Name: Quantification de Orofacial phénotypes dans Xenopus (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-11-06T15:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 26 s
Description: Apprenez à quantifier les phénotypes orofaciaux chez Xenopus laevis en combinant mesures dimensionnelles et morphométrie géométrique. Cette méthode permet d'analyser finement le développement facial et les défauts congénitaux.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Fonds de démarrage à A. Dickinson engagement soutenu ce travail. Les auteurs tiennent à remercier Dan Nacu pour son talent artistique dans la création de la représentation schématique.

<ol><li>Mossey, P. A., Little, J., Munger, R. G., Dixon, M. J., Shaw, W. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cleft+lip+and+palate%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Cleft lip and palate.</a> Lancet. 374, 1773-1785 (2009).</li>
<li>Kennedy, A. E., Dickinson, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Median+facial+clefts+in+Xenopus+laevis%3A+roles+of+retinoic+acid+signaling+and+homeobox+genes%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Median facial clefts in Xenopus laevis: roles of retinoic acid signaling and homeobox genes.</a> Dev Biol. 365, 229-240 (2012).</li>
<li>Kennedy, A. E., Dickinson, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+Analysis+of+Orofacial+Development+and+Median+Clefts+in+Xenopus+Laevis%5BTitle%5D)+AND+%22Anat+Rec+%28Hoboken%29%22%5BJournal%5D)">Quantitative Analysis of Orofacial Development and Median Clefts in Xenopus Laevis.</a> Anat Rec (Hoboken). , (2014).</li>
<li>Dickinson, A., Sive, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Positioning+the+extreme+anterior+in+Xenopus%3A+cement+gland%2C+primary+mouth+and+anterior+pituitary%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Cell+Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Positioning the extreme anterior in Xenopus: cement gland, primary mouth and anterior pituitary.</a> Semin Cell Dev Biol. 18, 525-533 (2007).</li>
<li>Dickinson, A. J., Sive, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+the+primary+mouth+in+Xenopus+laevis%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Development of the primary mouth in Xenopus laevis.</a> Dev Biol. 295, 700-713 (2006).</li>
<li>Dickinson, A. J., Sive, H. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Wnt+antagonists+Frzb-1+and+Crescent+locally+regulate+basement+membrane+dissolution+in+the+developing+primary+mouth%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">The Wnt antagonists Frzb-1 and Crescent locally regulate basement membrane dissolution in the developing primary mouth.</a> Development. 136, 1071-1081 (2009).</li>
<li>Barnett, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Syndrome+Transcription+Factor+is+critical+for+neural+crest+cell+function+in+Xenopus+laevis%5BTitle%5D)+AND+%22Mech+Dev%22%5BJournal%5D)">Syndrome Transcription Factor is critical for neural crest cell function in Xenopus laevis.</a> Mech Dev. 129, 324-338 (2012).</li>
<li>Gonzales, B., Yang, H., Henning, D., Valdez, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cloning+and+functional+characterization+of+the+Xenopus+orthologue+of+the+Treacher+Collins+syndrome+%28TCOF1%29+gene+product%5BTitle%5D)+AND+%22Gene%22%5BJournal%5D)">Cloning and functional characterization of the Xenopus orthologue of the Treacher Collins syndrome (TCOF1) gene product.</a> Gene. 359, 73-80 (2005).</li>
<li>Reisoli, E., De Lucchini, S., Nardi, I., Ori, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Serotonin+2B+receptor+signaling+is+required+for+craniofacial+morphogenesis+and+jaw+joint+formation+in+Xenopus%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Serotonin 2B receptor signaling is required for craniofacial morphogenesis and jaw joint formation in Xenopus.</a> Development. 137, 2927-2937 (2010).</li>
<li>Schuff, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((FoxN3+is+required+for+craniofacial+and+eye+development+of+Xenopus+laevis%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Dyn%22%5BJournal%5D)">FoxN3 is required for craniofacial and eye development of Xenopus laevis.</a> Dev Dyn. 236, 226-239 (2007).</li>
<li>Slater, B. J., Liu, K. J., Kwan, M. D., Quarto, N., Longaker, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cranial+osteogenesis+and+suture+morphology+in+Xenopus+laevis%3A+a+unique+model+system+for+studying+craniofacial+development%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Cranial osteogenesis and suture morphology in Xenopus laevis: a unique model system for studying craniofacial development.</a> PLoS One. 4, (2009).</li>
<li>Vandenberg, L. N., Adams, D. S., Levin, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Normalized+shape+and+location+of+perturbed+craniofacial+structures+in+the+Xenopus+tadpole+reveal+an+innate+ability+to+achieve+correct+morphology%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Dyn%22%5BJournal%5D)">Normalized shape and location of perturbed craniofacial structures in the Xenopus tadpole reveal an innate ability to achieve correct morphology.</a> Dev Dyn. 241, 863-878 (2012).</li>
