Name: Application de nanoparticules fluorescentes pour étudier Rénovation du système Endo-lysosomale par des bactéries intracellulaires (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-01-02T14:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 38 s
Description: Découvrez comment étudier le remodelage du système endo-lysosomal par Salmonella enterica en utilisant des nanoparticules fluorescentes et l'imagerie confocale. Cette méthode permet de quantifier la distribution intracellulaire.

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Ce travail a été soutenu par la Deutsche Forschungsgemeinschaft par la subvention Z dans le cadre du Sonderforschungsbereich 944 'Physiologie et dynamique des microcompartiments cellulaires' et HE1964/18 dans le cadre du programme prioritaire 1580.

1. Synthèse de 10 nm nanoparticules d'or (Gold IP) 15 <ol><li> Préparer la solution A: ajouter 2 ml aqueuse à 1% de chlorure d'or dans 160 ml Milli-Q, ou double distillée, eau. </li><li> Préparer la solution B: ajouter 8 ml 1% de tri-citrate de sodium x 2 H 2 O et l'acide tannique 160 pi de 1% dans 32 ml Milli-Q, ou double distillée, eau. </li><li> Réchauffer la solution A et B à 60 ° C et les mélanger en remuant. Observez immédiatement une couleur bleu foncé. Observez la couleur rouge après environ 15 min. Ensuite, la chaleur jusqu'à 95 ° C, 5 min et maintenir la solution refroidir à température ambiante. </li><li> Ajouter une goutte de la suspension sur une grille NP revêtu de carbone et laisser sécher à l'air. Vérifier la taille et la morphologie des IP par microscopie électronique à transmission. </li></ol> 2. couche d'or IP avec de la BSA et d'étiquetage avec la rhodamine N-hydroxysuccinimidyle Ester (NHS) 16 <ol><li> Ajouter 900 pi IP or dans un tube Eppendorf de 1,5 ml, centrifuger à 15 000 g pendant 30 min. Opnellement, préparer tubes multiples peuvent à la fois. </li><li> Jeter le surnageant, remettre en suspension le culot dans 900 pi d'eau stérilisée Milli-Q et ajouter 100 pi 2 mg / ml de BSA / PBS, mélanger au vortex à 800 tours par minute pendant 30 min. </li><li> Pour enlever l'excès de BSA, centrifuger la préparation à 15 000 g pendant 60 min. </li><li> Jeter le surnageant et remettre en suspension les IP or BSA dans 125 pi de PBS, ajouter 12,5 pi de 1 M bicarbonate. </li><li> Immédiatement avant utilisation, préparer une solution à 10 mg / ml de rhodamine NHS / DMSO, ajouter 30 ul de solution rhodamine / DMSO NHS à 1 ml de la suspension or BSA IP. Incuber le mélange réactionnel pendant 2 heures (ou O / N) à la température ambiante pendant 800 tours par minute de mélange, en évitant l'exposition à la lumière. </li><li> Purifier les IP d'or-BSA-rhodamine par dialyse contre PBS à 4 ° C avec 5 changements de tampon sur la période de 36 à 48 h. </li><li> Pour stabiliser les IP, ajouter 10 ul de 200 mg / ml de BSA / PBS dans chacun 1 ml IP or BSA-rhodamine. Pour supprimer la centrifugeuse libre ou libéré BSA-rhodamine, à 15,000 xg pendant 60 min. Reprendre le culot dans 2 mg / ml de BSA / PBS, mesurer 520 OD, et conserver à 4 ° C, évitant l'exposition à la lumière. </li><li> Diluer les IP 10 fois avec Milli-Q ou de l'eau doublement distillée, ajouter une goutte sur une grille recouverte de carbone, et laisser sécher à l'air. Vérifier la taille et la morphologie des IP par microscopie électronique à transmission (MET). NOTE: Tous les matériaux utilisés pour la préparation NP ont été stérilisés et l'opération a été réalisée dans une hotte de culture cellulaire ou sur un banc à côté d'une flamme. </li></ol> 3. Culture de cellules HeLa <ol><li> Des cellules HeLa exprimant de façon permanente LAMP1-GFP sont cultivées dans du DMEM avec 10% de sérum de