Name: Dissection des ovaires chez la drosophile (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2006-10-19T00:00:00.000+00:00
Duration: 4 min 55 s
Description: Apprenez la dissection des ovaires chez la drosophile pour étudier la biologie du développement et la gamétogenèse. Cette technique permet aux chercheurs d'analyser la morphologie ovarienne in vivo.

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Protocole pour la dissection des ovaires chez la drosophile <ol><li> Flux mouches avec de la levure 1-2 jours avant de les disséquer pour engraisser les ovaires. </li><li> Anesthésier mouches en utilisant flux de dioxyde de carbone. </li><li> En utilisant une paire de pinces, sélectionnez une mouche femelle. </li><li> Plonger la mouche femelle en PBS 1X. </li><li> Prenez la volée à sa partie inférieure du thorax avec une paire de pincettes. </li><li> Tirez légèrement le bas de l&#39;abdomen avec une autre paire de pincettes jusqu&#39;à ce les organes internes de l&#39;abdomen sont exposés. </li><li> Cherchez la paire d&#39;ovaires et de le détacher des autres organes (par exemple les intestins). </li><li> Démêler les ovarioles (si les ovaires sont à utiliser pour immunomarquage ou par hybridation in situ). </li><li> Gardez ovaires glacée PBS 1X tout disséquer la volée suivante. </li></ol>

<ol><li>Costa, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Drosophila+fragile+X+protein+functions+as+a+negative+regulator+in+the+orb+autoregulatory+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Cell%22%5BJournal%5D)">The Drosophila fragile X protein functions as a negative regulator in the orb autoregulatory pathway.</a> Dev Cell. 8, 331-342 (2005).</li>
<li>Tan, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+autoregulatory+feedback+loop+directs+the+localized+expression+of+the+Drosophila+CPEB+protein+Orb+in+the+developing+oocyte%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">An autoregulatory feedback loop directs the localized expression of the Drosophila CPEB protein Orb in the developing oocyte.</a> Development. 128, 1159-1169 (2001).</li>
</ol>

Ici nous démontrons une méthode de dissection des ovaires chez la drosophile. Comme la méthode de culture des différents types de cellules qui existent dans l&#39;ovaire de drosophile n&#39;a pas encore été définie, il est une méthode rapide pour obtenir le tissu ovarien chez la drosophile. Essentiellement, nous montrons que la dissection des ovaires chez la drosophile implique un simple de deux ou trois étapes de procédure. Le traitement ultérieur de ces ovaires disséqués dépendent de l&#39;aval des expériences qui seront effectuées.

<table><tbody><tr><td>Pinces</td><td>Outil</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T43537</td><td></td></tr><tr><td>Plat de dissection en verre</td><td>Outil</td><td>Pyrex</td><td>7220-85</td><td></td></tr></tbody></table>

dissection des ovaires chez la drosophile

Dissection of Drosophila Ovaries

Dissection des ovaires chez la drosophile

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Cette vidéo décrit l’anatomie générale de l’ovaire de la drosophile et présente une méthode de dissection des ovaires pour l’imagerie en direct ou fixe.

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La méthode d’imagerie verticale décrite dans ce protocole permet de visualiser en détail les pôles d’un œuf de Drosophila melanogaster en développement.  Cette vue d’ensemble offre une nouvelle perspective sur les arrangements et les morphologies de plusieurs types de cellules dans l’épithélium folliculaire.

Imagerie Montant du<em&gt; Drosophila</em&gt; Chambres d&#39;oeufs

L’analyse de la relation structure-fonction mitochondriale est nécessaire pour une compréhension approfondie des mécanismes de régulation de la fonctionnalité mitochondriale. Des méthodes spécifiques pour étudier la structure et la fonction mitochondriales dans les ovaires de drosophile vivants et fixes sont décrites et démontrées dans cet article.

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Nous décrivons un protocole pour la dissection, la fixation et immunomarquage des organes stéroïdogenèse chez les larves de drosophile et les femelles adultes pour étudier la biosynthèse des hormones stéroïdes et son mécanisme de régulation. En plus des organes stéroïdogenèse, nous visualisons l'innervation des organes stéroïdogenèse ainsi que les cellules cibles stéroïdogenèse telles que les cellules souches germinales.

Protocoles pour Visualizing stéroïdogénique organes et leurs organes interactifs avec Immunostaining dans le Fruit Fly<em&gt; Drosophila melanogaster</em

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La membrane basale est essentielle à la morphogenèse des tissus et des organes pendant le développement. Pour mieux comprendre les mécanismes conduisant à un placement correct de cette structure, le protocole présenté décrit des méthodes pour visualiser et caractériser le trafic intracellulaire et la sécrétion de protéines de la membrane basale dans les cellules épithéliales en utilisant la microscopie confocale et super-résolution.

Imagerie confocale et super-résolution du trafic intracellulaire polarisé et de la sécrétion de protéines de la membrane basale au cours de l’oogenèse de la drosophile

Ici, nous fournissons un protocole détaillé pour effectuer une imagerie en direct de la division asymétrique des cellules souches germinales (GSC) dans la niche ovarienne de la drosophile. Nous utilisons une lignée transgénique qui exprime de manière ubiquitaire une fusion de la protéine fluorescente verte (GFP) de la protéine du spectrosome Par-1.

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Apprenez la dissection des ovaires chez la drosophile pour étudier la biologie du développement et la gamétogenèse. Cette technique permet aux chercheurs d'analyser la morphologie ovarienne in vivo.

Dissection des ovaires chez la drosophile

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