10 septembre 2014
Le but de cette vidéo est de présenter la technique modifiée de biopsie du muscle squelettique de Bergström sur des sujets humains.
L’objectif global de cette procédure est d’utiliser la technique de Bergstrom modifiée pour réaliser un échantillon de biopsie musculaire squelettique à partir des vastes latéraux d’un volontaire humain. Pour ce faire, on anesthésie d’abord la peau et le tissu sous-cutané au site de la biopsie. Dans la deuxième étape, une incision est pratiquée à travers le tissu sous-cutané de la peau et le fascia recouvrant le muscle squelettique.
Ensuite, l’aiguille de biopsie est avancée à travers les incisions dans le muscle squelettique, et l’échantillon de biopsie est prélevé à l’étape finale. L’aiguille de biopsie est soigneusement retirée et l’incision est fermée avec un adhésif chirurgical. En fin de compte, les échantillons de biopsie des muscles squelettiques peuvent être préparés pour des analyses histologiques et analysés pour détecter des altérations biochimiques et l’expression de protéines et de gènes spécifiques dans diverses conditions d’exercice.
Cette méthode peut aider à répondre à des questions clés dans le domaine de la physiologie des muscles squelettiques, telles que les réponses biochimiques, moléculaires et cellulaires à l’exercice intense. La démonstration de la procédure sera assurée par le Dr Gerald Ferris, médecin de notre hôpital local, et Maschi Tanaka, un technicien de notre laboratoire. Après avoir obtenu le consentement éclairé, demandez au sujet de s’allonger sur une table rembourrée, la cuisse exposée, de positionner la jambe de manière détendue avec un petit rouleau de serviette sous le talon de sorte que le genou soit complètement étendu et surélevé d’environ un centimètre.
Ensuite, demandez au sujet de contracter momentanément le muscle de la cuisse exposé afin que le vaste site de biopsie latérale puisse être visualisé juste avant le fascia. Lata environ un tiers de la distance entre le sommet de la rotule et le grand trocanter. Ensuite, utilisez une tondeuse pour retirer les cheveux d’une région d’environ 15 centimètres sur 15 autour du site de biopsie et stérilisez la zone avec des écouvillons pré-imbibés d’un antiseptique topique pour prélever la biopsie à l’aide d’un EPI approprié et d’une technique septique.
Vaporisez d’abord du chlorure d’éthyle sur le site d’incision jusqu’à ce que la peau semble blanchir. Ensuite, insérez une aiguille de calibre 25 horizontalement dans le derme, aspirez l’aiguille et distribuez environ 100 microlitres de lidocaïne pour produire une bulle de deux à quatre millimètres de diamètre sous la surface de la peau. Ensuite, avancez l’aiguille dans le tissu sous-cutané, aspirez à nouveau et distribuez environ un millilitre de lidocaïne pour former une autre bulle.
Une fois que la deuxième bulle s’est affaissée, insérez l’aiguille dans le site d’incision, en s’arrêtant superficiellement au fascia, aspirez l’aiguille une dernière fois, puis injectez lentement les quatre millilitres de lidocaïne restants tout en retirant l’aiguille de la cuisse. Après deux à trois minutes, sondez légèrement le site de la biopsie avec la pointe d’un scalpel stérile pour confirmer l’anesthésie. Lorsque le site est prêt, faites une incision droite d’un centimètre à travers la peau et les tissus sous-cutanés à un angle de 45 degrés par rapport au fémur.
Ensuite, une fois dans chaque direction, insérez le scalpel suffisamment profondément pour faire une incision à travers le fascia dans le muscle. En général, les personnes qui débutent dans cette méthode doivent être patientes car elles apprennent à sentir le changement de résistance entre le tissu sous-cutané et le fascia lors de l’administration de l’anesthésique local et lors de la coupe à travers la peau, le tissu sous-cutané et le fascia. Introduisez maintenant l’aiguille de biopsie dans le tissu au même angle que l’incision a été pratiquée jusqu’à ce que la pointe pénètre dans le fascia.