veau foetal (FCS) et cultivées à 37 ° C dans une atmosphère contenant 5% de CO 2. </li><li> Ensemencer les cellules à une densité de 50 000 par puits dans une chambre diapositive 8 de puits (Ibidi) et incuber O / N. </li></ol> 4. culture de bactéries <ol><li> Utilisez Salmonella enterica sérotype Typhimurium NCTC 12023 wilD-Type (WT) souche. A titre de comparaison, utiliser des souches mutantes Δ ssaV défectueux dans le SPI2-SST3 et Δ SIFA manquant effecteur clé SIFA pour SIF. Utilisez les souches portant le plasmide pFPV25.1 pour l'expression constitutive de la GFP améliorée. REMARQUE: Les souches bactériennes sont cultivées en routine dans du bouillon de Luria-Bertani (LB) avec addition de 50 ug / ml de carbénicilline (WT) et LB avec addition de 50 ug / ml de carbénicilline et / ou 50 pg / ml de kanamycine (ssa V Δ, Δ SIFA ) nécessaire au maintien de plasmides. </li><li> Inoculer une seule colonie de bactéries dans 3 ml de LB avec les antibiotiques appropriés et grandir O / N à 37 ° C dans des conditions secousse pour l'aération, puis diluer 01h31 dans LB frais et continuer la croissance pendant 3,5 heures. A ce moment-là, les cultures atteignent la phase logarithmique tardive et les bactéries sont très envahissantes. A 'rouleau tambour »est pratique pour incuber des cultures de tube à essai avec l'aération. </li></ol> 5. L'infection des cellules HeLa parSalmonella et Gold-BSA-rhodamine IP Pulse Chase-étiquetage (voir la figure 1 pour le régime) <ol><li> Mesurer la DO 600 de la bactérie de la sous-culture et diluer à DO600 = 0,2 dans 1 ml de PBS (~ 3 x 10 8 ufc / ml), ajouter des quantités appropriées de bactéries à des cellules HeLa dans des lames à chambres 8 puits pour parvenir à une multiplicité de infection (MOI) de 100. </li><li> Incuber pendant 30 min dans l'incubateur de cellules, laver 3 fois avec du PBS pour éliminer les bactéries non-internalisés (ce point de temps a été défini comme post-infection 0 h, ou 0 h pi). Ajouter 300 ul de milieu de culture frais contenant 100 ug / ml de gentamicine et maintenir pendant 1 heure. Remplacer ensuite le milieu par du milieu frais contenant 10 ug / ml de gentamicine pendant le reste du temps d'incubation. </li><li> Après incubation avec le milieu de culture contenant 100 ug / ml de gentamicine pendant 1 h, le milieu est remplacé par imagerie milieu (Eagles MEM sans FCS, de L-glutamine, le phénol rouge et bicarbonate de sodium, avec 30 mM de HEPES, pH 7,4) containing 10 ug / ml de gentamicine. NP or-rhodamine-BSA sont ajoutés à des cellules HeLa pour obtenir une concentration finale de OD 520 = 0,1. REMARQUE: NP-BSA-or rhodamine peut également être ajouté aux cellules avant l'infection, ou à divers points de temps pi </li><li> Après 1 h d'incubation, éliminer le milieu, laver trois fois avec du PBS, et ajouter 300 ul de milieu de formation d'image fraîche contenant 10% de FCS et 10 ug / ml de gentamicine pendant le reste du temps d'incubation. NOTE: Durée d'incubation peut varier en fonction de la concentration des IP et des lignées cellulaires utilisées. Pour les macrophages RAW264.7, nous avons observé que 30 minutes d'incubation avec des IP à une concentration de OD 520 = 0,05 permis internalisation suffisante. </li></ol> 6. Imaging <ol><li> Utilisation d'un système d'imagerie confocale, tel qu'un laser à balayage confocal (CLSM) ou disque de filage (SD) microscope avec une chambre à environnement humidifié pour imagerie à haute résolution à différents points de temps. </li><li> Allumez la température control système et attendez jusqu'à ce qu'il soit stable. Optimiser les paramètres d'imagerie telles que l'agrandissement, la vitesse de numérisation, résolution, Z-pile, etc. Utiliser les