Name: Analyse métabolomique de cerveau de rat par la Résolution nucléaire Haute spectroscopie par résonance magnétique dextraits de tissus (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-09-21T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 1 s
Description: Découvrez l'analyse métabolomique du cerveau de rat par spectroscopie RMN haute résolution. Cette méthode permet d'obtenir des profils métaboliques détaillés pour étudier les changements neurochimiques liés aux maladies neurologiques.

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Soutien du Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS, UMR 6612 et 7339) est vivement remercié.

<ol><li>Manger, P. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Is+21st+century+neuroscience+too+focused+on+the+rat%2Fmouse+model+of+brain+function+and+dysfunction%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Neuroanat%22%5BJournal%5D)">Is 21st century neuroscience too focused on the rat/mouse model of brain function and dysfunction.</a> Front Neuroanat. 2, 5(2008).</li>
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<li>Lutz, N. W., Cozzone, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiparametric+optimization+of+%2831%29P+NMR+spectroscopic+analysis+of+phospholipids+in+crude+tissue+extracts+2+Line+width+and+spectral+resolution%5BTitle%5D)+AND+%22Anal+Chem%22%5BJournal%5D)">Multiparametric optimization of (31)P NMR spectroscopic analysis of phospholipids in crude tissue extracts 2 Line width and spectral resolution.</a> Anal Chem. 82, 5441-5446 (2010).</li>
<li>Lutz, N. W., Cozzone, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiparametric+optimization+of+%2831%29P+NMR+spectroscopic+analysis+of+phospholipids+in+crude+tissue+extracts.+1.+Chemical+shift+and+signal+separation%5BTitle%5D)+AND+%22Anal+Chem%22%5BJournal%5D)">Multiparametric optimization of (31)P NMR spectroscopic analysis of phospholipids in crude tissue extracts. 1. Chemical shift and signal separation.</a> Anal Chem. 82, 5433-5440 (2010).</li>
<li>Lutz, N. W., Cozzone, P. J. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aLutz%2C+NW+%22Methodologies+for+Metabolomics%22">Methodologies for Metabolomics</a>. Lutz, N. W., Sweedler, J. V., Wevers, R. A. , Cambridge University Press. New York. (2013).</li>
<li>Lutz, N. W., Fernandez, C., Pellissier, J. F., Cozzone, P. J., Beraud, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cerebral+biochemical+pathways+in+experimental+autoimmune+encephalomyelitis+and+adjuvant+arthritis+a+comparative+metabolomic+study%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Cerebral biochemical pathways in experimental autoimmune encephalomyelitis and adjuvant arthritis a comparative metabolomic study.</a> PLoS ONE. 8, e56101(2013).</li>
<li>Lutz, N. W., Cozzone, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Principles+of+multiparametric+optimization+for+phospholipidomics+by+31P+NMR+spectroscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Biophys+Rev%22%5BJournal%5D)">Principles of multiparametric optimization for phospholipidomics by 31P NMR spectroscopy.</a> Biophys Rev. 5, 295-304 (2013).</li>
<li>Pearson, G. A. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPearson%2C+GA+%22Shimming+an+NMR+magnet%22">Shimming an NMR magnet</a>. , University of Iowa. Iowa City. (1991).</li>
<li>Lane, A. N., Fan, T. W. M., Higashi, R. M. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aLane%2C+AN+%22Biophysical+tools+for+biologists%22">Biophysical tools for biologists</a>. Correia, J. J., Detrich, H. W. Vol. 1, In vitro techniques, Academic Press. Waltham. (2008).</li>
<li>Peeling, J., Wong, D., Sutherland, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nuclear+magnetic+resonance+study+of+regional+metabolism+after+forebrain+ischemia+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Nuclear magnetic resonance study of regional metabolism after forebrain ischemia in rats.</a> Stroke. 20, 633-640 (1989).</li>
</ol>

Les auteurs n’ont rien à divulguer.

La spectroscopie de RMN est une méthode efficace pour mesurer les concentrations des composés chimiques en solution d&#39;une manière très reproductible et précise. Cependant, pour obtenir des données de haute qualité, il est nécessaire de respecter certaines règles concernant la préparation et l&#39;analyse des échantillons. Dans la détermination de concentrations de métabolites par spectroscopie RMN, ni la production ni la réception du signal de RMN domine l&#39;erreur de quantification, à moins que l&#39;intensité d&...