<li>Bugaighis, I., Mattick, C. R., Tiddeman, B., Hobson, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((3D+Facial+Morphometry+in+Children+with+Oral+Clefts%5BTitle%5D)+AND+%22Cleft+Palate+Craniofac+J%22%5BJournal%5D)">3D Facial Morphometry in Children with Oral Clefts.</a> Cleft Palate Craniofac J. , (2013).</li>
<li>Farkas, L. G., Katic, M. J., Forrest, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surface+anatomy+of+the+face+in+Down%27s+syndrome%3A+anthropometric+proportion+indices+in+the+craniofacial+regions%5BTitle%5D)+AND+%22J+Craniofac+Surg%22%5BJournal%5D)">Surface anatomy of the face in Down's syndrome: anthropometric proportion indices in the craniofacial regions.</a> J Craniofac Surg. 12, 519-524 (2001).</li>
<li>Scheuer, H. A., Holtje, W. J., Hasund, A., Pfeifer, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prognosis+of+facial+growth+in+patients+with+unilateral+complete+clefts+of+the+lip%2C+alveolus+and+palate%5BTitle%5D)+AND+%22J+Craniomaxillofac+Surg%22%5BJournal%5D)">Prognosis of facial growth in patients with unilateral complete clefts of the lip, alveolus and palate.</a> J Craniomaxillofac Surg. 29, 198-204 (2001).</li>
<li>Parsons, K. J., Andreeva, V., James Cooper, W., Yelick, P. C., Craig Albertson, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Morphogenesis+of+the+zebrafish+jaw%3A+development+beyond+the+embryo%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Morphogenesis of the zebrafish jaw: development beyond the embryo.</a> Methods Cell Biol. 101, 225-248 (2011).</li>
<li>Farkas, L. G., Katic, M. J., Forrest, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surface+anatomy+of+the+face+in+Down%27s+syndrome%3A+age-related+changes+of+anthropometric+proportion+indices+in+the+craniofacial+regions%5BTitle%5D)+AND+%22J+Craniofac+Surg%22%5BJournal%5D)">Surface anatomy of the face in Down's syndrome: age-related changes of anthropometric proportion indices in the craniofacial regions.</a> J Craniofac Surg. 13, 368-374 (2002).</li>
<li>Cooper, W. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bentho-pelagic+divergence+of+cichlid+feeding+architecture+was+prodigious+and+consistent+during+multiple+adaptive+radiations+within+African+rift-lakes%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Bentho-pelagic divergence of cichlid feeding architecture was prodigious and consistent during multiple adaptive radiations within African rift-lakes.</a> PLoS One. 5, (2010).</li>
<li>Klingenberg, C. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prenatal+alcohol+exposure+alters+the+patterns+of+facial+asymmetry%5BTitle%5D)+AND+%22Alcohol%22%5BJournal%5D)">Prenatal alcohol exposure alters the patterns of facial asymmetry.</a> Alcohol. 44, 649-657 (2010).</li>
<li>Zhao, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolated+cleft+palate+in+mice+with+a+targeted+mutation+of+the+LIM+homeobox+gene+lhx8%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Isolated cleft palate in mice with a targeted mutation of the LIM homeobox gene lhx8.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 96, 15002-15006 (1999).</li>
<li>Allam, K. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+spectrum+of+median+craniofacial+dysplasia%5BTitle%5D)+AND+%22Plast+Reconstr+Surg%22%5BJournal%5D)">The spectrum of median craniofacial dysplasia.</a> Plast Reconstr Surg. , 812-821 (2011).</li>
<li>Sive, H. L., Grainger, R., Harlard, R. Early development of Xenopus laevis: a laboratory manual. , Cold Spring Harbor Laboratory Press. (2000).</li>
<li>Cross, M. K., Powers, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Obtaining+eggs+from+Xenopus+laevis+females%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Obtaining eggs from Xenopus laevis females.</a> J Vis Exp. , (2008).</li>
<li>Nieuwkoop, P. D., Faber, J. Normal Table of Xenopus Laevis (Daudin). , Garland Publishing Inc. (1967).</li>
<li>Nieuwkoop, P. D. aF. J. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aNieuwkoop%2C+PDaFJ+%22Normal+Table+of+Xenopus+laevis+%28Daudin%29%3A+A+Systematical+and+Chronological+Survey+of+the+Development+from+the+Fertilized+Egg+till+the+End+of+Metamorphosis%22">Normal Table of Xenopus laevis (Daudin): A Systematical and Chronological Survey of the Development from the Fertilized Egg till the End of Metamorphosis</a>. , Garland Publishing Inc. (1994).</li>
<li>Abdi, H., Williams, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Principal+Component+Analysis%5BTitle%5D)+AND+%22WIREs+Computational+Statistics%22%5BJournal%5D)">Principal Component Analysis.</a> WIREs Computational Statistics. 2, (2010).</li>
<li>Hill, T. L. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aHill%2C+TL+%22P.+STATISTICS%3A+Methods+and+Applications%22">P. STATISTICS: Methods and Applications</a>. , StatSoft, Inc. Tulsa, OK. (2013).</li>
</ol>