paramètres d'excitation / émission appropriées pour la GFP et IP or BSA-rhodamine. Pour ce protocole, utiliser un 400 Hz vitesse de numérisation, résolution de 512 x 512 pixels et la taille Z-étape de 0,25 um. Exciter et GFP-BSA-or rhodamine utilisant un laser Ar (488 nm) et un laser HeNe (543 nm), respectivement. Inclure un (BF) canal lumineux sur le terrain pour observer la forme des cellules. Pour les autres systèmes de microscopie et des conditions d'infection, le réglage doivent être ajustées en conséquence. REMARQUE: Utilisez le même laser Ar comme la source de canal de BF et signal lumineux a été détectée avec un détecteur photomultiplicateur (PMT). </li><li> Au temps indiqué points pi, monter les diapositives de la chambre 8 puits contenant les cellules infectées sur la platine du microscope et enregistrer des images. </li></ol> 7. Analyse des Images <ol><li> Utilisez la microscopie logiciel d'analyse d'image (voir Salmonella intracellulaire. Ouvrez les données en cliquant sur 'Ouvrir' et en choisissant le fichier. NOTE: Vous pouvez également ouvrir les paquets de logiciels libres tels que ImageJ ou FIDJI peuvent être utilisés pour l'image des analyses quantitatives. </li><li> Dans la barre d'outils des objets du clic Surpass vue sur l'icône <img alt="Icône" fo:content-width=".1in" src="/files/ftp_upload/52058/52058icon1.jpg"> pour ajouter un nouvel élément de surface. Cliquez sur <img alt="Icône" fo:content-width=".1in" src="/files/ftp_upload/52058/52058icon2.jpg"> (Suivant). </li><li> Pour analyser une région d'intérêt (ROI), sélectionnez le segment un retour sur investissement. Dans une zone de visualisation, une section de rectangle bordé superposée sur l'image représente le retour sur investissement. Entrez les valeurs dans la direction x correspondant, y et champs Z-, ou cliquez directement sur les flèches dans le rectangle d'aperçu de modifier la taille et la position de la ROI. Puis cliquez sur <img alt="Icône" fo:content-width=".1in" src> = "/ Files / ftp_upload / 52058 / 52058icon2.jpg" /&gt; (Suivant). </li><li> Comme un canal source, sélectionnez le canal 3 (signal pour l'or-BSA-rhodamine IP). Cochez l'option lisse de mettre en place la douceur de la zone résultant. Définir une valeur manuellement ou accepter la valeur générée automatiquement. Pour Seuil, sélectionnez l'option absolue de l'intensité. </li><li> Pour le réglage de seuil, sélectionnez l'option manuelle et définir une valeur. Dans la zone de visualisation, un aperçu de seuil de surface se affiche en gris. </li><li> Dans l'onglet Classer Surfaces la surface résultante peut être filtrée par divers critères. Un filtre par défaut est «nombre de voxels&gt; 10 ', et d'autres filtres peuvent également être inclus en cliquant sur' Ajouter '. Si un filtrage ne est pas nécessaire, puis supprimez tous les filtres en cliquant sur le bouton Supprimer. Cliquez <img alt="Icône" fo:content-width=".1in" src="/files/ftp_upload/52058/52058icon2.jpg"> (Suivant). </li><li> Pour terminer la création de surface, cliquez sur/files/ftp_upload/52058/52058icon3.jpg "/&gt; (Terminer). Dans la liste d'objets, maintenant décochez la case pour le volume et la nouvelle surface créée élément se affiche dans la zone de visualisation. </li><li> Exporter les statistiques. Maintenant, dans la vue Surpass la couleur des sujets varient du violet au rouge en fonction de leur région. Et la table 'Numéros de courbe de surface' affiche les informations (par exemple, numéro d'identification et la zone d'objets) des statistiques. Export de toutes les statistiques de surface 1 à un fichier Excel par clic <img alt="Icône" fo:content-width=".1in" src="/files/ftp_upload/52058/52058icon4.jpg"> (Save). </li></ol>