Les modèles murins ont été utilisés largement dans la recherche du cerveau 1. Corrélation génotype-phénotype ont été étudiés dans le cerveau de souris et de rats par l&#39;étude de l&#39;expression des gènes à l&#39;ARN et / ou les taux de protéine, d&#39;une part, et les phénotypes morphologiques, fonctionnelles, électrophysiologiques et / ou du comportement de l&#39;autre 6.2. Toutefois, pour bien comprendre les mécanismes liant phénotype génotype, il est impératif d&#39;enquêter sur les événements moléculaires en aval de l&#39;expression des protéines, c&#39;est à dire. le métabolisme des substrats biochimiques des enzymes qui agissent sur ​​7. Cette exigence a conduit, au cours des 10 à 15 dernières années, à une renaissance de la recherche métabolique dans de nombreuses branches de la biologie 8,9. Alors que les études métaboliques classiques ont souvent été axées sur les détails de voies spécifiques, la nouvelle approche métabolomique est orientée vers une enquête englobe tout du profil métabolique global du tissu à l&#39;étude.Une conséquence de ce concept est une nécessité évidente pour les outils d&#39;analyse qui minimisent biais en faveur des voies et / ou classes de composés métaboliques spécifiques. Cependant, un dosage biochimique classique est basé sur une réaction chimique particulière d&#39;un analyte spécifique qui doit être déterminée avant le dosage est effectué. En revanche, les techniques spectroscopiques telles que la résonance magnétique (RMN) nucléaire et la spectrométrie de masse (MS) (i) sont basés sur certaines moléculaires propriétés (physiques) des composés biochimiques, dont chacune donne lieu à une ou plusieurs signaux distincts dans un spectre détectées au cours d&#39;une expérience; et (ii) détecter un grand nombre de composés différents par expérimentation. Ainsi, chaque spectre contient les informations combinées de toute une série de métabolites. Pour cette raison, les méthodes spectroscopiques sont des outils appropriés pour la métabolomique, comme aucune sélection préalable doit être faite en ce qui concerne la nature de l&#39;analyte à mesurer huit </sup&gt;. En conséquence, ces techniques se prêtent naturellement à des études exploratoires car ils facilitent grandement la détection de changements métaboliques inattendues. Bien que la spectroscopie RMN et MS peuvent être utilisés indifféremment pour l&#39;analyse de nombreux métabolites, chaque méthode présente des avantages et des inconvénients qui ont été récemment examinés 10 spécifiques. En bref, la spectroscopie RMN peut généralement être effectuée à partir des extraits bruts et ne nécessite pas la séparation chromatographique de composés de l&#39;échantillon avant l&#39;analyse. En revanche, MS fonctionne avec du gaz ou la chromatographie liquide (GC ou LC) séparation, sauf pour certains développements récents tels que l&#39;imagerie par spectrométrie de masse. Dans quelques cas particuliers, tels que l&#39;analyse des sucres, la séparation des cristaux liquides peut devenir une nécessité pour la spectroscopie RMN et, car les lignes de résonance des différents sucres se chevauchent de manière significative au proton (1 H) Les spectres de RMN. Néanmoins, 1 H spectroscopie RMN sans chrséparation omatographic reste la méthode la plus populaire métabolomique, presque universellement appliquée RMN. En général, la préparation de l&#39;échantillon est plus longue et complexe pour MS que pour la spectroscopie RMN. Problèmes graves en raison des effets de matrice sont beaucoup moins fréquents en spectroscopie RMN que dans les États membres où elles peuvent conduire à des signaux considérablement atténués. Métabolite quantification peut être réalisée avec les deux méthodes. Cependant, plusieurs types de composés sont nécessaires pour la MS en raison de variations dans les effets de matrice et de l&#39;efficacité d&#39;ionisation entre les métabolites. En revanche, une seule norme par échantillon est nécessaire pour une analyse spectroscopique RMN car dans des conditions de mesure appropriés, la dernière méthode est intrinsèquement grâce quantitatives à la réponse RMN strictement linéaire par les noyaux observés. Un inconvénient majeur de RMN est sa sensibilité relativement faible. MS, en particulier LC-MS, est plus sensible que la RMN de plusieurs ordres de grandeur; pour cette raison, la SEP est préférable à la RMN pourl&#39;analyse des composés d&#39;origine à des concentrations très faibles. D&#39;autre part, la nature non destructive de l&#39;expérience de RMN est un net avantage sur MS; de cette façon, la RMN peut être effectuée plusieurs fois sur le même échantillon, par exemple, pour les différents noyaux de RMN-actifs tels que le 1 H, du phosphore 31 (31 P), le carbone 13 (13 C), du fluor 19 (19 F) etc., étant donné qu&#39;aucun produit est consommé par RMN, par opposition à des mesures de sclérose en plaques. Les deux RMN et MS peuvent être utilisés dans des modes différents, chacun d&#39;eux étant optimale pour la détection de composés possédant des caractéristiques chimiques. Par exemple, 31 P RMN est souvent mieux que 1 H RMN pour l&#39;analyse de composés phosphorylés modérément concentrée, bien que presque tous les métabolites phosphorylés contiennent également des protons. Cependant, leurs signaux RMN 1 H peuvent être masquées par une signaux H RMN d&#39;autres composés, non phosphorylés, tandis que le secondévidemment pas provoquer un bruit de fond dans 31 spectres RMN P. Dans une situation analogue, 19 F analyse RMN est préférable pour les composés fluorés, par exemple, les médicaments fluorés (pas de signaux de fond de métabolites endogènes), tandis que le cas particulier de RMN 13 C est d&#39;un intérêt presque exclusivement si le sort de 13 C précurseurs métaboliques marqués exogènes doivent être suivis, en raison de la très faible abondance naturelle de l&#39;isotope 13 C (environ 1%). Beaucoup de spectromètres de masse travaille en mode ion négatif ou en mode d&#39;ions positifs. Par conséquent, il est important de savoir à l&#39;avance si l&#39;analyse des ions à observer sont chargés positivement ou négativement. Nous nous concentrons ici sur un protocole pour l&#39;analyse du métabolome de tissu cérébral par 1 H et 31 spectroscopie RMN P parce que cette méthode donne un grand nombre de concentrations de métabolites importants à faible coût en termes de (i) le temps nécessaire pour la préparation des échantillons d&#39;une (ii) l&#39;effort nécessaire pour le métabolite quantification. Toutes les expériences peuvent être effectuées en utilisant l&#39;équipement d&#39;un laboratoire de chimie par voie humide classique et un centre de la spectroscopie RMN à haute résolution. D&#39;autres exigences sont décrites dans la section ci-dessous de protocole.