Avancez l’aiguille juste au-delà du fascia à un angle vers le bas lorsqu’elle avance dans le muscle. Demandez au sujet de rester détendu et de ne pas contracter le muscle de la cuisse pendant que l’aiguille est avancée. Ensuite, une fois que l’aiguille de biopsie est en place, ouvrez une seringue jetable de 60 millilitres jusqu’à ce qu’elle atteigne la marque de 40 à 50 millilitres pour créer une aspiration à l’intérieur de l’aiguille de biopsie.
Tirez le trocart intérieur d’environ un centimètre pour ouvrir la fenêtre de la canule externe tout en maintenant la position de la canule externe dans le muscle. Fermez ensuite rapidement le trocart intérieur pour couper et prélever l’échantillon de muscle. Ensuite, ouvrez le robinet d’arrêt pour libérer l’aspiration et faites pivoter l’aiguille de biopsie de 90 degrés, en répétant le processus jusqu’à trois fois pour un total de quatre clips.
Retirez ensuite l’aiguille de biopsie de la cuisse lors du retrait de l’aiguille. Tirez le trocart intérieur vers l’arrière d’un centimètre et inspectez visuellement la lumière de la canule externe pour estimer si une quantité adéquate de tissu a été collectée. Appliquez une pression directe sur le site de biopsie avec de la gaze stérile et un sac de glace pendant 10 à 15 minutes.
Pendant ce temps, retirez le tissu de l’aiguille de biopsie Après le glaçage, fermez l’incision d’une main tout en appliquant une seule couche d’adhésif chirurgical sur le dessus de l’incision sèche avec l’autre. Une fois que l’adhésif a durci pendant environ 90 secondes, appliquez des fermetures de ruban perpendiculaires à l’incision, puis placez trois à quatre compresses de gaze non stériles de deux pouces sur deux pouces sur le site de l’incision et fixez-les avec une pellicule adhésive auto-adhésive pour appliquer une pression directe sur le tissu. Enfin, donnez au sujet des instructions verbales et écrites sur les soins appropriés des plaies, les réactions normales et anormales et les directives d’activité pour les jours suivants, d’un à quatre jours.
Dans une étude croisée randomisée contrôlée par placebo, des athlètes d’endurance masculins ont couru sur des tapis roulants pendant trois heures à 70 % VO O2 max et ont consommé une boisson à 6 % de glucides ou un placebo à raison d’un litre par heure. Des biopsies du tissu musculaire squelettique ont été prélevées avant et après l’exercice, et l’expression génique de diverses cytokines a été observée comme étant augmentée dans le tissu musculaire squelettique obtenu d’athlètes d’endurance expérimentés après trois heures de course, il est intéressant de noter que, bien qu’il n’ait aucun effet sur le muscle squelettique, l’épuisement du glycogène, l’apport en glucides a été observé pour atténuer les niveaux d’ARNm IL six et IL huit après son développement. Cette technique a ouvert la voie aux chercheurs dans le domaine de la physiologie musculaire pour explorer des principes tels que l’utilisation du substrat de carburant pendant différentes intensités d’exercice, les dommages musculaires induits par l’exercice et la signalisation intercellulaire, entre autres.
Consultez la transcription complète et accédez à des milliers de vidéos scientifiques
Cette vidéo démontre la technique modifiée de biopsie musculaire squelettique de Bergström sur des sujets humains. Le protocole vise à obtenir un échantillon de biopsie musculaire du vaste latéral pour des analyses ultérieures.
La technique modifiée de biopsie musculaire squelettique de Bergström permet une collecte précise de tissu musculaire humain, soutenant ainsi les études mécanistiques en physiologie de l'exercice et en recherche métabolique. Cette capacité est essentielle pour valider des cibles moléculaires et quantifier les réponses biochimiques aux interventions dans les démarches translationnelles et précliniques. Un accès fiable à des échantillons de tissu humain de haute qualité renforce la confiance prédictive et oriente les décisions de portefeuille ajustées au risque lors des phases initiales de découverte et de développement de biomarqueurs.
Cette technique de biopsie s'intègre à l'interface entre la découverte précoce, la validation de cibles et la recherche translationnelle, fournissant des échantillons critiques de tissus humains pour des analyses moléculaires et cellulaires.