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DOI: 10.3791/51792-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This protocol outlines the dissection of imaginal discs from Drosophila larvae for immunohistochemistry. It highlights the importance of imaginal discs in understanding developmental processes and gene expression.
Les structures adultes de la drosophile sont dérivées de structures en forme de sac appelées disques imaginaux. L’analyse de ces disques donne un aperçu de nombreux processus de développement, notamment la détermination des tissus, l’établissement des limites des compartiments, la prolifération cellulaire, la spécification du destin cellulaire et la polarité cellulaire planaire. Ce protocole est utilisé pour préparer des disques imaginaux pour la microscopie optique/fluorescente.
L’objectif global de cette procédure est de disséquer les disques imaginaux des larves de drosophile Pour l’immunohistochimie, cela est accompli en retirant d’abord le complexe de tête composé de la bouche, des crochets, de l’œil et des disques ténaux, et du cerveau des larves. La deuxième étape consiste à fixer le complexe de tête et à l’incuber avec des anticorps primaires et secondaires. Ensuite, l’œil et les disques ténaux sont séparés du complexe de la tête.
La dernière étape consiste à monter les disques imaginaux dans un agent anti-blanchiment sur une lame de verre. En fin de compte, les rapporteurs fluorescents ou LAC Z et la coloration des anticorps peuvent révéler l’expression spatiale et temporelle des gènes et des protéines dans les tissus imaginaires à l’aide de la microscopie à fluorescence. Bien que cette technique puisse être utilisée pour donner un aperçu de la localisation des gènes et des protéines dans le disque imaginaire enten.
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