<table><tbody><tr><td>Isoflurane</td><td>Virbac</td><td>Vetflurane</td><td>Anesthésique pour animaux</td></tr><tr><td>Vaporisateur Isoflurane</td><td>Ohmeda</td><td>Isotec 3</td><td>Nouveau modèle disponible : Isotec 4</td></tr><tr><td>Scalpel, ciseaux, pinces, pinces</td><td>Harvard Apparatus Fisher Scientific</td><td>divers divers</td><td>Matériel chirurgical pour animaux</td></tr><tr><td>Outil de congélation</td><td>homebuilt</td><td>n/a</td><td>Pince avec plaques en aluminium, à insérer dans l’azote liquide pour le refroidissement</td></tr><tr><td>Dewar</td><td>Nalgene</td><td>4150-4000</td><td></td></tr><tr><td>Azote liquide</td><td>Air Liquide</td><td>n/a</td><td></td></tr><tr><td>Azote gazeux</td><td>Air Liquide</td><td>n/a</td><td></td></tr><tr><td>Évaporateur d’azote</td><td>Organomation Associates</td><td>N-EVAP 111</td><td>Peut être remplacé par un appareil de construction artisanale</td></tr><tr><td></td><td>Mortier Sigma-Aldrich</td><td></td><td></td>Z247472</tr><tr><td>Pilon</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>Z247510</td><td></td></tr><tr><td>Homogénéisateur</td><td>de tissus Kinematica</td><td>Polytron</td><td>Avec tubes à essai adaptant l’arbre de l’homogénéisateur</td></tr><tr><td>Balance électronique</td><td>Sartorius</td><td>n/a</td><td></td></tr><tr><td>Méthanol</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>M3641</td><td></td></tr><tr><td>Chloroforme</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>366910</td><td></td></tr><tr><td>Tubes à centrifuger en verre</td><td>Kimble</td><td>45500-15, 45500-30</td><td>Kimax 15 ml, tube de 30 ml</td></tr><tr><td>Tubes à microcentrifuger</td><td>Kimble</td><td>45150-2</td><td>Kimax tube de 2 ml ; doit remplacer le tube « Eppendorf » s’il est compatible avec le rotor de la centrifugeuse</td></tr><tr><td>Pipettes en polystyrène</td><td>Costar Corning</td><td></td><td>Stripettes Volumes de 5 et 10 ml</td></tr><tr><td>Deutérochloroforme</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>431915</td><td>99,96 % deutéré</td></tr><tr><td>Oxyde de deutérium</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>423459</td><td>99,96 % deutéré</td></tr><tr><td>Chlorure de deutérium</td><td>Alpha Aesar</td><td>42406</td><td>20 % dans l’oxyde de deutérium Deutéroxyde</td></tr> de <tr><td>sodium</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>164488</td><td>30 % dans l’oxyde de deutérium</td></tr><tr><td>Lyophiliseur</td><td>Christ</td><td>Alpha 1-2</td><td></td></tr><tr><td>Centrifugeuse à froid</td><td>Heraeus</td><td>Megafuge 16R</td><td></td></tr><tr><td>pH-mètre</td><td>Eutech Cybernetics</td><td>Cyberscan</td><td></td></tr><tr><td>CDTA</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D0922</td><td></td></tr><tr><td>Hydroxyde de césium</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>516988</td><td></td></tr><tr><td>tubes RMN</td><td>Wilmad</td><td>528-PP</td><td></td></tr><tr><td>Insert coaxial de tige RMN</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>Z278513</td><td>By Wilmad</td></tr><tr><td>Pipettes RMN</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>Z255688</td><td></td></tr><tr><td>Pipettes</td><td>Eppendorf</td><td>Research</td><td>Avec pointes pour des volumes de 0,5 à 1 000 &mu ; l</td></tr><tr><td>Spectromètre RMN Pipet-Aid</td><td>Drummond</td><td>XP</td><td></td></tr><tr><td></td><td>Bruker</td><td>AVANCE 400</td><td>avec sonde et autres accessoires</td></tr><tr><td>Logiciel RMN</td><td>Bruker</td><td>TopSpin 1.3</td><td>version plus récente disponible : Topspin 3.2</td></tr><tr><td>Composés étalons solubles dans l’eau</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>divers</td><td></td></tr><tr><td>composés</td> <td>étalons phospholipidiquesAvanti Polar Lipids Doosan Serdary Sigma-Aldrich</td><td>divers divers diverses</td><td>Source de plasmalogènes, mais peut être < Pureté de 70 à 80 %</td></tr><tr><td>Méthylènediphosphonate</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>M9508</td><td></td></tr><tr><td>TSP-d4</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>269913</td><td></td></tr></tbody></table>

