Évaluation des murin exercice d'endurance sans l'utilisation d'une grille de choc: une alternative à l'exercice forcé

L’objectif général de cette procédure est de déterminer l’endurance à l’exercice volontaire. Chez les souris de laboratoire, cela se fait en laissant d’abord la souris s’acclimater à la salle d’intervention dans sa cage domestique pendant une à deux heures. La souris est ensuite laissée s’acclimater au tapis roulant et au bruit du moteur.

Ensuite, la vitesse du tapis roulant est progressivement augmentée jusqu’à ce que la souris fonctionne confortablement à sa vitesse maximale soutenue. La dernière étape consiste à déterminer quand la souris a atteint l’épuisement. En fin de compte, le temps que la souris a passé jusqu’à l’épuisement révèle une mesure de l’endurance à l’exercice sans les effets confondants du stress dû à l’utilisation d’une grille de choc.

Le principal avantage de cette technique est qu’il s’agit d’un raffinement des méthodes existantes pour déterminer l’endurance à l’exercice et les souris, principalement parce qu’elle n’utilise pas de grille de tir pour encourager les souris à courir, réduisant ainsi les effets confondants du stress, tant pour l’animal que pour l’expérience. Décidez à l’avance des groupes expérimentaux et des procédures post-exercice pour les souris. Placez le tapis roulant sur un chariot ou une table solide dans une pièce calme dédiée à cette procédure.

Pendant les essais de course, réglez le tapis roulant pour les couloirs de la taille d’une souris et à une inclinaison appropriée au protocole. L’inclinaison de cinq degrés est utilisée ici pour éviter les dommages musculaires dus à l’exercice excentrique qui se produit lors de la course en descente. Placez un tampon absorbant sous la cloche du tapis roulant pour récupérer les excréments.

Laissez la souris s’acclimater à la salle d’intervention dans sa cage domestique transportée avec ses compagnons de cage pendant une à deux heures. Sélectionnez une seule souris et enregistrez son numéro de balise. Pesez également la souris et notez son poids.

Placez la souris dans le tapis roulant sans que le moteur ne soit allumé pour s’acclimater pendant environ cinq minutes. Allumez l’appareil sans que la courroie du tapis roulant ne fonctionne et laissez la souris s’acclimater au bruit de la machine pendant encore cinq minutes. Retirez les souris des groupes sédentaires du tapis roulant à ce stade et retournez-les dans leur cage ou effectuez des procédures post-exercice selon la conception expérimentale.

Après l’acclimatation, tournez la courroie à basse vitesse. Lorsque l’animal explore la ceinture et non sur la plate-forme, tapotez ou soulevez doucement l’arrière-train de la souris avec un abaisse-langue une à trois fois pour encourager les animaux réticents à rester sur le tapis roulant et à courir. Une fois que la souris tourne à la vitesse initiale de 10 mètres par minute, augmentez lentement la vitesse.

Lorsque la souris est en haut de la ceinture par incréments d’un mètre par minute environ toutes les deux minutes, réduisez la vitesse au réglage précédent. Si la souris court à plusieurs reprises en courtes rafales et non à un rythme régulier, la plupart des souris courront facilement, mais elles s’arrêtent parfois pendant de courtes périodes. Utilisez l’abaisse-langue pour tapoter ou soulever doucement l’arrière de l’animal afin de favoriser la reprise de la course.

Souvent, le simple fait de remarquer la main avec l’abaisse-langue qui vient vers elles fait courir les souris un peu plus. N’arrêtez pas la minuterie pour des interruptions temporaires en cours d’exécution. Déterminez la vitesse de course maximale soutenue de chaque souris en ajustant la vitesse et en regardant la souris enregistrer cette vitesse.

Certaines souris refuseront complètement de courir. Ces souris courront en courtes rafales. Ensuite, arrêtez-vous pour vous toiletter ou pédaler, c’est-à-dire vous asseoir sur la plate-forme et utilisez leurs pattes avant sur la ceinture.

La posture classique d’une souris refusante est courbée avec les quatre pattes plantées sous l’animal pour éviter d’être repoussée sur le tapis roulant par l’abaisse-langue. Parfois, une souris devient agressive envers l’abaisse-langue lorsqu’elle ne veut pas courir, mordant la langue, l’abaisseur ou grimpant dessus pour s’échapper. Dans les cinq premières minutes de l’essai, il est clair si la souris va fonctionner ou non.

Retirez et identifiez les souris qui refusent de fuir l’analyse, mais ne les comptez pas comme des souris sédentaires. Selon votre conception expérimentale, les souris qui rejettent peuvent être testées à nouveau un autre jour. L’épuisement se caractérise par trois arrêts successifs et le refus de reprendre la course malgré de doux encouragements.

Ainsi que des signes physiques d’épuisement tels qu’une respiration laborieuse et une posture évasée. Identifiez les souris épuisées et arrêtez le chronomètre. Enregistrez le temps total passé à courir à toutes les vitesses.

Selon la conception de l’expérience, retournez la souris dans sa cage ou effectuez immédiatement des procédures post-exercice telles que la collecte de sang ou de tissus. Conformément aux directives de l’établissement, essuyez la ceinture avec une lingette germicide après avoir testé chaque souris individuelle afin que l’odeur de la souris précédente n’influence pas le comportement des souris testées suivantes. Utilisez un abaisse-langue frais pour chaque souris.

Les souris qui résident dans la même cage peuvent être testées séquentiellement le même jour sans acclimatation supplémentaire à la salle d’intervention. L’endurance à l’exercice reflète avec précision le profil moléculaire et métabolique de différentes souches de souris noires C 57 six qui diffèrent par l’expression de la cytokine dérivée des muscles IL 15 Les souris transgéniques qui surexpriment IL 15 présentent des temps de course jusqu’à épuisement significativement accrus par rapport aux témoins ATE, tandis que les souris qui n’ont pas d’IL 15 présentent des temps de course significativement réduits avant d’atteindre les contrôles de type sauvage d’épuisement. Voir 57 noir six souris de deux sources différentes ne présentent pas de durées d’exécution significativement différentes.

La vitesse de course maximale soutenue ne différait que chez les souris knock-out IL 15. Une limitation inévitable de cette technique est que certaines souris refusent de courir volontairement. Le pourcentage de jeunes souris témoins de type sauvage qui refusent de courir est d’environ 10 %À l’âge de quatre mois, le pourcentage de refus passe à 20 %À l’âge de huit mois et augmente à plus de 60 % à l’âge de 16 mois.

Cependant, le pourcentage de refus dans le groupe d’âge plus avancé est significativement plus faible chez les souris transgéniques IL 15. Lors de cette procédure, il est important de se rappeler de rester calme et détendu et de faire attention au comportement de la souris. Après avoir regardé cette vidéo, vous devriez avoir une bonne compréhension de la façon d’utiliser un tapis roulant pour déterminer l’endurance à l’exercice et les souris sans utiliser e chakra.