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Aucun conflit d’intérêts n’a été déclaré.

Le système endo-lysosomal de cellules de mammifère contrôle les processus physiologiques importants, y compris l&#39;absorption des nutriments, l&#39;hormone de la transduction du signal à médiation par, la surveillance immunitaire et la présentation de l&#39;antigène 17. Jusqu&#39;à présent, divers marqueurs ont été utilisés pour le marquage des études de la voie d&#39;endocytose et de suivi. Par exemple, les sondes sont des sondes d&#39;Lysotracker acidotropic fluorescents mis au point par Molecular Probes ...

Nanoparticules fluorescentes (IP), y compris IP métalliques, points quantiques, IP, IP polymères de silice, des points de carbone, etc., ont attiré une attention considérable au cours des dernières décennies 1,2. Par rapport à des colorants organiques traditionnels, les IP fluorescents montrent chimiques, des propriétés optiques et mécaniques souhaitables, telles que la résistance forte du signal, la résistance au photoblanchiment et haut de 3,4 biocompatibilité. Ces avantages en font la méthode de choix pour la détection intracellulaire et imagerie des cellules vivantes. En outre, une variété de IP denses aux électrons sont visibles en microscopie électronique (EM), ce qui facilite leur utilisation pour l&#39;analyse microscopique corrélée, qui permet combinaison de suivi en microscopie optique (LM) et une résolution supérieure au niveau ultrastructural avec EM 5 cellules vivantes. Par exemple, les IP or ont été longtemps utilisé efficacement comme biocapteurs pour le diagnostic dans les cellules sensibles vie ainsi que dans le domaine de l&#39;immuno-marquage 6. S récentses études indiquent que les IP or avec la taille et de forme différentes peuvent être facilement absorption par une grande variété de lignées de cellules et de transporter régulièrement par la voie endosomale, ont donc grand potentiel étant appliquée pour le suivi du transport des vésicules intracellulaires et l&#39;étiquetage du système endo-lysosomale 7,8 . Les pathogènes microbiens, tels que Salmonella enterica, Shigella flexneri et Listeria monocytogenes, ont développé des mécanismes différents pour envahir les cellules hôtes non-phagocytaires neuf. Après avoir été intériorisé, les agents pathogènes, soit localisées dans le cytosol ou séquestrés dans les compartiments membranaires, interagissent beaucoup avec leur environnement d&#39;accueil et les moduler pour favoriser leur propre survie 10. Par exemple, Salmonella enterica réside et se multiplie dans un phagosome intracellulaire appelé la vacuole contenant Salmonella (SCV) lors de l&#39;infection 11. Le SCV maturationtrafics vers l&#39;appareil de Golgi, subissant interactions continues avec la voie d&#39;endocytose, et induit la formation de vastes structures tubulaires, tels que Salmonella filaments induites (SIF), le tri tubules nexine, Salmonella induite porteuses de sécrétion des protéines de la membrane 3 (SCAMP3) tubules, etc. . 12-14. Étudier comment ces agents pathogènes bactériens manipuler voies cellule hôte est essentielle pour comprendre les maladies infectieuses. Ici, NP or-BSA-rhodamine ont été utilisés comme marqueurs de fluide pour marquer le système endo-lysosomal cellulaire hôte et l&#39;agent pathogène gastro-intestinal Salmonella enterica sérovar Typhimurium humain (Salmonella) a été utilisé comme une bactérie modèle pour étudier les interactions de l&#39;agent pathogène avec le accueillir voie d&#39;endocytose. Intracellulaires IP or BSA-rhodamine dans les cellules et les cellules non infectées infectés par Salmonella WT ou souches mutantes ont été imagées par un microscope confocal à balayage laser (CLSM).Puis logiciels Imaris a été utilisée pour quantifier la distribution des IP, ce qui indique que l&#39;infection à Salmonella induit extrême réarrangement des endosomes / lysosomes. Après la description de cette méthode, des expériences analogues peuvent être conçus pour suivre devenir à long terme des IP intériorisés et d&#39;étudier l&#39;influence de diverses substances exogènes ou facteurs endogènes sur la voie d&#39;endocytose des cellules eucaryotes.

<table><tbody><tr><td>Chlorure</td><td>d’or Sigma-Aldrich</td><td>520918</td><td></td></tr><tr><td>Acide tannique</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>403040</td><td></td></tr><tr><td>Citrate tri-sodique</td><td>Sigma</td><td>C8532</td><td></td></tr><tr><td>Albumine sérique bovine</td><td>Sigma</td><td>A2153</td><td></td></tr><tr><td>NHS-Rhodamine</td><td>Pierce</td><td>46406</td><td></td></tr><tr><td>DMSO</td><td>Sigma</td><td>D8418</td><td></td></tr><tr><td>HEPES</td><td>Sigma</td><td>H3375</td><td></td></tr><tr><td>Gentamicin</td><td>Applichem</td><td>A1492</td><td></td></tr><tr><td>Kanamcyin</td><td>Roth</td><td>T832</td><td></td></tr><tr><td>Carbenicilline</td><td>Roth</td><td>6344</td><td></td></tr><tr><td>Lames de chambre à 8 puits</td><td>Ibidi</td><td>80826</td><td>traité par culture tissulaire, stérile</td></tr><tr><td>Imaris Software</td><td>Bitplane</td><td>version 7.6</td><td>diverses configurations disponibles</td></tr></tbody></table>

application de nanoparticules fluorescentes pour étudier rénovation du système endo-lysosomale par des bactéries intracellulaires

