Name: Infusions de lartère carotide pour pharmacocinétiques et pharmacodynamiques Analyse des taxanes chez la souris (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-10-27T14:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 41 s
Description: Apprenez à réaliser des infusions par artère carotide chez la souris pour analyser la pharmacocinétique des taxanes. Cette méthode utilise un cathéter sur mesure et une pompe automatisée pour une administration contrôlée.

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Nous tenons à remercier le Fonds FCCC des animaux de laboratoire pour leur soutien dans ce projet. Nous remercions Wolfe Laboratories, Inc. pour leur aide dans l&#39;analyse des niveaux de paclitaxel dans le plasma et les tissus. Ce travail a été soutenu par les Instituts nationaux de la santé accorde K01CA120091 à EHB et CA06927 à Fox Chase Cancer Center.

<ol><li>Gallo, J. M., Li, S., Guo, P., Ma Reed, K., J, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Effect+of+P-Glycoprotein+on+Paclitaxel+Brain+and+Brain+Tumor+Distribution+in+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">The Effect of P-Glycoprotein on Paclitaxel Brain and Brain Tumor Distribution in Mice.</a> Cancer Research. 63 (16), 5114-5117 (2003).</li>
<li>Sonnichen, D. S., Relling, M. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+Pharmacokinetics+of+Paclitaxel%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Pharmacokinetics%22%5BJournal%5D)">Clinical Pharmacokinetics of Paclitaxel.</a> Clinical Pharmacokinetics. 27 (4), 256-269 (1994).</li>
<li>Gianni, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nonlinear+Pharmacokinetics+and+Metabolism+of+Paclitaxel+and+Its+Pharmacokinetic+%2F+Pharmacodynamic+Relationship+in+Humans%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+Clinical+Oncology%22%5BJournal%5D)">Nonlinear Pharmacokinetics and Metabolism of Paclitaxel and Its Pharmacokinetic / Pharmacodynamic Relationship in Humans.</a> Journal Clinical Oncology. 13 (1), 180-190 (1995).</li>
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<li>Sparreboom, A., Van Tellingen, O., Nooijen, W. J., Beijnen, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Determination+of+paclitaxel+and+metabolites+in+mouse+plasma%2C+tissues%2C+urine+and+faeces+by+semi-automated+reversed-phase+high-performance+liquid+chromatography%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Chromatography+B%3A+Biomedical+Sciences+and+Applications%22%5BJournal%5D)">Determination of paclitaxel and metabolites in mouse plasma, tissues, urine and faeces by semi-automated reversed-phase high-performance liquid chromatography.</a> Journal of Chromatography B: Biomedical Sciences and Applications. 664, 383-391 (1995).</li>
<li>Bradshaw-Peirce, E. L., Eckhardt, S. G., Gustafson, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Physiologically+Based+Pharmacokinetic+Model+of+Docetaxel+Disposition%3A+from+Mouse+to+Man%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">A Physiologically Based Pharmacokinetic Model of Docetaxel Disposition: from Mouse to Man.</a> Clinical Cancer Research. 13, 2768-2778 (2007).</li>
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<li>Schinkel, A. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Normal+Viability+and+Altered+Pharmacokinetics+in+Mice+Lacking+mdr1-type+%28drug-transporting%29+P-glycoproteins%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Nat.+Acad.+Sci.+USA%22%5BJournal%5D)">Normal Viability and Altered Pharmacokinetics in Mice Lacking mdr1-type (drug-transporting) P-glycoproteins.</a> Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 94, 4028-4033 (1997).</li>
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<li>Bateman, K. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reduction+of+Animal+Usage+by+Serial+Bleeding+of+Mice+for+Pharmacokinetic+Studies%3A+Application+of+Robotic+Sample+Preparation+and+Fast+Liquid+Chromatography+%E2%80%93+Mass+Spectrometry%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Chromatography+B%3A+Biomedical+Sciences+and+Applications%22%5BJournal%5D)">Reduction of Animal Usage by Serial Bleeding of Mice for Pharmacokinetic Studies: Application of Robotic Sample Preparation and Fast Liquid Chromatography – Mass Spectrometry.</a> Journal of Chromatography B: Biomedical Sciences and Applications. 754 (1), 245-251 (2001).</li>
<li>Berndt, K., Vogel, J., Buehler, C., Vogt, P., Born, W., Fuchs, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+method+for+repeated+drug+infusion+into+the+femoral+artery+of+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Assoc.+Lab+Animal+Sci%22%5BJournal%5D)">A new method for repeated drug infusion into the femoral artery of mice.</a> J. Am. Assoc. Lab Animal Sci. 51 (6), 825-831 (2012).</li>
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<li><a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Abraxis+BioScience+L.L.C%5BTitle%5D)+AND+%22Full+Prescribing+Information+ABRAXANE+for+Injectable+suspension+%28paclitaxel+protein-bound+particles+for+injectable+suspension%29+%28albumin-bound%29%22%5BJournal%5D)">Abraxis BioScience L.L.C.</a> Full Prescribing Information ABRAXANE for Injectable suspension (paclitaxel protein-bound particles for injectable suspension) (albumin-bound). , Celgene Corporation. (2013).</li>
<li>Fergusson, G., Ethier, M., Zarrouki, B., Fontés, G., Poitout, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Model+of+Chronic+Nutrient+Infusion+in+the+Rat%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">A Model of Chronic Nutrient Infusion in the Rat.</a> J. Vis. Exp. (78), (2013).</li>
</ol>