analyse métabolomique de cerveau de rat par la résolution nucléaire haute spectroscopie par résonance magnétique d&#39;extraits de tissus

Metabolomic Analysis of Rat Brain by High Resolution Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy of Tissue Extracts

Les études de l’expression génique au niveau de l’ARN et des protéines sont utilisées depuis longtemps pour explorer les processus biologiques sous-jacents à la maladie. Plus récemment, la génomique et la protéomique ont été complétées par une analyse quantitative complète du pool de métabolites présents dans les systèmes biologiques. Cette stratégie, appelée métabolomique, vise à fournir une caractérisation globale du complément de petites molécules impliquées dans le métabolisme. Alors que le génome et le protéome définissent les tâches que les cellules peuvent accomplir, le métabolome fait partie du phénotype proprement dit. Parmi les méthodes actuellement utilisées en métabolomique, les techniques spectroscopiques présentent un intérêt particulier car elles permettent d’analyser simultanément un grand nombre de métabolites sans sélection préalable pour des voies biochimiques spécifiques, permettant ainsi une approche large et impartiale. Ici, un protocole expérimental optimisé pour l’analyse métabolomique par spectroscopie RMN à haute résolution est présenté, qui est la méthode de choix pour une quantification efficace des métabolites tissulaires. Les points forts importants de cette méthode sont (i) l’utilisation d’extraits bruts, sans qu’il soit nécessaire de purifier l’échantillon et/ou de séparer les métabolites ; (ii) la nature intrinsèquement quantitative de la RMN, qui permet de quantifier tous les métabolites représentés par un spectre RMN avec un seul composé de référence ; et (iii) la nature non destructive de la RMN permettant l’utilisation répétée du même échantillon pour plusieurs mesures. La gamme dynamique des concentrations de métabolites pouvant être couvertes est considérable en raison de la réponse linéaire des signaux RMN, bien que les métabolites présents à des concentrations extrêmement faibles puissent être difficiles à détecter. Pour les composés les moins abondants, la méthode de spectrométrie de masse très sensible peut être avantageuse, bien que cette technique nécessite des procédures de préparation et de quantification d’échantillons plus complexes que la spectroscopie RMN. Nous présentons ici un protocole RMN adapté à l’analyse du cerveau du rat ; Cependant, le même protocole peut être appliqué à d’autres tissus avec des modifications mineures.