Application of Fluorescent Nanoparticles to Study Remodeling of the Endo-lysosomal System by Intracellular Bacteria

Nanoparticules fluorescentes (IP) avec des propriétés optiques et mécaniques et chimiques souhaitables, sont des outils prometteurs pour étiqueter organites intracellulaires. Ici, nous introduisons une méthode utilisant or-BSA-rhodamine IP d&#39;étiqueter le système de cellules eucaryotes endo-lysosomale et surveiller manipulations des voies cellulaires de l&#39;hôte par le pathogène intracellulaire Salmonella enterica. Les IP ont été facilement internalisées par les cellules HeLa et localisées à la fin des endosomes / lysosomes. Infection à Salmonella réarrangement des vésicules et l&#39;accumulation des IP dans les structures membranaires Salmonelle induites induit. Nous avons déployé le progiciel Imaris pour des analyses quantitatives des images de microscopie confocale. Le nombre d&#39;objets et de leur distribution de taille dans les cellules non infectées étaient distinctes de celles dans les cellules infectées par Salmonella, indique une très remodelage du système endo-lysosomale par WT Salmonella.

IP or ont été générés par une méthode bien établie par la réduction de l'acide chloroaurique par le citrate et l'acide tannique. Comme le montre la Figure 2A, les PN synthétisés or étaient quasi-sphérique avec une taille d'environ 10 nm. BSA-revêtement et de la rhodamine-étiquetage ne ​​ont pas d'influence sur la morphologie ou la taille (figure 2B). Il a été rapporté que les IP or peuvent être facilement absorbés par diverses cellules de mammifères et a fin...

Cet article décrit les méthodes pour la synthèse et le marquage fluorescent de nanoparticules (NP). Les IP ont été appliquées dans des expériences pulse-chase d&#39;étiqueter le système endo-lysosomale des cellules eucaryotes. La manipulation du système d&#39;endo-lysosomal par les activités de l&#39;agent pathogène intracellulaire Salmonella enterica ont été suivis par imagerie des cellules vivantes et quantifiée.

Application de nanoparticules fluorescentes pour étudier Rénovation du système Endo-lysosomale par des bactéries intracellulaires

Fluorescent nanoparticles (NPs) with desirable chemical, optical and mechanical properties are promising tools to label intracellular organelles. Here, we ...

L’objectif global de cette procédure est d’étudier le remodelage du système lysosomal final par des bactéries intracellulaires en utilisant des nanoparticules fluorescentes comme traceurs. Pour ce faire, il faut d’abord ensemencer des cellules heela dans une lame de chambre à huit puits et les incuber pendant la nuit. La deuxième étape consiste à infecter les cellules avec de la salmonelle et de la tarica.Ensuite, un marquage par chasse d’impulsions des cellules hôtes infectées est effectué par incubation avec des nanoparticules d’or BSA Rumine. La dernière étape consiste à observer les altérations du système endosomal de la cellule hôte par microscopie confocale. En fin de compte, la quantification de la distribution intracellulaire des nanoparticules est effectuée à l’aide du progiciel MRS.Le principal avantage de cette technique par rapport aux méthodes existantes telles que l’immunomicroscopique, est que n cellules infectées sont analysées avec la méthode, peut fournir un aperçu du mode de vie intracellulaire de terica. Cependant, il peut également être appliqué à d’autres agents pathogènes intracellulaires tels que l’espèce Gaia, Ella Prolia ou mycobacterium tuberculosis. Il p

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Immunology and Infection

Immunologie et infection

Source : Zhang, Y., et al. Application de nanoparticules fluorescentes pour étudier le remodelage du système endo-lysosomal par des bactéries intracellulaires. J. Vis. Exp. (2015)Cette vidéo démontre l’utilisation de nanoparticules fluorescentes pour visualiser le remodelage endo-lysosomal dans les cellules épithéliales humaines infectées par des bactéries intracellulaires. À la suite d’une invasion bactérienne, les agents pathogènes manipulent le cytosquelette de l’hôte et le système...