Les auteurs ont rien à divulguer.

Xenopus laevis est devenu un outil utile pour disséquer les mécanismes de développement de développement oro-facial sous-jacent; Cependant, il n&#39;y a actuellement aucun protocole décrivant taille et la forme des changements de cette région chez les grenouilles. La méthode décrite ici contribuera de manière significative dans le domaine du développement oro-faciale en permettant une quantification plus rigoureuse des phénotypes oro-faciales chez le xénope et autres vertébrés. <p class="jove_conte...

Parmi les types les plus répandus et les plus dévastatrices de malformations congénitales humaines sont celles qui touchent la bouche et du visage, comme les fentes faciales 1. Les enfants atteints de malformations oro-faciales structures subissent des chirurgies multiples tout au long de leur durée de vie et luttent avec défigurations faciales, de la parole, de l&#39;ouïe et des problèmes d&#39;alimentation. Par conséquent, faciliter de nouvelles recherches dans le développement cranio et oro-facial est primordiale pour la prévention et le traitement de ces types d&#39;anomalies congénitales chez les humains. Xenopus laevis a émergé comme un nouvel outil pour disséquer les mécanismes qui régissent le développement cranio-facial (quelques exemples 2,3,4 -11). Par conséquent, une méthode quantitative pour analyser taille et la forme des changements au cours du développement de la tête et le visage de cette espèce pourrait être très puissant 3. Ici, nous présentons une telle méthode; combinant les mesures de taille traditionnels avec la morphométrie géométrique adaptées d&#39;une étude Xenopus 12 </sup&gt; et un grand nombre d&#39;études analysant la forme du visage humain 13-15. Le but de ce protocole est de permettre aux chercheurs de quantifier la taille du visage et des formes de distinction entre les différents phénotypes oro-faciales au cours du développement normal et anormal. Cette analyse permettra de mieux différencier les défauts cranio-faciales subtiles telles que celles découlant des effets synergiques de gènes et / ou des facteurs environnementaux. En outre, cette méthode de quantification pourrait également révéler même légère amélioration ou de sauvetage d&#39;un défaut oro-facial. Ceci permet donc un guide utile dans l&#39;analyse des agents thérapeutiques potentiels. La combinaison de mesures faciales et morphométrie géométrique que nous présentons ici permet une analyse statistique plus complet de la taille et la forme de la région oro-faciale que les protocoles actuels qui utilisent en grande partie l&#39;un ou l&#39;autre 15-18. En outre, nous présentons une méthode simple pour évaluer à la fois la médiane et plans latéraux dele visage sans nécessiter d&#39;équipement d&#39;imagerie en trois dimensions sophistiqués utilisés dans les études actuelles 13,19. Nous démontrons ce protocole sur Xenopus laevis embryons traités avec un inhibiteur du récepteur de l&#39;acide rétinoïque qui induit le développement bucco-faciale anormale et une fente palatine 2,3 médian. La quantification des dimensions et de la forme de la région orofaciale dans ces embryons ont révélé des changements dans le milieu du visage qui est analogue à l&#39;homme avec des fentes palatines similaires et des modèles de souris 20,21. Cependant, ce protocole peut être utilisé pour évaluer les effets d&#39;autres composés sur le développement orofaciale, tels que des substances naturelles, des herbicides ou des protéines telles que des facteurs de croissance. En outre, la taille et de la forme change oro-faciales résultant de la perturbation de l&#39;expression des gènes par la perte ou le gain d&#39;expériences de fonction (en utilisant morpholinos antisens ou bacs à légumes / Talens) peuvent également être quantifiés en utilisant ce protocole. Enfin, nous avons développé cette méthode specifically à évaluer Xenopus morphologie; cependant, il est facilement modifiée pour l&#39;analyse de tout vertébré. D&#39;autres applications pourraient aussi inclure l&#39;utilisation de ce protocole pour comparer espèces étroitement apparentées pour les études évolutives ou écologiques. Bien que l&#39;exemple que nous fournissons ici utilise ce protocole pour décrire l&#39;analyse de la région oro-faciale, il pourrait facilement être modifié pour l&#39;analyse d&#39;autres régions, des organes ou structures. Ce protocole de quantification orofaciale deviendra une ressource précieuse pour la communauté de la recherche, ainsi que d&#39;un excellent outil d&#39;enseignement pour les étudiants de premier cycle comme une vidéo de démonstration.