Les auteurs ont rien à divulguer.

Perfusion de l&#39;artère carotide est une technique importante dans cette étude de pharmacocinétique du paclitaxel. Perfusion de l&#39;artère carotide est une méthode pour distribuer rapidement drogue dans tout le système circulatoire 14. La perfusion de 3 heures est un synoptique plus proche de l&#39;administration clinique des médicaments tels que les taxanes que les injections de bolus. La chirurgie peut être réalisée de manière fiable par une seule personne, le temps de chirurgie est relativement courte,...

perfusion de médicament à travers la carotide peut être effectuée de manière fiable et reproductible en optimisant l&#39;équipement et la technique. La procédure est complexe pas, même si elle ne nécessite un contrôle précis et une attention aux détails. Soins de qualité supérieure et la dextérité sont nécessaires pour isoler l&#39;artère carotide et insérer le cathéter, qui peuvent généralement être acquis par la pratique. Chirurgie par un technicien expérimenté ne doit pas dépasser une heure. Après une chirurgie réussie, la souris doit être normal et en bonne santé (bien que la souris peut réagir à la perfusion réelle de la drogue), et la drogue (s) peut être administré dans un dosage continu uniforme contrôlée. Les échantillons de sang doivent être prélevés sur un site autre que l&#39;artère carotide; saignements rétro-orbitaire été facile de recueillir et satisfaisante pour l&#39;analyse des concentrations de médicament. Cathéters de taille optimale et la forme sont un atout précieux dans la réalisation d&#39;une perfusion de succès 11. Nous avons trouvé la cathéters disponible commercially souvent d&#39;être trop grande et / ou trop souple pour permettre un accès facile à l&#39;artère carotide de souris. Il est avéré préférable de cathéters de mode du tube de polyéthylène utilisé pour connecter la souris à la seringue de perfusion. Ainsi, tous les tubes, raccords et les aiguilles étaient de dimensions cohérentes, qui a simplifié ensemble d&#39;infusion. En utilisant cette technique, il est nécessaire de pousser la pointe du cathéter dans l&#39;artère au-delà du point où il est encore visible, et le flux sanguin dans l&#39;artère carotide est pas restauré avant que le cathéter est initialement fixé. Cela réduit les risques de perforation de l&#39;artère ou d&#39;avoir le cathéter poussé par la haute pression du flux sanguin. La conception de cathéter document ne comporte pas de &quot;bosse&quot; pour le maintenir en place, en assurant ainsi le cathéter bien avec des sutures et ruban chirurgical est une priorité. Infusions peuvent être préférables aux injections en bolus iv communs, comme un meilleur imitateur de l&#39;administration clinique deles médicaments tels que les taxanes 3, 12, 13. La technique décrite ici a été initialement mis au point pour permettre une perfusion dans des modèles de souris, dans lequel l&#39;accès à la veine jugulaire ou fémorale a été empêchée par la croissance de la tumeur mammaire et / ou la vascularisation excessive de la zone d&#39;insertion. Cette méthode peut souvent être appropriée, même chez les souris sans tumeur: bien isoler et cathétérisme de la carotide est légèrement plus invasive, nous avons trouvé qu&#39;il est préférable de la jugulaire, car la propension de la paroi jugulaire de ripper abouti à des insertions et des échecs pour mener à bien plus défaillants l&#39;évolution dans le temps de trois heures. Bien que les résultats présentés ici sont de C57BL / 6J (dans maison de race-) souris, nous avons utilisé cette technique pour insuffler avec succès paclitaxel dans plusieurs souches de souris, y compris FVB et mixtes souches, de suivre la pharmacocinétique chez des modèles de souris transgénique manipulés à réguler à la baisse fonctions transporteurs cellulaires. Les échantillons de sang et de tissus prélevés ont montré des niveaux attendus de paclitaxel, dans la gamme des niveaux observés après une perfusion jugulaire 1. Cette technique peut être appelé à travailler aussi bien dans d&#39;autres modèles de souris et avec d&#39;autres solutions pour perfusion.