Pour obtenir une meilleure résolution dans les spectres RMN métabolique de cerveau et d'autres extraits de tissus, il a longtemps été une pratique courante pour enlever ou ions masque de métal (le plus important: les ions paramagnétiques) présents dans des solutions d'extraction. Ceci a été réalisé soit en ajoutant un agent chélateur tel que l'EDTA ou le CDTA à l'extrait 19, ou par passage de l'extrait à travers une résine échangeuse d'ions telle que Chelex-100 20. Les résultats présentés dans <str...

La neurochimie du cerveau des mammifères est modifiée dans de nombreuses maladies neurologiques et systémiques. Des profils caractéristiques des métabolites cérébraux peuvent être obtenus efficacement à partir d’extraits bruts de tissu cérébral. À cette fin, la spectroscopie RMN à haute résolution est utilisée, permettant une analyse quantitative détaillée des concentrations de métabolites (métabolomique).

Analyse métabolomique de cerveau de rat par la Résolution nucléaire Haute spectroscopie par résonance magnétique d&#39;extraits de tissus

Studies of gene expression on the RNA and protein levels have long been used to explore biological processes underlying disease. More recently, genomics ...

L’objectif global de cette procédure est d’obtenir des profils de métabolites à haute résolution à partir d’extraits de cerveau de rat. Ceci est accompli en récoltant d’abord des cerveaux de rats et en les congelant instantanément dans de l’azote liquide. La deuxième étape consiste à extraire les métabolites cérébraux en homogénéisant les tissus dans de l’eau de méthanol et de chloroforme, puis en éliminant les protéines dénaturées et les solvants organiques.Ensuite, les échantillons aqueux sont lyophilisés et tous les échantillons sont résolés dans des solvants bien définis. Pour une analyse spectroscopique RMN optimale, l’étape finale consiste à mettre en place et à optimiser soigneusement des expériences de RMN métabolomiques. En fin de compte, les spectres RMN sont nécessaires dans des conditions expérimentales bien définies et évalués à l’aide de protocoles de traitement de données optimisés.Bien que cette méthode puisse donner un aperçu du métabolisme cérébral, elle peut également être appliquée à d’autres tissus mous tels que les tumeurs, le foie, les reins et d’autres organes. Tout d’abord, retirez un échantillon de tissu cérébral congelé préalablement préparé du congélateu

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Une méthode pour l'extraction de métabolite communautés planctoniques microbiens est présenté. Échantillonnage ensemble de la communauté est réalisée par filtration sur des filtres spécialement préparés. Après lyophilisation, aqueuse-solubles métabolites sont extraits. Cette approche permet une application de la métabolomique environnementaux trans-omique enquêtes de communautés microbiennes naturelles ou expérimentales.

Concentration des métabolites issus de communautés planctoniques à faible densité de l&#39;environnement en utilisant métabolomique résonance magnétique nucléaire

Nous décrivons un modèle de rat de trouble de stress post-traumatique (SSPT) qui révèle les altérations persistantes dans la fonction neuroendocrine et le retard à long terme, l'intervention crainte exagérée, caractéristiques des patients SSPT. Le modèle animal et les méthodes décrites ici sont utiles pour corréler des biomarqueurs dans les noyaux du cerveau, qui sont mécaniste, mais ne peut pas être mesurée chez les patients avec des biomarqueurs en globules blancs périphériques, ce qui peut.

Biomarqueurs dans un modèle animal pour Révéler Corrélats neuronaux, hématologiques et du comportement de stress post-traumatique

Une procédure est décrite colonisation progressive pour mieux évaluer son impact sur le métabolisme hépatique hôte. La colonisation est surveillé non invasive, en évaluant l'excrétion urinaire de métabolites microbiens co-par RMN basée sur le profilage métabolique tandis métabolisme hépatique est évalué par la Haute Résolution angle magique (MAS RH) RMN de profilage intacte biopsie.

Évaluer les changements métaboliques hépatiques pendant la colonisation progressive des axéniques de souris par 1 H NMR Spectroscopy

La dopamine est nettement réglementée dans les noyaux du mésencéphale, qui contiennent les corps cellulaires et les dendrites des neurones dopaminergiques. Nous décrivons ici une approche de dissection et manipulation d'échantillons de maximiser les résultats, et donc les conclusions et les points de vue, sur la réglementation de la dopamine dans les noyaux du mésencéphale de la substantia nigra (SN) et l'aire tegmentale ventrale (VTA) chez les rongeurs.