<table><tbody><tr><td>Microscope de dissection</td><td>Zeiss équipé d’une</td><td></td><td>caméra AxioCamICC1</td></tr><tr><td>Dumont #5 Pince en inox</td><td>Outils de science fine</td><td>11251-10</td><td></td></tr><tr><td>Scalpel stérile et jetable</td><td>Sklar</td><td>06-2015</td><td></td></tr><tr><td>Plaque 24 puits</td><td>Fisher Scientific</td><td>087721</td><td></td></tr><tr><td>Standard Pipettes de transfert jetables</td><td>Fisher Scientific</td><td>13-711-7M</td><td></td></tr><tr><td>Boîtes de Pétri de 150 mm x 15 mm</td><td>Falcon</td><td>351058</td><td></td></tr><tr><td>Incubateurs</td><td>Ectotherm</td><td></td><td>réglés à 15 &deg ; C ou 20 &deg ; C</td></tr><tr><td>Pâte à modeler</td><td>Premo, ou autre pâte</td><td></td> à modeler non toxique <td>en noir ou blanc</td></tr><tr><td>Aiguille à taquiner droite</td><td>Thermo Scientific</td><td>19010</td><td></td></tr><tr><td>Tube capillaire (pour aiguilles)</td><td>FHC</td><td>30-30-1</td><td>Borosil 1,0 mm OD x 0,5 mm ID/Fibre, 100 mm chacun</td></tr><tr><td>Extracteur d’aiguille, Modèle P-97</td><td>Sutter Instrument Co.</td><td>Extracteur d’aiguille : P-97 Tireur de micropipette Flaming/ Bown Filament : FB300B</td><td>Pour les filaments, utilisez des filaments carrés Sutter de 3,00 mm de large.</td></tr><tr><td>Pipettes</td><td>Gilson</td><td>F144802, F123600, F123602</td><td></td></tr><tr><td>BMS-453</td><td>Tocris</td><td>3409</td><td></td></tr><tr><td>DMSO</td><td>Bioanalytique américain</td><td>AB00435-01000</td><td></td></tr><tr><td>Cystéine</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>52-90-4</td><td></td></tr><tr><td>Poudre de paraformaldéhyde</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>158127</td><td></td></tr><tr><td>boîtes de Pétri</td><td>Falcom</td><td>353003, 351058</td><td>100 mm de diamètre et 150 mm de diamètre</td></tr><tr><td>100 % éthanol</td><td>VWR</td><td>89125-170</td><td></td></tr></tbody></table>