Visualisation médiée par des nanoparticules du remodelage endo-lysosomal dans des cellules infectées par des bactéries

Nous décrivons des méthodes d'imagerie nous utilisons pour étudier la distribution et la mobilité des protéines fluorescentes transfectées résidant dans le réticulum endoplasmique (RE) par l'intermédiaire de l'imagerie confocale de cellules vivantes. Nous analysons également ultrastructuralement l'effet de leur expression sur l'architecture de ce compartiment subcellulaire.

Visualisation de réticulum endoplasmique sous-domaines dans les cellules cultivées

Phagocytic cells play a major role in the innate immune system by removing and eliminating invading microorganisms in their phagosomes. Phagosome ...

Étude de phagolysosome biogenèse dans les macrophages en direct

Cet article présente deux protocoles : l’un pour mesurer les bactéries anaérobies qui peuvent envahir et survivre avec succès dans l’hôte, et l’autre pour visualiser les bactéries anaérobies interagissant avec les cellules hôtes. Cette étude peut être appliquée à n’importe quel anaérobie cultivable et à tout type de cellule eucaryote.

Porphyromonas gingivalis comme un organisme modèle pour l&#39;évaluation de l&#39;interaction des bactéries anaérobies avec des cellules hôtes

L'étude du trafic membranaire est cruciale pour comprendre les fonctions neuronales. Ici, nous introduisons un procédé pour quantifier la motilité des vésicules dans les neurones. C'est une méthode pratique qui peut être adaptée à la quantification du trafic membranaire dans le système nerveux.

Quantification des molécules d&#39;endosome et de lysosome dans les neurones cultivés utilisant des sondes fluorescentes

Transport rétrograde des protéines de la surface de la cellule de l’appareil de Golgi est essentielle pour maintenir l’homéostasie de la membrane. Nous décrivons ici une méthode pour analyser biochimiquement transport de surface-à-Golgi cellulaire des protéines recombinantes, nanocorps fonctionnalisés dans les cellules HeLa.

Analyse de l’endocytose absorption et Transport rétrograde au réseau Trans-Golgi dans des cellules cultivées à l’aide de Nanocorps fonctionnalisés

Cet article fournit un guide étape par étape pour étudier la dynamique de localisation sous-cellulaire des protéines et pour surveiller les changements morphologiques à l'aide de la microscopie à haute résolution de fluorescence dans Bacillus subtilis et Staphylococcus aureus.

Microscopie de fluorescence à cellules vivantes pour étudier la localisation des protéines subcellulaires et les changements de morphologie cellulaire chez les bactéries

Les endosomes de recyclage font partie du réseau tubulaire endosomal. Nous présentons ici une méthode pour quantifier la dynamique du recyclage des endosomes en utilisant GFP-STX13 comme marqueur d’organite.

Le test basé sur la microscopie pour étudier et analyser les endosomes de recyclage à l’aide du trafic SNARE

Le transport endocytaire et rétrograde des protéines de la membrane plasmique vers le réseau trans-Golgi est essentiel au maintien de l’homéostasie membranaire et à la régulation de la signalisation. Ici, nous décrivons une méthode pour imager et quantifier le transport endocytaire de protéines cargo transmembranaires par microscopie à cellules vivantes en utilisant des nanocorps anti-GFP dérivés dans des cellules HeLa.

Imagerie de cellules vivantes du transport endocytaire à l’aide de nanocorps fonctionnalisés dans des cellules en culture

Nous décrivons une méthode multiplex pour la détection des microorganismes dans un échantillon à l'aide d'oligonucléotides couplés billes fluorescentes. Amplicon de tous les organismes au sein d'un échantillon est hybridé à un panel de sondes couplées perles. Un instrument Luminex ou Bio-Plex est utilisé pour interroger chaque perle pour le type de perle et le signal d'hybridation.

Détection multiplex de bactéries dans les échantillons complexes cliniques et environnementaux à l&#39;aide d&#39;oligonucléotides couplés microsphères fluorescentes

Découvrez comment étudier le remodelage du système endo-lysosomal par Salmonella enterica en utilisant des nanoparticules fluorescentes et l'imagerie confocale. Cette méthode permet de quantifier la distribution intracellulaire.

Application de nanoparticules fluorescentes pour étudier Rénovation du système Endo-lysosomale par des bactéries intracellulaires (Vidéo) | JoVE Journal

Application de nanoparticules fluorescentes pour étudier Rénovation du système Endo-lysosomale par des bactéries intracellulaires

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