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DOI: 10.3791/51958-v
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Les enregistrements de paires sont des enregistrements simultanés de cellules entières à partir de deux neurones synaptiquement connectés, permettant une caractérisation électrophysiologique et pharmacologique précise des synapses entre les neurones individuels. Nous décrivons ici la méthodologie détaillée et les exigences pour établir cette technique dans les cultures de coupes organotypiques d’hippocampe dans tout laboratoire équipé pour l’électrophysiologie.
L’objectif global de l’expérience suivante est de pouvoir enregistrer l’électrophysiologie à partir du circuit synaptique minimal dans le cerveau. Ceci est réalisé dans des enregistrements réalisés à partir de cultures en tranches organotypiques de l’hippocampe de rat cultivées dans des inserts de culture en plastique. Ces tranches établissent des connexions synaptiques élaborées mais appropriées qui peuvent être facilement enregistrées après une période de croissance en culture.
Faire des enregistrements dans ces coupes permet d’isoler l’activité synaptique du circuit synaptique minimal qui s’est formé entre seulement deux neurones, et permet ainsi d’étudier les propriétés les plus fondamentales des circuits neuronaux. Cette méthode peut être utilisée pour sonder la fonction des microcircuits synaptiques dans l’hippocampe, mais elle peut être utilisée pour n’importe quelle zone du cerveau où les neurones voisins sont connectés synaptiquement. La démonstration visuelle des méthodes d’enregistrement et de dissection est cruciale car de nombreuses étapes dépendent de l’identification précise des points de repère cérébraux et des neurones, à la fois avant de faire des tranches, préparer toutes les solutions et les plaques de culture.
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