quantification de orofacial phénotypes dans xenopus

Quantification of Orofacial Phenotypes in Xenopus

Xenopus est devenu un outil important pour disséquer les mécanismes qui régissent le développement cranio-faciale et des anomalies. Une méthode pour quantifier le développement bucco-faciale permettra une analyse plus rigoureuse des phénotypes orofaciaux sur l&#39;abrogation des substances qui peuvent génétiquement ou moléculaire manipuler l&#39;expression des gènes ou la fonction des protéines. L&#39;utilisation de deux images tridimensionnelles des chefs embryonnaires, dimensions telles de taille traditionnels que la largeur bucco-faciale, la hauteur et Area-sont mesurés. En outre, une mesure de la rondeur de l&#39;ouverture de bouche embryonnaire est utilisé pour décrire la forme de la bouche. Morphométrie géométrique de ces images en deux dimensions est également effectuée pour fournir une vue plus sophistiqué de l&#39;évolution de la forme de la région oro-facial. Sites d&#39;intérêt sont affectés à des points spécifiques de la région oro-faciale et coordonnées sont créés. Une analyse en composantes principales est utilisé pour réduire les coordonnées de point de repère aux principaux composants qui constituent une discrimination alors le traitementgroupes. Ces résultats sont affichés sous forme de nuage de points dans lequel les individus avec des formes oro-faciales similaires se regroupent. Il est également utile pour effectuer une analyse discriminante, qui compare statistiquement les positions des points de repère entre les deux groupes de traitement. Cette analyse est affichée sur une grille de transformation où les changements de position de point de repère sont considérés comme des vecteurs. Une grille se superpose à ces vecteurs de sorte qu&#39;un motif de déformation est affichée pour montrer où les positions historiques importantes ont changé. les changements de forme dans l&#39;analyse de la fonction discriminante sont basées sur une mesure statistique, et peuvent donc être évalués par un p-valeur. Cette analyse est simple et accessible, nécessitant seulement un stéréoscope et logiciel freeware, et donc sera une recherche et d&#39;enseignement ressource précieuse.

Ici, une analyse quantitative de la taille et de la forme orofaciale a été démontrée pour comparer les embryons traités avec un inhibiteur du récepteur de l'acide rétinoïque (un inhibiteur de RAR) à des témoins non traités. Les embryons ont été traitées avec une concentration de 1 uM de cet inhibiteur chimique de l'étape 24 à 30 (26 à 35 hpf), lavées, fixées et, à l'étape 42 (82 hpf). Ils ont ensuite été traités et analysés comme décrit dans le protocole. Les résultats sont données originales, mais cohérent avec les obs...

Procédé pour quantifier la taille et la forme de orofaciale embryons de Xenopus laevis a été développé. Dans ce protocole, les mesures traditionnelles de taille sont combinés avec la morphométrie géométrique pour permettre des analyses plus poussées de développement oro-faciale et des anomalies.

Quantification de Orofacial phénotypes dans Xenopus

Xenopus has become an important tool for dissecting the mechanisms governing craniofacial development and defects. A method to quantify orofacial ...

L’objectif général de la procédure suivante est de décrire les phénotypes faciaux oraux des embryons de xap Levis de manière statistique quantitative. Ceci est réalisé en montant d’abord des têtes d’embryons xip détachées dans un moule en argile pour la documentation photographique à l’aide des images. Les dimensions faciales sont mesurées pour fournir des informations sur la taille de la région buccale du visage.Ensuite, des repères sont appliqués via la morphométrie géométrique pour évaluer la forme de la région faciale buccale. Les résultats montrent des changements significatifs de taille et de forme dans la région faciale buccale de l’Opus sur la base d’analyses statistiques des dimensions faciales et de la position relative du point de repère. Bien que cette méthode puisse donner un aperçu de l’opus ou du développement facial, elle peut également être appliquée à d’autres études morphologiques de vertébrés, telles que des comparaisons d’espèces étroitement apparentées à des fins évolutives ou écologiques.Cette section explique comment fabriquer des plats en argile pour contenir des têtes d’embryons pour leur documentation photo. Tout d’abord, aplatissez de la pâte à modeler d

quantification-of-orofacial-phenotypes-in-xenopus

Research

Recherche

JoVE Journal

Biology

Biologie

Xenopus embryonnaire épithéliums sont un système modèle idéal pour étudier les comportements cellulaires tels que le développement de polarité et changer de forme lors de la morphogenèse épithéliale. Histologie classique d'échantillons fixe est de plus en plus complétée par des cellules vivantes imagerie confocale. Ici nous démontrons méthodes pour isoler les tissus de grenouilles et de visualiser en direct les cellules épithéliales et de leur cytosquelette des cellules vivantes en utilisant la...

Imagerie des cellules vivantes et de l&#39;analyse quantitative des cellules embryonnaires épithéliales Xenopus laevis</em

Cartilages craniofaciale développent en contact étroit avec d'autres tissus et sont difficiles à manipuler des animaux vivants. Nous utilisons l'électroporation pour offrir des outils moléculaires lors de la croissance du squelette cranio-facial tout en contournant les premiers effets embryonnaire. Cette approche nous permettra de tester efficacement des molécules...

