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DOI: 10.3791/51820-v
Richelle Mychasiuk1, Allyson Farran1, Mariana Angoa-Perez2, Denise Briggs2, Donald Kuhn2, Michael J. Esser1
1Alberta Children's Hospital Research Institute,University of Calgary, 2Department of Psychiatry and Behavioral Neurosciences,Wayne State University School of Medicine & John D. Dingell VA Medical Center
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
La technique de chute de poids modifiée est une procédure facile et rentable utilisée pour l’induction de lésions cérébrales traumatiques légères chez les rats juvéniles. Cette nouvelle technique produit une symptomatologie cliniquement pertinente qui fera progresser l’étude des lésions cérébrales traumatiques légères (TCL) et des commotions cérébrales.
L’objectif global de cette procédure est de générer une lésion cérébrale traumatique légère chez les rats juvéniles. Ceci est accompli en préparant d’abord la plate-forme d’induction des blessures. Ensuite, un rat anesthésié est placé face contre terre sur le papier d’aluminium entaillé.
Une fois en place, un poids est lâché pour générer un coup oblique à la tête. L’animal est ensuite placé en position couchée, et le temps qu’il met à s’écrire est enregistré. Le lendemain, les performances sont mesurées sur le test du palmarès.
Le principal avantage de cette technique par rapport aux autres est que les animaux ne sont que brièvement anesthésiés. Il s’agit d’un traumatisme crânien fermé, qui nous permet de répéter plusieurs fois la blessure chez le même animal, et il y a une composante de rotation à la blessure qui est plus pertinente sur le plan clinique. Les implications de cette technique s’étendent au traitement des commotions cérébrales pédiatriques et des lésions cérébrales traumatiques légères, car le modèle induit une symptomatologie cliniquement pertinente de manière hétérogène, démontrant que la procédure sera démontrée par Irene Ma, technicienne dans notre laboratoire et harlene haha.
En étudiant de premier cycle dans notre laboratoire. Pour mettre en place l’appareil de lésion cérébrale traumatique légère, construisez une platine en forme de U en plastique transparent. Placez une éponge au bas de la scène pour récupérer l’animal après sa chute.
Ensuite, marquez un morceau de papier d’aluminium avec une lame de rasoir tranchante. Assurez-vous que le papier d’aluminium entaillé supporte le poids corporel du rat, mais n’interfère pas avec l’accélération après l’impact. Collez le papier d’aluminium entaillé sur le dessus de la platine de manière à ce qu’il soit tau, et placez-le dans la bonne position sous le tube de guidage.
Positionnez le tube de guidage de manière à ce qu’il soit à 3,5 centimètres au-dessus du papier d’aluminium. Ensuite, attachez la ligne de pêche au sommet d’un poids. Placez le poids à l’intérieur du tube de guidage et fixez la ligne de manière à ce que le poids pende à 2,5 centimètres au-dessus de la feuille.
Cette hauteur empêche le rat de recevoir plusieurs coups en toute sécurité. Fixez la ligne de pêche au support de pince. Tirez le poids vers le haut à travers le tube de guidage en plastique avec la ligne de pêche et maintenez-le en place avec une goupille de clé Allen positionnée à une hauteur de 0,5 mètre.
Pour commencer, confirmez la profondeur de la sédation chez un rat anesthésié et placez rapidement la poitrine du rat sur la feuille avec sa tête directement dans la trajectoire du poids qui tombe. Lorsque vous êtes prêt à commencer, tirez sur la goupille de la clé Allen pour permettre au poids de tomber verticalement à travers le tube de guidage en plastique. Une fois frappé, le rat subira rapidement une rotation de 180 degrés et atterrira en position couchée.
Retirez immédiatement le rat de l’éponge de collecte et appliquez de la lidocaïne topique sur la tête du rat avec un applicateur à embout de coton. Ensuite, placez le rat en position couchée dans une cage propre et chauffée. Observez l’animal jusqu’à ce qu’il se réveille de l’anesthésie et passe de la position couchée à la position couchée.
Notez cela comme le temps d’écrire la valeur pour le groupe témoin de blessé fictif. Anesthésier l’animal et le placer sur la scène comme démontré précédemment. Ensuite, retirez le rat du papier d’aluminium sans tirer sur la goupille de la clé Allen et appliquez de la lidocaïne topique sur la tête.
Placez le rat en position couchée dans une cage propre et chauffée et notez le temps nécessaire pour écrire la valeur. Enfin, retournez le rat dans sa cage d’origine après qu’il ait retrouvé un comportement normal et répétez l’opération avec l’animal témoin suivant. 24 heures après l’induction de la lésion cérébrale, retournez les animaux dans la salle d’intervention.
Transférez les rats dans une cage de rétention propre et placez la cage de la maison du rat. À l’extrémité la plus étroite d’une face de poutre conique, la partie ouverte de la cage vers l’extrémité large de la poutre. La poutre conique a une plate-forme centrale avec de petits rebords qui assurent la sécurité.
Placez une caméra vidéo à l’extrémité large du faisceau et ajustez la mise au point jusqu’à ce que toute la longueur soit visible. Lorsque vous êtes prêt, placez le rat à l’extrémité large de la poutre effilée et encouragez-le à traverser la poutre vers sa cage d’origine. Une fois que le rat a traversé le faisceau et est entré dans la cage de la maison, laissez-le se reposer pendant au moins 60 secondes.
Pour renforcer l’emplacement cible, il s’agit de l’essai numéro un et n’est pas inclus dans l’analyse. Ensuite, allumez la caméra vidéo et laissez le rat terminer la tâche de marche sur la poutre pendant des temps supplémentaires, en maintenant les 62e périodes de renforcement dans la cage de la maison. Une fois que le rat a terminé tous les essais, retournez-le dans la cage d’origine et testez l’animal suivant.
Si l’animal tombe de la poutre pendant l’essai, ramassez-le immédiatement et remettez-le sur la poutre à l’endroit d’où il est tombé. Pour noter les données. Après le test, notez le nombre de glissades de la patte arrière et le temps total nécessaire pour traverser la poutre pour chaque essai individuel.
Utilisez ces données pour calculer les valeurs moyennes pour chaque animal et groupe d’essai. Ce graphique compare les différences moyennes dans le temps d’écriture des scores entre les rats juvéniles qui ont subi une seule lésion cérébrale et ceux des témoins fictifs. Les rats blessés ont montré une augmentation significative de la durée nécessaire pour s’écrire à partir de la position couchée.
Ici, le nombre moyen de glissades des pattes arrière lors de la marche sur poutre est montré pour les rats juvéniles qui ont subi une seule blessure. Comparativement aux rats blessés simulés, les animaux blessés présentaient beaucoup plus de glissades des pieds sur la poutre que les témoins suivant cette procédure. D’autres interventions non invasives, telles que la thérapie par le jeu, peuvent ensuite être explorées pour déterminer si ces interventions sont réellement en mesure d’améliorer certains des déficits sociaux que les enfants éprouvent à la suite. Commotion.
Après avoir regardé cette vidéo, vous devriez avoir une bonne compréhension de la façon d’induire et de détecter en toute sécurité une lésion cérébrale traumatique légère chez les rongeurs juvéniles. Cela peut être répété à plusieurs moments.
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