à l’intérieur de la chambre.

Ensuite, retirez délicatement chaque souris de sa cage domestique et placez-les immédiatement dans un quadrant vide. Une fois que tous les animaux sont chargés, placez le couvercle sur le dessus et quittez la pièce. Laissez les animaux s’acclimater à la chambre d’essai pendant 60 minutes après la période d’acclimatation.

Retournez dans la pièce et retirez le couvercle. Remettez doucement chaque souris dans sa cage d’origine. Nettoyez soigneusement chaque chambre avec un désinfectant et des serviettes en papier entre chaque session.

Répétez ces étapes pendant quatre jours consécutifs une semaine avant la collecte initiale des données. Prenez soin d’attribuer au hasard les animaux à une nouvelle boîte à chaque séance pour éviter l’accoutumance et suivez les affectations des boîtes pendant toute la durée de l’étude. Pour mesurer l’activité en plein champ, amenez les souris dans la salle d’essai pour qu’elles s’acclimatent pendant 10 à 30 minutes.

Quittez la pièce pendant ce temps. Après ce temps, retournez dans la pièce et allumez les chambres d’activité. Ensuite, ouvrez le logiciel informatique qui l’accompagne et qui enregistrera les mouvements de l’animal.

Définissez les paramètres de collecte de données primaires dans le logiciel informatique pour collecter six blocs de données de 10 minutes, puis entrez la date, le nom de fichier et les numéros d’identification de souris appropriés. Une fois tous les paramètres définis, effectuez une vérification avant le faisceau pour vérifier que tous les faisceaux infrarouges fonctionnent correctement. Si la chambre ne passe pas le contrôle de pré-poutre, cela est probablement dû à un mauvais alignement du séparateur central.

Si cela se produit, réalignez le séparateur jusqu’à ce que les capteurs soient débloqués et que le système soit prêt. Lorsque toutes les chambres d’essai sont prêtes, retirez délicatement la souris de sa cage d’accueil et placez-la dans la chambre d’essai. Deux animaux peuvent être placés en même temps dans la chambre d’essai pendant la collecte des données.

Par exemple, un animal peut être placé dans le quadrant avant gauche et un autre dans le quadrant arrière droit. Placez le couvercle sur le dessus des chambres une fois que tous les animaux sont chargés, puis démarrez le programme pour commencer la collecte de données. Le programme commencera à enregistrer les niveaux d’activité en fonction des paramètres de collecte de données définis précédemment.

Quittez la salle d’essai pour la durée de la période d’essai. Retournez dans la salle une fois la collecte des données terminée. Enregistrez les données, puis retournez chaque animal dans sa cage d’origine respective.

Nettoyez tous les appareils avec un désinfectant et des serviettes en papier avant de tester un autre groupe d’animaux. Après le test, exportez les données vers une feuille de calcul. Le logiciel calcule plusieurs paramètres au cours de la période de collecte des données.

Pour chaque souris, examinez toutes les données à des fins de contrôle qualité. Répétez ces étapes pendant quatre jours consécutifs. Prenez soin d’attribuer au hasard les animaux à une nouvelle boîte à chaque session et de suivre les affectations de boîtes pendant toute la durée de l’étude.

Enfin, calculez l’activité horizontale moyenne. Activité verticale, distance totale parcourue, temps total de mouvement et temps de repos total des quatre jours de collecte de données. Ces résultats montrent des niveaux d’activité typiques en plein champ chez les souris mâles et femelles ddy two J laminate alpha two dystrophie musculaire congénitale déficiente, les souris et les souris témoins au fil du temps, l’activité horizontale était plus élevée chez les souris témoins, tout comme l’activité verticale et la distance totale parcourue.

Deux souris J ont également montré une perte complète d’activité verticale à l’âge de 19 semaines, ce qui reflète leur paralysie des membres postérieurs et, à son tour, leur incapacité à se cabrer à l’âge de six semaines pendant la phase nécrotique maximale. Dans le modèle animal de la dystrophie musculaire de Duchenne, les souris MDX présentent des niveaux plus faibles d’activité horizontale, d’activité verticale et de distance totale parcourue. Des différences dans l’activité en plein champ ont également été mises en évidence entre les souris de différentes souches.

souris BL 10 avaient une activité horizontale, une activité verticale et une distance totale parcourue plus élevées que les souris L six. Étant donné que l’activité comportementale est sujette à de grandes variations, l’activité en plein champ peut ne pas être une mesure principale appropriée. Cependant, il peut s’agir d’une mesure de résultat secondaire très précieuse dans les études précliniques lorsqu’elle est menée avec des tests histologiques et moléculaires fonctionnels supplémentaires.