<table><tbody><tr><td>Tube en polyéthylène 0,024" Diamètre extérieur X 0,011 po ID&nbsp ;</td><td>Braintree Scientific, Inc.</td><td>PE10</td><td></td></tr><tr><td>3 Aiguilles émoussées (calibre 30)</td><td>Braintree Scientific, Inc.</td><td>NB-30</td><td></td></tr><tr><td>Connecteur de port en acier inoxydable (calibre 28)</td><td>Braintree Scientific, Inc.</td><td>PP-28</td><td>Légèrement plus grand que le diamètre intérieur des tubes en PE, pour s’adapter parfaitement et garder une étanchéité parfaite.</td></tr><tr><td>2 fiches de connexion en acier inoxydable (calibre 30)</td><td>Braintree Scientific, Inc.</td><td>C-30</td><td></td></tr><tr><td>Trois seringues de 1 cc</td><td>Becton, Dickinson and Co.</td><td></td><td></td>309659</tr><tr><td>Solution saline stérile à 0,9 %</td><td>Hospira</td><td>0409-7984-37</td><td></td></tr><tr><td>Cath-Loc HGS Solution d’héparine/glycérol</td><td>Braintree Scientific, Inc.</td>Suture <td>en soie HGS</td><td></td></tr><tr><td></td><td>Braintree Scientific, Inc.</td><td>SUT-S&nbsp ; 113</td><td></td></tr><tr><td>Ciseaux Vanna (micro-ciseaux)</td><td>World Precision Instruments</td><td>14122</td><td>Ce modèle a une pointe incurvée, mais les ciseaux à pointe droite fonctionnent également.</td></tr><tr><td>Hartman Mesquito Pince hémostatique</td><td>World Precision Instruments</td><td>501705</td><td></td></tr><tr><td>Betadine Swabsticks</td><td>Perdue Products L.P.</td><td>BSWS1S</td><td></td></tr><tr><td>Bupivacaïne</td><td>Hospira</td><td>0409-1160-01</td><td>Peut être remplacé par de la lidocaïne ou une anesthésie locale similaire.</td></tr><tr><td>Paclitaxel</td><td>LC Laboratories</td><td>P-9600</td><td></td></tr><tr><td>Méthanol</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>32213</td><td></td></tr><tr><td>Micro-Hématocrite Tubes Capillaires, Hépariné</td><td>Fisher Scientific</td><td>22-362-566</td><td></td></tr><tr><td>Micro Tube Capillaire Sealant&nbsp ;</td><td>Fisher Scientific</td><td>02-678</td><td></td></tr><tr><td>C57BL/6J souris</td><td>Fox Chase Cancer Center, Laboratoire Animal Facility spetromètre de masse API</td> 4000 Q-Trap élevé en interne <td></td><td></td></tr><tr><td></td><td>Applied Biosystems</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

infusions de l&#39;artère carotide pour pharmacocinétiques et pharmacodynamiques analyse des taxanes chez la souris

Carotid Artery Infusions for Pharmacokinetic and Pharmacodynamic Analysis of Taxanes in Mice