Profilage global de régulation de la dopamine dans la substance noire et aire tegmentale ventrale

Source : Blanc, J., et al. Spectroscopie par résonance magnétique fonctionnelle à 7 T dans le cortex du rat lors de l’activation des moustaches. J. Vis. Exp. (2019)Cette vidéo montre la méthode d’analyse des changements métaboliques dans le cortex du baril de rat à l’aide de la spectroscopie par résonance magnétique fonctionnelle pendant la stimulation des moustaches. Les spectres de métabolites de base sont comparés aux spectres stimulés pour détecter l’augmentation du lactate dans le cortex...

Spectroscopie par résonance magnétique fonctionnelle du cortex du rat lors de la stimulation des moustaches

La tomographie par émission de positons sur de petits animaux permet d'évaluer les deux principaux substrats énergétiques du cerveau : le glucose et les cétones. Dans la présente méthode, le 11-C-acétoacétate et le 18F-fluorodésoxyglucose sont injectés séquentiellement dans chaque animal, et leur absorption est mesurée quantitativement dans des régions spécifiques du cerveau déterminées à partir des images par résonance magnétique.

Un protocole double Tracer TEP-IRM pour la mesure quantitative de la régionale cerveau substrats énergétiques absorption chez le rat

Après avoir vérifié par sang-oxygène-dépendante du niveau fonctionnel de l’imagerie par résonance magnétique (IRMf BOLD) que la superficie correspondante de cortex champ de baril somatosensoriel (appelée S1BF) est bien activée, le principal objectif de cette étude est de quantifier la teneur en lactates fluctuations dans le cerveau de rat activés par spectroscopie de résonance magnétique de proton localisé (1H-MRS) à 7 T.

La spectroscopie par résonance magnétique fonctionnelle à 7 T dans le Cortex de baril de Rat pendant l’Activation de Whisker

Nous décrivons les procédures de traitement du tissu cérébral du rat nouveau-né afin d’obtenir des micrographies électroniques à haute résolution pour l’analyse morphométrique de la distribution des vésicules synaptiques aux terminaux nerveux. Les micrographies obtenues avec ces méthodes peuvent également être utilisées pour étudier la morphologie d’un certain nombre d’autres composants cellulaires et leurs relations structurelles dimensionnelles.

Préparation du tissu cérébral nouveau-né du rat pour l’analyse morphométrique ultrastructurale de la distribution synaptique des vésicules aux terminaux nerveux

Ce protocole décrit une méthode permettant d’obtenir des données d’imagerie par résonance magnétique fonctionnelle (IRMf- rs) stables à l’état de repos d’un rat en utilisant de l’isoflurane à faible dose en association avec de la dexmèdetomidine à faible dose.

Acquisition de données d’imagerie par résonance magnétique fonctionnelle à l’état de repos chez le rat

Cet article présente l’utilisation de PSYCHE et SAPPHIRE-PSYCHE dans le profilage métabolique des plantes et comprend des procédures détaillées pour la préparation des échantillons et l’enregistrement optimal des spectres RMN Pure Shift. Des exemples à travers lesquels le gain de résolution obtenu par le découplage homonucléaire permet une compréhension plus complète du système sont discutés.

La résonance magnétique nucléaire pure shift : un nouvel outil pour la métabolomique végétale

L’acquisition de données de tomographie par émission de positons (TEP) dynamique et la reconstruction en cadres temporels permettent d’analyser la connectivité métabolique du cerveau au niveau d’un seul sujet. Nous décrivons une méthode pour acquérir des données TEP dynamiques [18F]FDG du cerveau du rat et obtenir une matrice de connectivité par extraction de courbes temps-activité de volumes d’intérêt.

Étude de la connectivité métabolique du cerveau à l’aide de la tomographie dynamique par émission de positrons 2-désoxy-2-[18F]fluoro-D-glucose au niveau d’un seul sujet

Découvrez l'analyse métabolomique du cerveau de rat par spectroscopie RMN haute résolution. Cette méthode permet d'obtenir des profils métaboliques détaillés pour étudier les changements neurochimiques liés aux maladies neurologiques.

Analyse métabolomique de cerveau de rat par la Résolution nucléaire Haute spectroscopie par résonance magnétique dextraits de tissus (Vidéo) | JoVE Journal

Analyse métabolomique de cerveau de rat par la Résolution nucléaire Haute spectroscopie par résonance magnétique d'extraits de tissus

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