Electroporation de Mesenchyme craniofaciale

Une technique de transplantation de "Extreme antérieur domaine" mouchoirs entre les embryons de Xenopus laevis a été développé. Tissu peut être déplacé d'un gène expression fond dans un autre, ce qui permet l'étude des besoins locaux pour le développement cranio-facial et d'interactions entre les régions du visage de signalisation.

Transplantations faciales<em&gt; Xenopus laevis</em&gt; Embryons

Dans les embryons de xénope, les cellules du toit du blastocèle sont pluripotentes et peuvent être programmées pour générer divers tissus. Ici, nous décrivons des protocoles permettant d’utiliser des explants de toit de blastocèle d’amphibiens comme système de test pour étudier les principales caractéristiques in vivo et in vitro du développement neuronal précoce.

Stem Cell-like<em&gt; Xenopus</em&gt; Embryonnaires explants à étudier les caractéristiques du développement précoce Neural<em&gt; In Vitro</em&gt; Et<em&gt; In Vivo</em

Ce protocole démontre une méthode à base de fluorescence pour visualiser le système vasculaire et pour quantifier sa complexité chez Xenopus tropicalis . Les vaisseaux sanguins peuvent être imagés quelques minutes après l'injection d'un colorant fluorescent dans le coeur battant d'un embryon après des manipulations génétiques et / ou pharmacologiques pour étudier le développement cardiovasculaire in vivo .

Visualisation et analyse quantitative de l&#39;angiogenèse embryonnaire dans<em&gt; Xenopus tropicalis</em

Les têtards de Xenopus offrent une plate-forme unique pour étudier la fonction du système nerveux in vivo. Nous décrivons des méthodologies pour évaluer le traitement de l’information olfactive vie Xenopus larves dans des conditions normales d’élevage ou après une blessure.

Évaluation fonctionnelle des voies olfactives chez les têtards de Xenopus vivant

Ce protocole vise à démontrer comment microinjecter un mélange ADN/DOTAP dans les œilcs d'embryons de Xenopus laevis d'un jour, et comment imager et reconstruire la protéine fluorescente verte individuelle (GFP) exprimant des arborescences axonales optiques dans les midbrains tectal de intacts, les têtards Xenopus vivants.

Microinjection d'ADN dans eyebuds in Xenopus laevis Embryos and Imaging of GFP Expressing Optic Axonal Arbors in Intact, Living Xenopus Tadpoles

Les régulateurs des fonctions mélanocytaires régissent les différences visibles dans le résultat de la pigmentation. Déchiffrer la fonction moléculaire du gène de pigmentation candidat pose un défi. Ici, nous démontrons l’utilisation d’un système modèle de poisson zèbre pour identifier les candidats et les classer en régulateurs de la teneur en mélanine et du nombre de mélanocytes.

Approche génétique inverse pour identifier les régulateurs de pigmentation à l’aide du poisson zèbre

Le système oculaire de la drosophile est un outil utile pour étudier divers processus biologiques, en particulier les maladies neurodégénératives humaines. Cependant, la quantification manuelle des phénotypes de l’œil rugueux peut être biaisée et peu fiable. Nous décrivons ici une méthode par laquelle ilastik et Flynotyper sont utilisés pour quantifier le phénotype oculaire de manière non biaisée.

Quantification des phénotypes oculaires de Drosophila melanogaster : une approche computationnelle intégrant ilastik et Flynotyper

Ici, nous présentons un flux de travail rapide et peu coûteux pour l’imagerie haute résolution des yeux de la drosophile adulte afin de quantifier les motifs et les défauts de croissance. Nous décrivons notre protocole de préparation d’échantillons par montage ponctuel, acquisition d’images haute résolution et analyse d’images.

Un flux de travail simple et rapide pour la quantification des structures externes de la drosophile adulte

Ce travail décrit un protocole pour quantifier la forme du cartilage craniofacial à l’aide de logiciels libres (tpsDigs2, MorphoJ et PAST) pour mesurer les changements de structure faciale chez les larves de poisson-zèbre.

Analyses morphométriques de la forme : la boîte à outils logicielle d’analyse pour la quantification de la forme craniofaciale chez le poisson-zèbre

Apprenez à quantifier les phénotypes orofaciaux chez Xenopus laevis en combinant mesures dimensionnelles et morphométrie géométrique. Cette méthode permet d'analyser finement le développement facial et les défauts congénitaux.

Quantification de Orofacial phénotypes dans Xenopus

Explorer plus de vidéos