Au moment de proposer l&#39;utilisation d&#39;un médicament, la combinaison de médicaments, ou l&#39;administration de médicaments dans un nouveau système, il faut évaluer la pharmacocinétique du médicament dans le modèle d&#39;étude. Parce que l&#39;utilisation de modèles de souris sont souvent une étape essentielle dans la découverte de médicaments préclinique et le développement de médicaments 1-8, il est nécessaire de concevoir un système pour introduire des médicaments dans des souris dans une manière uniforme, reproductible. Idéalement, le système devrait permettre la collecte des échantillons de sang à intervalles réguliers au cours d&#39;une évolution dans le temps de consigne. La capacité de mesurer les concentrations de médicament par spectrométrie de masse, a permis aux enquêteurs de suivre les changements dans les niveaux plasmatiques du médicament au fil du temps chez les souris individu 1, 9, 10. Dans cette étude, le paclitaxel a été introduit dans des souris transgéniques comme une perfusion artérielle continue sur trois heures, tandis que les échantillons de sang ont été prélevés en même temps par des saignements rétro-orbital à des instants de consigne. Infusions de l&#39;artère carotide sont une alternative potentielle aux perfusions de veine jugulaire, lorsque des facteurs tels quetumeurs mammaires et d&#39;autres obstacles infusions jugulaires impraticable. En utilisant cette technique, les concentrations de paclitaxel dans le plasma et les tissus ont atteint des niveaux similaires à celles obtenues à perfusion jugulaire. Dans ce tutoriel, nous allons démontrer comment son cathéter avec succès l&#39;artère carotide par la préparation d&#39;un cathéter optimisé pour chaque modèle de la souris, puis montrer comment insérer et fixer le cathéter dans l&#39;artère carotide de souris, passer la fin du cathéter à travers l&#39;arrière du cou de la souris, et brancher la souris à une pompe pour fournir une vitesse contrôlée de médicament afflux. Saignements rétro-orbital à faible volume multiples permettent l&#39;analyse des concentrations plasmatiques du médicament au fil du temps.

Répartition de paclitaxel suit modèles prévisibles pendant 3 heures un schéma posologique d'une injection à grande vitesse 15 min, suivie d'une perfusion à faible vitesse de 165 min. La figure 1 montre une comparaison de la veine-perfusion de paclitaxel concentrations de plasma jugulaire et l'artère carotide-infusions. Les concentrations de paclitaxel tombent rapidement dans les 15 premières minutes après une perfusion de grand volume initial, puis se stabilisent au cours de...

Cette méthode a été développée dans le but de fournir une solution stable de médicament via l&#39;artère carotide, pour évaluer la pharmacocinétique de nouveaux médicaments dans des modèles murins.

Infusions de l&#39;artère carotide pour pharmacocinétiques et pharmacodynamiques Analyse des taxanes chez la souris

When proposing the use of a drug, drug combination, or drug delivery into a novel system, one must assess the pharmacokinetics of the drug in the study ...

L’objectif global de cette procédure est d’injecter un médicament d’intérêt à travers l’artère carotide afin d’analyser le profil pharmacocinétique du médicament. Ceci est accompli en fabriquant d’abord un cathéter personnalisé à partir d’un tube en polyéthylène, puis en fixant le cathéter dans l’artère carotide de la souris. Ensuite, la souris est attachée à une pompe à perfusion automatisée via le cathéter de l’artère carotide.Dans la dernière étape, le médicament est injecté dans la souris à un rythme régulier et des échantillons de sang sont prélevés à intervalles réguliers. En fin de compte, la chromatographie liquide, la spectrométrie de masse est utilisée pour déterminer la concentration du médicament dans les échantillons de tissu et de plasma. Le principal avantage de cette technique par rapport aux méthodes existantes telles que le bolus, l’injection intrapéritonéale ou l’injection dans la veine caudale ou la perfusion jugulaire, est qu’elle est représentative des débits de perfusion cliniques, et qu’elle est généralement plus facile à réaliser que l’insertion jugulaire.Cette méthode peut répondre à des questions clés en pharmacologie, telles que la distribution in vivo d

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Apprenez à réaliser des infusions par artère carotide chez la souris pour analyser la pharmacocinétique des taxanes. Cette méthode utilise un cathéter sur mesure et une pompe automatisée pour une administration contrôlée.

Infusions de l'artère carotide pour pharmacocinétiques et pharmacodynamiques Analyse des taxanes chez la souris

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